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【中文期刊】 张继红 张靖 等 《生物技术》 2010年20卷5期 40-42页 ISTICCA
【摘要】 目的:重叠延伸PCR(OE-PCR)方法合成人血管内皮生长因子(VEGF)基因.方法:根据Genbank中人VEGF基因的编码序列合成15个寡核苷酸片段,相邻引物间均有19个碱基互补,经过7轮PCR循环扩增出人VEGF基因,并将其克隆至pM...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周仁芳 曾爱平 《中国实验诊断学》 2008年12卷7期 860-863页 ISTIC
【摘要】 目的 了解浙江沿海地区汉族人群中CYP2D6基因拷贝数多态性分布.方法 使用改良的长模板PCR技术对浙江沿海地区汉族人群中的285例健康人群,进行CYP2D6基因拷贝数多态性进行检测.结果 CYP2D6*5缺失型和CYP2D6*×N重复基因...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 《天津医科大学学报》 2000年6卷3期 271-273页 ISTIC
【摘要】 目的：以简便、特异的方法获取目的基因片段用于体外构建重组体。方法：以引物互为模板的聚合酶链反应合成目的基因片段。该目的基因片段经限制性内切核酸酶水解后被连接至克隆载体，克隆后经筛选并电泳鉴定。结果：以聚合酶链反应合成了目的基因片段，并获得相...
【关键词】 人血管生长因子； 聚合酶链反应(PCR)； 引物互为模板；
- 概要：
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【中文期刊】 薛朝阳 周雪平 等 《生物化学与生物物理学报》 2000年32卷3期 270-274页 SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 利用RT-PCR技术获得了含烟草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)的全长基因组cDNA, 并克隆至pT7Blue载体中. 以获得的全长cDNA及其PCR产物为模板分别进行体外转录, 接种试验发现转录产物均具有侵染活性. 比较两种方法发现以PC...
【关键词】 烟草花叶病毒； 侵染性全长cDNA克隆； 长模板PCR；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 白向阳 吕安国 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷2期 181-184页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的PCR产物克隆于T载体上,经转化JM109感受态菌株后,随机挑取8个白斑菌落,混合后制成混合模板.采用3条引物,做两轮重叠PCR反应,获得了...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 唐晔盛 李英 等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷2期 316-318页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 一种利用菌落直接PCR扩增DNA并用于测序的实验方法.通过对引物的设计和菌液浓度控制,使PCR反应后的内容物对测序干扰减到最小.与传统的测序过程比较,它省去了抽提模板DNA一步,节省了大量时间和实验成本.另外此方法可对BAC亚克隆库构建时由...
- 概要：
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【中文期刊】 鞠斌 王卫 等 《中国比较医学杂志》 2012年22卷10期 37-42页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究.方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵泽赟 刘淑英 等 《中国人兽共患病学报》 2011年27卷6期 547-551页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 为能够更加准确、敏感的检测绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis SPA).方法 本试验通过外源性绵羊肺腺瘤病毒的囊膜基因env的TM区和长末端重复序列LTR的U3区分别设计特异性的内外侧引物,运用巢式...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 郑梅竹 时东方 等 《基因组学与应用生物学》 2009年28卷5期 865-868页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究采用扩增条件优化的PCR扩增技术,以MDCC-MSBl细胞基因组DNA为模板扩增出鸡端粒酶RNA(chicken telomerase RNA,chTR)全长基因,克隆到pMD18-T载体中,经酶切鉴定和PCR鉴定后测定序列.序列分析...
【关键词】 鸡端粒酶RNA基因； 基因克隆； Touch-down PCR；
- 概要：
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【中文期刊】 刘娜娜 季孔庶 《基因组学与应用生物学》 2009年28卷5期 975-980页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究利用改良CTAB法从珍珠黄杨叶片中提取基因组DNA作为模板,在TaqDNA聚合酶量不变的基础上,利用正交设计L_9(3~4)对4个因素(模板DNA、Mg~(2+)、dNTP和引物)在3个水平上对珍珠黄杨ITS-PCR反应体系进行优化....
【关键词】 珍珠黄杨； CTAB； ITS-PCR反应体系；
- 概要：
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【中文期刊】 张幼芳 《生物技术通报》 2009年z1期 147-150页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为建立一种适于法庭科学实践的植物物证DNA提取优化方法,以期获得高质量的适于PCR分析的模板DNA.用8种方法从不同植物的干叶片中提取DNA,利用线粒体DNA非编码区的PCR扩增结果分析评价提取DNA的质量.结果表明8种DNA提取方法所提取...
- 概要：
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【中文期刊】 杨小敏 Berata Szostakowska 《中国病原生物学杂志》 2007年2卷6期 443-444,442页 ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 巢式PCR方法扩增恶性疟原虫DHFR基因直接进行DNA序列测序.方法 在巢式PCR程序中,设置2次退火(退火45 ℃45 s;退火65 ℃ 1 min),产生足量的DNA模板,进行其序列测试.结果 共测试2组样本,dhfr基因序列全长...
- 概要：
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【中文期刊】 刘莉 陈集双 《微生物学通报》 2007年34卷1期 57-60页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用Taq DNA聚合酶既具有DNA聚合酶活性又具有反转录酶活性的特点,探索了在Taq DNA聚合酶单独作用下以双链RNA为模板进行PCR反应的条件.结果表明靶序列长度为277 bp、369 bp、987 bp时,均可直接进行PCR扩增;短...
【关键词】 Taq DNA聚合酶； 反转录活性； PCR；
- 概要：
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【中文期刊】 陈军营 孙佩 等 《植物生理学通讯》 2007年43卷4期 754-758页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以小麦基因组DNA为模板,用一种改良热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)技术克隆到全长为1 748 bp的小麦GLP3基因的上游侧翼序列.测序结果表明,TATA-box位...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 智强 李淑慧 等 《第三军医大学学报》 2007年29卷12期 1221-1223页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 用简并PCR从烟草节杆菌02181中扩境出肌酸酶部分序列,以期获得其全长编码基因.方法 从NCBI查询已发表的肌酸酶蛋白序列,将其递交到Bolck Maker服务器,利用工具软件CODEHOP设计简并引物,以烟草节杆菌02181基因组...
【关键词】 肌酸酶； 简并PCR； Block Maker；
- 概要：
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【中文期刊】 贡树基 赵卫 等 《中国公共卫生》 2006年22卷4期 429-430页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的采用长链RT-PCR技术扩增登革2型病毒新几内亚株(NGC)全长基因组.方法根据登革2型病毒NGC株基因组全序列设计引物,在上游引物中加入Sp6 RNA聚合酶启动子核心序列,下游引物中加入ClaI内切酶位点.从病毒感染的乳鼠脑中提取RN...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 谢振华 史小军 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2006年22卷8期 681-684页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 采用大引物方法,利用质粒多克隆位点两侧的普通测序引物作为旁侧引物,在单个PCR管内,经2个步骤共34个循环进行定点突变.该方法通过优化模板和引物的量达到降低PCR循环次数,通过加入10个在68℃复性条件下的PCR循环达到增加突变效率而无需胶...
- 概要：
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【中文期刊】 刘燕 熊锦文 等 《生殖与避孕》 2006年26卷9期 520-525页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆大鼠睾丸组织uPA基因的启动子区并对该序列进行分析.方法:从大鼠睾丸组织中提取基因组DNA,以其为模板设计uPA基因引物,运用降落PCR法扩增uPA基因5'端上游的真核转录调控序列.测序得到的PCR产物用启动子区的分析软件分析,并...
【关键词】 大鼠； 睾丸组织； 尿激酶纤溶酶原激活因子(Upa)；
- 概要：
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【中文期刊】 李霞 张健 等 《解放军医学杂志》 2006年31卷2期 128-131页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建CblN/Grb2嵌合分子,表达和纯化GST-CblN/Grb2融合蛋白,并考察嵌合分子CblN/Grb2在体外是否具有泛素连接酶活性.方法提取SKBR-3细胞的总RNA并反转录为cDNA,作为模板用PCR扩增Grb2基因的SH2片...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马百坤 唐晓莹 等 《医学研究生学报》 2006年19卷12期 1063-1066页 ISTICPKU
【摘要】 目的:克隆蛋氨酸裂解酶(METase)中阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶(TVMGL 1)基因,探讨重组METase(rMETase)对肿瘤细胞生长的抑制作用.方法:从培养的阴道毛滴虫提取总RNA,以此为模板,利用RT-PCR获取TVMGL1基因,琼...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马鸣潇 金宁一 等 《中国病原生物学杂志》 2006年1卷3期 164-167页 ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的构建O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)O/LZ株基因组全长cDNA. 方法根据FMDV基因组和克隆载体的限制性内切酶酶切位点,将FMDV基因组设计为4段,进行反转录和扩增(RT-PCR)...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张玉刚 成建红 等 《生物技术通报》 2005年4期 50-53页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用CTAB和SDS-酚两种方法提取了小金海棠根的总RNA,以CTAB法提取的总RNA为模板,用长距离PCR(LD-PCR)的方法合成了双链cDNA并进行了扩增.结果表明,CTAB法比SDS-酚法提取的总RNA纯度高、完整性好,宜于进行RT-...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邵彦春 王建华 等 《微生物学通报》 2005年32卷3期 20-23页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以筛选的肠膜明串珠菌的基因组为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增得到右旋糖苷蔗糖酶的基因片段dsr1和dsr2,将基因片段克隆到pUC19载体上并对基因片段组装得到完整基因序列dsrx,通过限制性酶切分析和核苷酸序列分析鉴定,dsr...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 白霞 傅建新 等 《中国实验血液学杂志》 2005年13卷4期 548-552页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 血管内皮生长因子(VEGF)是血管新生的中枢介质,在白血病的病理机制中具有重要作用,也是血液肿瘤患者一种独立的预后因素,但VEGF在白血病细胞分化或凋亡中的重要性尚待阐明.为了查明VEGF在白血病细胞分化或凋亡中的作用,构建了VEGF基因竞...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李霞 沈岚 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷4期 437-441页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建cblN/Zap嵌合分子, 稳定转染Jurkat细胞后观察对细胞TCRζ的影响.方法: 提取Jurkat细胞的总RNA并反转录为cDNA, 以其作为模板用PCR方法扩增Zap基因的SH2片段.以含有人全长cbl cDNA的质粒pE...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邓正阳 李淑蓉 等 《第三军医大学学报》 2004年26卷7期 561-564页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建干扰素诱导蛋白P56及其各种缺失突变体的酵母表达质粒.方法干扰素诱导HT1080,提取mRNA、RT-PCR获取P56全长及各种缺失突变体的cDNA,以酵母表达质粒pCADT7为载体,构建重组质粒.结果诱导的HT1080中抽提出P5...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张晓杰 鲁纯平 等 《湖南医科大学学报》 2003年28卷4期 322-326页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)基因表达水平的竞争性RT-PCR方法,以研究GPI-PLD与白血病等疾病的关系.方法:首先用PCR 定点诱变法构建GPI-PLD的竞争性cDNA模板,该模板与靶cDNA具...
【关键词】 竞争性RT-PCR； 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D； 逆转录；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 梁东春 郭刚 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷1期 123-126页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 胰岛素样生长因子1(IGF-1)是一种多功能的细胞增殖调控因子,其表达水平受多种因素的影响,为了研究IGF-1基因在转录水平上的调控机制,建立了定量测定IGF-1mRNA的竞争性PCR方法.同时,也建立了一种简便的制备同源性竞争模板的方法....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 叶维萍 黄原 《动物学杂志》 2003年38卷3期 105-109页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 长PCR(long PCR)技术自1994年发明以来,在生命科学发展中发挥了巨大的作用.长PCR技术与常规PCR有较大的区别.本文从长PCR技术的由来、长PCR技术对模板、引物和聚合酶的特殊要求及长PCR技术反应条件等方面进行了较全面的介绍...
【关键词】 长PCR(long PCR)； 双聚合酶系统； 辅助溶剂；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐祖元 包其郁 等 《遗传》 2002年24卷5期 548-550页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 探讨了PCR产物直接测序技术中的影响因素,结果表明:PCR产物特异性是影响其测序成败的关键因素,PCR反应只有产生惟一扩增产物时,其产物才能被用来直接测序;PCR反应体系残留混合物(dNTP、引物和盐离子等)对其测序质量有明显不利影响,PC...
【关键词】 聚合酶链反应(PCR)； PCR产物直接测序； ABI-377型DNA自动测序仪；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 秦新民 邓智年 《广西植物》 2002年22卷5期 420-424页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从3个豇豆品种幼嫩叶片中分离出核基因组DNA,参照已知的几种Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列,设计合成了27 bp,且含有BamH I位点的寡核苷酸引物,分别以3种豇豆核基因组DNA为模板,PCR扩增,均得到长度约为340 b...
【关键词】 豇豆； 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因； PCR扩增；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李德谋 罗小英 等 《遗传》 2001年23卷6期 553-555页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 交错延伸剪接PCR是一种用于分子进化研究的DNA改组技术.本实验利用其原理,将已获得的油菜花粉育性基因MS2Bnap有部分序列重叠的三段PCR产物作为模板进行扩增,获得了花粉育性基因MS2Bnap的全长cDNA序列.
【关键词】 交错延伸剪接PCR； 花粉育性基因MS2Bnap； 全长cDNA序列；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵新燕 蔡静莉 等 《生物工程学报》 2000年16卷3期 320-323页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以人HEL细胞总RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增了人促血小板生成素受体c-Mpl编码区全长1.9kb cDNA，测序结果表明与已报道的序列一致。然后构建了c-mpl的pcDNA3表达载体pcMPL，转染不表达c-mpl的K562细胞后...
【关键词】 人促血小板生成素受体c-Mpl； RT-PCR； 转染；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王吉 付瑞 等 《实验动物与比较医学》 2014年34卷1期 35-41页 ISTICCA
【摘要】 目的 建立小鼠腺病毒(MAdV) PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法 根据已发表的小鼠腺病毒(MAdV) E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 问明瑶 谢华平 《重庆医学》 2013年23期 2760-2761,2764页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的利用反向聚合酶链式反应（PCR）对乳腺癌细胞系MCF-7的9p21缺失断点进行准确定位。方法以乳腺癌MCF-7细胞系为模板，利用反向PCR ，通过酶切、连接、PCR反应及测序，检测染色体9p21缺失断点。结果乳腺癌MCF-7细胞系9p2...
【关键词】 乳腺癌； 细胞系 ,MCF-7； 缺失断点定位；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 全红 刘松 等 《哈尔滨医科大学学报》 2012年46卷4期 323-328页 ISTICCA
【摘要】 目的 确定HIV-1包膜(envelope,env)单基因扩增(single genome amplification,SGA)的最优反应体系,获得env单基因扩增产物.方法 采用SGA及Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,并对...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 罗祎敏 王淑敏 等 《中南医学科学杂志》 2011年39卷6期 643-645页 ISTICCA
【摘要】 目的 从健康人的外周静脉血中获得人类基因组DNA,扩增出抗菌肽LL-37的全长基因,插入原核表达载体pQE-30以获得重组表达载体pQE-30/LL-37. 方法 用Nal法从健康人外周静脉血中提取人类基因组DNA,然后以它为模板PCR扩增...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蔺宇 刘少君 《生物技术通讯》 2011年22卷1期 19-23页 ISTICCA
【摘要】 目的:克隆大鼠促甲状腺激素释放激素受体1(TRH-R1)基因,构建其真核表达载体,并检测该基因在非洲绿猴肾细胞系COS-7中的表达.方法:应用RT-PCR方法,以大鼠脑源RNA为模板,扩增获得TRH-R1基因,定向克隆到pDsRed2-N1...
【关键词】 促甲状腺激素释放激素受体1； 克隆； 表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘春燕 马秀敏 等 《山东医药》 2011年51卷18期 64-65页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨PCR-RFLP和微卫星DNA标记法诊断棘球绦虫感染的临床价值.方法 对40例包虫病患者的40个包囊标本提取DNA后,分别采用PCR-RFLP和微卫星DNA标记法进行检测.结果 以棘球绦虫DNA为模板,用特异性引物进行PCR扩增,...
【关键词】 PCR-RFLP方法； 微卫星DNA标记法； 棘球绦虫感染；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 闫华超 贾少波 等 《生物技术》 2011年21卷1期 41-42页 ISTICCA
【摘要】 目的:为研究跳虫的遗传多样性和探讨跳虫线粒体基因提取与扩增的简易方法,对裸长角(虫兆)线粒体细胞色素氧化酶亚基COI基因进行了提取和扩增.方法:通过采集裸长角(虫兆)、提取裸长角虫兆基因组DNA,并用特异性引物对COI基因进行PCR扩增,用...
【关键词】 裸长角(虫兆)(Sinella sp.)； 线粒体； COI基因；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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