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【中文期刊】 王靖瑶 王天女 等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷6期 98-104页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 大肠杆菌是表达重组蛋白最常用的宿主之一.利用大肠杆菌分泌途径胞外表达重组蛋白具有可促进蛋白正确折叠,有效减少包涵体形成,简化纯化工序等诸多优势,近年来备受关注.其中,大肠杆菌Ⅰ型分泌途径具有分泌表达速度快,蛋白活性高,对宿主代谢无影响等特点...
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【中文期刊】 朱燕 韩小韦 等 《生物工程学报》 2019年35卷5期 827-836页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 核酸外切酶Ⅷ(ExonucleaseⅧ,ExoⅧ)是一种不依赖于ATP的dsDNA 5’-3'核酸外切酶,可作为体外DNA重组反应极具应用价值的候选蛋白.目前关于ExoⅧ在体外DNA重组反应中的应用尚未有文献报道.本研究构建了保留完整外切活...
- 概要：
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【中文期刊】 许昊 刘小亮 等 《第三军医大学学报》 2019年41卷9期 866-870页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 优化Tn5转座酶纯化和组装过程,建立少量细胞高质量转录组深度测序文库(RNA-Seq)的构建策略.方法 构建Tn5转座酶表达载体pSUMO-Tn5,优化Tn5转座酶表达、亲和纯化和组装过程,比较不同组装方式的Tn5转座酶构建少量RAW...
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【中文期刊】 温林春 尤传文 等 《中华放射肿瘤学杂志》 2012年21卷5期 481-482页ISTICPKUCSCD
【摘要】 基因-放疗是将放射敏感性调控序列与治疗基因和药物相耦联,在肿瘤放疗同时诱导目的基因和药物在肿瘤内高效表达,从而提高肿瘤放射敏感性,它是近年来肿瘤放疗新策略[1].早期生长反应-1(early growth response-1,Egr-1)...
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【中文期刊】 余占桥 马青山 等 《微生物学通报》 2010年37卷7期 1035-1042页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是一种异源蛋白表达的理想系统,但目前并非所有的外源蛋白都能在毕赤酵母中成功高效表达,不同的蛋白表现为不同表达水平、生物活性及稳定性.从遗传因素和表达条件综述了外源蛋白在毕赤酵母中的优化表达策...
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【中文期刊】 汪志浩 张东旭 等 《生物工程学报》 2009年25卷12期 1955-1961页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶(PGL)的产量和生产强度,在诱导期采用多种碳源与甲醇混合添加的模式.实验结果发现:甘油、山梨醇、乳酸与甲醇的混合添加均可以提高PGL的产量,其中山梨醇与甲醇的混合流加效果最为显著.研究表明,通过双碳源混合流...
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【中文期刊】 郝大程 肖培根 《中国生物工程杂志》 2009年29卷7期 94-101页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 研究人细胞色素P450(P450,CYP)在大肠杆菌中的功能表达对新药研发,临床药物治疗和药物早期ADME/T性质研究均有重要意义.异源表达人P450使用最多的宿主是大肠杆菌E.coli,然而要获得足量的有催化活性的P450仍是一个难题.结...
【关键词】 细胞色素P450 NADPH-P450氧化还原酶；异源表达；大肠杆菌；
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【中文期刊】 郭淑元 凌虹 等 《中国地方病学杂志》 2000年19卷6期 472-473页ISTICPKUCA
【摘要】 目的构建人类乳头瘤病毒(HPV)16型晚期基因L1的原核表达质粒,以期从中选出能够高效表达HPV16L1的重组子,为进一步表达L1蛋白奠定基础.方法应用定向克隆策略,将HPV16L1基因分别克隆到原核表达载体pTrac99A和pET-21c...
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【中文期刊】 王龙刚 王宇凯 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷5期 521-525页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 对高拷贝重组毕赤酵母表达x.HBsAg的诱导策略进行优化.方法 在摇瓶中分别诱导l、4、8拷贝数的重组毕赤酵母,ELISA检测X-HBsAg的表达量;在15 L发酵罐中对8拷贝的重组毕赤酵母进行诱导表达,分别考察甘油浓度对菌体比生长速...
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【中文期刊】 张军要 陈俊林 《新乡医学院学报》 2010年27卷5期 523-526页ISTICCA
【摘要】 中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是最重要的重组蛋白表达系统之一,在生物制药中被广泛应用,但因生产成本高、细胞株构建时间长等因素限制了其应用.近几年随着对启动子、Poly A尾作用模式的深入了解,对构建高效稳定的质粒指明了方向;核基质结合区的应用突...
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【中文期刊】 赵宏宇 赵育莹 等 《国外医学（免疫学分册）》 2004年27卷6期 362-364页ISTICCA
【摘要】 目的将流感病毒RNA聚合酶PA6亚基片段进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PA6亚基功能奠定基础.方法以PA亚基cDNA 为模板,用PCR方法扩增出PA6 片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE32重组,阳...
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【中文期刊】 张用书 李富广 等 《生物技术通讯》 1999年10卷3期 190页ISTICCA
【摘要】 <篇首> "外源基因全序列结构优化"是依据外源基因序列结构是影响其在大肠杆菌中表达的重要因素,而提出的一种新的实现外源基因在大肠杆菌中高效表达的策略.该策略包括以下几个步骤:①目的基因全序列变异文库的构建;②利用高通量表达筛选载体从变异文库中筛...
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