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【中文期刊】 孙敏 达晓伟 等 《西北植物学报》 2021年41卷7期 1240-1247页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 农杆菌介导的瞬时基因表达因其操作简单、可重复性高和实验成本低而成为研究基因功能、生产活性蛋白的有效方法.该研究以非病毒型(载体Ⅰ)和病毒型二元载体(载体Ⅱ)及两种农杆菌(EHA105、LBA4404)为介导,通过叶片渗透法在5种中草药(甘草...
【关键词】 农杆菌；瞬时表达；二元载体(非病毒型和病毒型)；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 胡换仪 汪建中 等 《中国畜牧兽医》 2022年49卷1期 328-337页
【摘要】 [目的]构建表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组猪痘病毒(recombinant Swinepox viruis,rSWPV),制备抗GFP单克隆抗体.[方法]首先合成3'-端含His标签的增...
【关键词】 绿色荧光蛋白(GFP)；猪痘病毒载体；真核表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 阮军 吴友茹 等 《中国药房》 2015年22期 3066-3069页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：研究携带凋亡素基因VP3的重组腺病毒载体Adxsi-GFP-VP3对人肺鳞癌细胞SK-MES-1、人肺腺癌细胞NCI-H1299的凋亡的影响。方法：取对数生长期SK-MES-1、NCI-H1299细胞，各分为重组腺病毒（Adxsi-G...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邵喜英 陈占红 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷2期 189-194页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP、pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-GFP、pcDNA3.1(+)-CYP19R264C-GFP与pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-R264C-GFP真核表达质粒,并观...
【关键词】 细胞色素P450酶系统/遗传学；质粒；遗传载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曹旭东 陈创夫 等 《中国人兽共患病学报》 2009年25卷4期 361-364页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础.方法 以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA 片段.将扩增片段克隆...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐海荣 卜平 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2009年25卷11期 1008-1009,1012页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo, 并在HepG2细胞中进行表达.方法:PCR法扩增TK启动子克隆到pEGFP-N1上, 构建表达载体pTK-GFP/Neo.人工合成4个ARE序列, 经退火和磷酸化后插入pTK-GFP...
【关键词】 抗氧化反应元件(ARE)；绿色荧光蛋白(GFP)；真核表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 宁文彬 刘菊华 等 《西北植物学报》 2008年28卷11期 2164-2167页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用SSH分离香蕉果实采后差异表达基因,获得香蕉的ASR基因,并将其命名为Maasr1.对该基因与香蕉采后成熟衰老进行相关性研究,发现其在果实采后早期表达上调.通过对Maasr1基因进行生物信息学分析表明,Maasr1基因编码的蛋白可能作为...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨正安 丁玉梅 等 《西北植物学报》 2008年28卷1期 12-17页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以甘蓝自交系'03097'为试材,PCR扩增并克隆了甘蓝质体的trnI-trnA基因区段,利用该基因区段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建了甘蓝质体定点转化载体,并进行了原核表达分析.结果表明,所扩增的基因区段大小为2.7 kb.进行...
- 概要：
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【中文期刊】 李桂英 田宇 等 《中国肿瘤临床》 2007年34卷17期 966-969页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性.方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PLN-GFP,用脂质体介导法转染...
【关键词】 肿瘤特异性；L-plastin启动子；GFP；
- 概要：
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【中文期刊】 张丽珍 马利平 等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷4期 555-558页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 用PCR方法扩增的多菌灵降解菌NY97-1的16S rDNA片段经TA克隆后,进行序列测定和BLAST同源序列比较分析,确定了其分类地位为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus, B.p).经BamHⅠ酶切的启动子探针载体pUC19...
- 概要：
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【中文期刊】 彭毅 龚小卫 等 《第一军医大学学报》 2005年25卷3期 285-288页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建在哺乳动物细胞中表达的PRAK绿色荧光蛋白融合表达载体.方法将克隆在pET-14b上的PRAK亚克隆到绿色荧光蛋白载体DEGFP-C2上,随后转染Hela细胞,并在荧光显微镜下观察.结果重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在...
【关键词】 p38调节活化蛋白激酶(PRAK)；绿色荧光蛋白(GFP)；载体构建；
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【中文期刊】 姜焱 侯玉峰 等 《微生物学报》 2003年43卷1期 15-20页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 在构建了含伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上,采用酶切的方法构建了载体pgEI.然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因5'端363bp,同时把绿色荧光蛋白(G...
【关键词】 伪狂犬病病毒；转移载体质粒；gE-/gI-/GFP+缺失株；
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【中文期刊】 王妍 张超林 等 《福建农业学报》 2020年35卷8期 851-856页
【摘要】 [目的]ExpiCHO细胞瞬时表达能够快速有效地生产重组蛋白,为筛选有效的重组蛋白节省了大量的时间,细胞系的选择、表达载体的选择、转染试剂的选择等是制约ExpiCHO细胞瞬时表达蛋白的重要因素,本研究旨在筛选出在CHO细胞中瞬时表达量较高的...
- 概要：
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【中文期刊】 曾凡强 程宇涵 等 《徐州医学院学报》 2014年34卷11期 725-728页ISTICCA
【摘要】 目的 构建Bip蛋白真核表达重组体用于缺血性脑损伤机制的研究.方法 用RT-PCR方法获得Bip的cDNA;与TOPO载体连结,连接产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定;Bip cDNA片段亚克隆到真核表达载体pTRUF11-GFP;...
【关键词】 结合免疫球蛋白；pTRUF11-GFP载体；真核表达；
- 概要：
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【中文期刊】 孙墨可 李晓薇 等 《安徽农业科学》 2018年46卷26期 91-93,107页
【摘要】 利用TPS法提取平菇基因组,克隆甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GPD),用GPD启动子替换原表达载体pCAMBIA1302中的35s启动子,构建pCAMBIA...
- 概要：
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【中文期刊】 肖素勤 孙振 等 《生命科学研究》 2011年15卷6期 476-484页ISTICCA
【摘要】 为了利用通路克隆(Gateway)技术构建一个含有两个目的基因表达盒的植物表达载体,并把目的基因编码的蛋白质定位到转基因植物的叶绿体中,通过定点突变技术,在含有attL4和attL3重组位点的Gateway入门载体pEN-L4-2-L3中产...
- 概要：
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【中文期刊】 张琼 谭逵 等 《现代生物医学进展》 2008年8卷5期 825-827,封3页ISTICCA
【摘要】 目的:构建以绿色荧光蛋白(greenfluoreseeneeprotein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C2-MIC3并检测MIC3-EGFP融合蛋白其在COS-7细胞中的表达及定位.方法:通过基因重组的方法构建pEGFP-...
- 概要：
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【中文期刊】 李利平 孙曼莉 等 《南华大学学报(医学版)》 2007年35卷3期 350-354页ISTICCA
【摘要】 目的 构建以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-HPV16 E6.方法 利用脂质体转染体外培养的Hela细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察pEGFP～HPV1...
- 概要：
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【中文期刊】 夏丽萍 陈付学 等 《军事医学科学院院刊》 2005年29卷3期 248-250,253页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:克隆ST8SiaV基因启动子及构建ST8SiaV基因启动子-pGL3-Basic-GFP表达载体,并对该载体进行功能鉴定.方法:①基于NCBI公布的大鼠基因组ST8SiaV基因序列,以SD大鼠肝基因组DNA为模板,采用PCR方法,扩增...
【关键词】 ST8SiaV基因；启动子；pGL3-Basic质粒；
- 概要：
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【中文期刊】 逯家辉 孟庆繁 等 《生物技术》 2004年14卷6期 1-3页ISTICCA
【摘要】 目的:利用分子生物学技术和方法将pRSET-B质粒改建为带有绿色荧光蛋白(GFP)突变体基因(GFP-S65T)的新型瞬时表达载体pRSET-EGFP,并在E.coli.BL21中得到GFP基因的高效表达.方法:PCR法从pEGFP质粒克隆...
- 概要：
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【中文期刊】 高岭 李朔 等 《植物生理与分子生物学学报》 2003年29卷5期 469-473页MEDLINEISTICCA
【摘要】 从小麦中分别克隆了包括rbcL基因3′端部分和完整的psaI、ycf4基因的DNA片段.利用克隆到的DNA片段作为同源重组片段、烟草叶绿体16S rRNA基因的启动子Prrn和PsbA基因的终止子PsbA3′控制筛选标记基因aadA和报告基...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王弘 郑文岭 等 《昆明医学院学报》 2003年24卷1期 13-16页ISTICCA
【摘要】 利用通用载体质粒融合系统UPS(univector plasmid-fusion system)构建出了以GFP(绿色荧光蛋白)为报告基因的酵母表达载体,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性,同时验证了UPS的高效性及简便性.
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周丽英 李虎 等 《西南农业学报》 2015年28卷6期 2644-2648页
【摘要】 以四季耐抽薹生菜为材料,PCR扩增并克隆了生菜质体rpoA基因的两侧翼的基因片段,利用该两基因区段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建了生菜质体定点转化载体pBrpoA-GFP,并进行了原核表达分析.结果表明,PCR所扩增的两条基因区段...
- 概要：
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【中文期刊】 赵轶君 董浩 等 《华北农学报》 2013年3期 73-76页
【摘要】 为开发以绿色荧光蛋白（GFP）为基因的原核表达载体，根据 NCBI 基因序列设计引物，通过 PCR 扩增获得GFP 编码基因，经限制性核酸内切酶消化后将 GFP 定向克隆至原核表达载体 pMAL－c2X 中 malE 基因下游的 EcoRⅠ...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 姜玉新 《泰山医学院学报》 2013年34卷4期 241-244页
【摘要】 目的 构建ZBTB5基因的真核表达质粒,并检测其在细胞内的表达.方法 以pET-28a (+)-ZBTB5质粒为模板,以ZBTB5全长编码基因特异性引物进行PCR扩增,将ZBTB5全长基因插入至pcDNA3.1-GFP真核表达载体构建重组p...
【关键词】 ZBTB5；GFP；Western blot；
- 概要：
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【中文期刊】 李继刚 郑建坡 等 《河北大学学报（自然科学版）》 2012年32卷5期 523-527页
【摘要】 为了研究马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位情况,采用RT-PCR技术克隆到马铃薯StHb1基因cDNA序列,并成功构建了StHb1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pBI121-StHb1 -GFP.利用农杆菌介导法将重组载体转化洋葱内表皮...
【关键词】 非共生血红蛋白；绿色荧光蛋白(GFP)；亚细胞定位；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王小兰 唐馨 等 《安徽农业科学》 2012年40卷3期 1318-1320页
【摘要】 [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性,确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位.[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY17全序列设计引物,进行Os WRKY17的RT-PCR扩增,克隆了该基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(...
【关键词】 OsWRKY17基因；GFP基因；表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李嘉玮 刘晓颖 等 《天津师范大学学报（自然科学版）》 2012年32卷1期 85-87,92页
【摘要】 利用生物信息学方法对紫花苜蓿MsDREB1进行了生物信息学分析.结果表明,该序列含有AP2典型结构域,在N端存在核定位信号.为进一步验证该基因功能,构建MsDREB1与绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王小兰 唐馨 等 《农业科学与技术：英文版》 2012年13卷1期 79-81页
【摘要】 [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性，确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY17全序列设计引物，进行仉WRKY]7的RT—PCR扩增，克隆了OsWRKY17基因，将该片段与带绿色...
【关键词】 OsWRKY17基因；GFP基因；表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张玉 白史且 等 《分子植物育种》 2011年09卷2期 174-179页
【摘要】 用PCR方法从pROK.TG1LK扩增得到γ-zein基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,获得了重组质粒pMD18-γ-zein,分别用Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ 2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI 1302载体,经...
【关键词】 绿色荧光蛋白(GFP)；γ-zein基因；植物表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈超力 张敏 等 《沈阳农业大学学报》 2010年41卷5期 575-579页
【摘要】 构建了可溶性甲烷单加氧酶C亚单位(soluble methane monoxygenase-C component,sMMO-C)基因和绿色荧光蛋白-S65T(green fluorescence protein,GFP-S65T)基因的融...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘肖飞 梁卫红 《河南师范大学学报（自然科学版）》 2009年37卷1期 123-125,150页
【摘要】 采用根癌农杆菌介导的方法,以受控于CaMV 35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300 -35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵彤 黄丛林 等 《华北农学报》 2008年23卷4期 72-76页
【摘要】 Tps1是生物保护物质海藻糖的关键合酶基因.构建含Tps1的玉米叶绿体表达载体,首定从玉米叶绿体基因组中克隆16S/trnI-trnA/23S片段,作为定点整合同源片段;然后将编码酵母海藻糖合酶基因Tps1表达盒(Prrn-Tps1-Tps...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 丁玉梅 杨正安 等 《作物学报》 2008年34卷6期 978-983页
【摘要】 利用高等植物质体基因组在进化中高度保守的特点,根据烟草质体基因组全序列设计合成引物,PCR扩增并克隆了马铃薯质体的trnI-trnA基因片段.将测序正确的trnI基因和trnA基因作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn-gf...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邓丽 刘红 等 《安徽农业科学》 2008年36卷26期 11251-11252页
【摘要】 [目的]构建含绿色荧光蛋白(gfp)基因的植物重组表达载体pB1121-GFP-62390和pB1121-GFP-51780.[方法]用PCR方法扩增psmGFP的GFP片段,BamH I和Sacl双酶切PCR产物,同时用BarnH I和S...
【关键词】 绿色荧光蛋白(gfp)基因；BAG蛋白；植物表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马立安 张忠明 《长江大学学报B（自然科学版）》 2007年4卷3期 73-76,99页
【摘要】 根据编码拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)基因cDNA全序列设计超表达引物,以1～1 000 bp之间序列设计GFP引物和序列内部第24～240 bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-PhrIP1为模板,用PCR方法分别扩增出1...
【关键词】 拟南芥PhrIP1基因；超表达载体；RNAi载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈飒 李金耀 等 《农业生物技术学报》 2006年14卷6期 899-904,插2页
【摘要】 为解决杂交大豆(Glycine max)制种过程中不育系易与保持系混杂的问题,开展了大豆叶绿体转基因的研究.通过转基因方法在不育系的细胞质中植入筛选标记基因,以区分不育系和保持系.根据已发表的大豆叶绿体序列(GenBank X07675)设...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王弘 郑文岭 等 《食品与发酵工业》 2005年31卷8期 4-7页
【摘要】 采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性.实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王弘 郑文岭 等 《华南理工大学学报(自然科学版)》 2002年30卷9期 30-32,39页
【摘要】 利用通用载体质粒融合系统UPS构建出了以GFP(绿色荧光蛋白)为报告基因的酵母表达载体,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性,同时验证了UPS的高效性及简便性.
【关键词】 通用载体质粒融合系统；酵母表达载体；GFP基因；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：杨新 导师：杨克强 山东农业大学 林学 林木遗传育种（硕士） 2017年
【摘要】 核桃（Juglans regia L.）是重要的“木本油料”战略树种，但随着核桃集中栽培面积的扩大和抗病品种的缺乏，核桃病害日渐严重。核桃炭疽病（anthracnose）是由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioi...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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