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【中文期刊】 郜十伟 刘书漫 等 《郑州大学学报(医学版)》 2010年6期 939-942页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：建立稳定遗传的纯合子SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠品系。方法：通过定量PCR法比较已知杂合子小鼠和未知阳性小鼠中外源基因的起始模板量来确定小鼠的基因型,并通过测交的方法来验证试验结果。结果：用定量PCR法选育出15只纯合子小鼠,...
【中文期刊】 申琦 邵蓓新 等 《郑州大学学报(医学版)》 2010年6期 929-930页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：检测不同品系SV40T转基因小鼠血浆胃泌素水平。方法：取已建立的8个品系SV40T转基因小鼠和B6小鼠空腹血,应用ELISA法检测血浆胃泌素水平。结果：B6小鼠、2#、4#、16#、24#、51#、57#、61#和73#品系转基因小鼠...
【中文期刊】 张露文 戴鹏秀 等 《中国组织工程研究》 2022年26卷13期 1969-1973页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:细胞永生化是细胞获得持续增殖能力的一种特性,大T抗原基因可使细胞永生化效率提升,并广泛应用于实验中,越来越受到研究者的关注.目的:建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株,为人骨髓间充质干细胞的临床应用奠定基础.方法:使用含有猴空泡病毒40...
【中文期刊】 《中国神经再生研究（英文版）》 2012年07卷12期 932-937页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 Signaling pathways known to have components with mutations in human medulloblastoma include sonic hedgehog, Wnt/beta-cat...
【关键词】 SV40 large T antigen； medulloblastoma； cDNA microarray；
【中文期刊】 伍继成 赵爽 等 《吉林大学学报（医学版）》 2018年44卷1期 13-17,后插3页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨十全大补汤对SV40 T抗原转基因(TG)小鼠晶状体自发肿瘤的抑制作用,阐明其抑癌的分子机制.方法:SV40 T抗原TG小鼠随机分为对照组(n=39)和药物处理组(n=25),对照组小鼠正常喂食,药物处理组小鼠出生3周后开始喂食添...
【中文期刊】 汪林丽 艾越 等 《中国畜牧杂志》 2021年57卷10期 89-95页
【摘要】 本研究旨在通过SV40T基因导入来提高绵羊的子宫内膜上皮细胞(EECs)和基质细胞(ESCs)的体外传代次数,为绵羊胚胎附植等子宫相关研究奠定基础.采用酶促分离获得原代绵羊EECs和ESCs,并用携带SV40T基因的慢病毒以MOI 1:10...
【中文期刊】 蒋杞英 张智 等 《中国免疫学杂志》 2014年30卷9期 1218-1223页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:重建热休克转录因子1(Heat shock transcription factor 1,Hsf1)过表达的MEF/Hsf1-/-/Hsf1细胞系,为进一步研究Hsf1的功能提供实验模型.方法:将携带Hsf1全长基因的逆转录病毒载体p...
【中文期刊】 成钢 罗赛群 等 《中国实验动物学报》 2010年18卷4期 292-295,后插3页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为全面研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定基础和提供细胞实验材料.方法 运用脂质体介导的基因转染法将pSV3 neo质粒导入第3代东方田鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛...
【中文期刊】 陈辉 马慧洁 等 《郑州大学学报（医学版）》 2008年43卷2期 231-234页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建SV40T抗原的特异性真核表达载体,并导入胃癌细胞株SGC7901进行表达鉴定.方法:扩增小鼠H+/K+ATPase β亚基启动子,与pMT18-T载体相连,并将其亚克隆至真核表达载体 pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1...
【中文期刊】 胡伟华 郭风劲 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2008年12卷43期 8588-8592页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:前软骨干细胞虽然具有较强的自我增殖能力和多向分化潜能,但生物学性状不稳定,易分化.导入外源性基因能使其永生化,且不改变细胞的表型和性状.目的:建立永生化大鼠前软骨干细胞株,为以后精确调控前软骨干细胞的增殖与分化打下基础.设计、时间及地...
【中文期刊】 胡伟华 郭风劲 等 《医药导报》 2007年26卷5期 460-464页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 建立永生化大鼠前软骨干细胞(PSCs)株,为研究前软骨干细胞的分化机制及临床应用奠定基础.方法 用LipofectamineTM2000介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体pCMVSV40T/PUR导入经免疫磁珠分选出...
【中文期刊】 王鹰 邓军 等 《临床皮肤科杂志》 2006年35卷10期 627-630页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:研究Cre/loxP系统和SV40TAg基因在体外对人正常黑素细胞的可逆性永生化诱导作用.方法:将Cre-ERT2反转录病毒导入包装细胞PA317,获得的病毒上清感染SV40TAg基因诱导转化的永生化黑素细胞,三苯氧胺(tamoxif...
【关键词】 Cre/loxP系统； SV40T抗原； 黑素细胞,永生化,可逆性；
【中文期刊】 王鹰 邓军 等 《中华医院感染学杂志》 2006年16卷3期 256-259页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的设计、构建SV40病毒T抗原真核表达载体,并导入真核细胞进行表达鉴定. 方法采用重叠延伸拼接法,从pUC19-SV40载体中亚克隆切除内含子的SV40病毒T抗原基因全长片段,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后定向克隆至pEGFP-N1真核表...
【中文期刊】 刘梅冬 张华莉 等 《中南大学学报（医学版）》 2006年31卷2期 174-177页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型.方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选...
【中文期刊】 朱永良 钟献 等 《浙江大学学报(医学版)》 2004年33卷5期 379-384页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立正常人大肠干细胞系.方法:用中性蛋白酶分级分离法从人胚肠中分离正常大肠干细胞,以含端粒酶逆转录酶和SV40大T抗原的重组逆转录病毒感染,对其进行永生化;然后,对建立的正常大肠干细胞系进行生物学特性鉴定.结果:用中性蛋白酶分级消化获...
【中文期刊】 汤晓飞 高文涛 等 《口腔医学研究》 2004年20卷2期 149-152页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:转染质粒pSV2neo、pSV3neo,使大鼠颌下腺上皮细胞永生化, 进而建立大鼠颌下腺肌上皮细胞系.方法:采用改良磷酸钙沉淀法, 将制备的质粒pSV2neo、pSV3neo 转染大鼠颌下腺上皮细胞,G418 筛选,Southern ...
【关键词】 颌下腺上皮细胞 SV40 T 抗原 转染；
【中文期刊】 生立平 李瑞芳 等 《基础医学与临床》 2019年39卷10期 1417-1422页 ISTICCA
【摘要】 目的 鉴于施旺细胞(SCs)在外周神经损伤修复中发挥关键作用,本研究旨在通过猿猴病毒40大T抗原(SV40T)建立永生化的小鼠坐骨神经施旺细胞系及探讨其分化潜能.方法 通过MPH 86质粒转染小鼠坐骨神经SCs,然后使用潮霉素筛选细胞并传代...
【中文期刊】 Yi Zheng Tongying Feng 等 《畜牧与生物技术杂志（英文版）》 2020年11卷3期 678-689页
【摘要】 Background:Spermatogonial stem cells (SSCs) are capable of both self-renewal and differentiation to mature functional sp...
【关键词】 Immortalization； Pig； Self-renewal；
【中文期刊】 张鹏飞 张硌 等 《中国医学装备》 2017年14卷8期 158-160页 ISTIC
【摘要】 目的:建立PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)永生化细胞系,为全面研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料.方法:采用慢病毒感染的方法将猿猴病毒40(SV40)大T抗原基因导入已鉴定出基因型的MEF中,建立永生化细胞系;利用...
【关键词】 基因PLEKHQ1； SV40大T抗原基因； 慢病毒感染；
【中文期刊】 叶尤松 罕圆圆 等 《实验动物科学》 2012年29卷6期 5-9页 ISTIC
【摘要】 目的 对来源于一株自然感染猕猴肉瘤病毒SV40的猴肾细胞培养物进行大T抗原C-羧基端(T-ag-C)基因克隆及核苷酸序列分析.方法 采用PCR法分别从一株自然感染SV40病毒的猴肾细胞培养物和SV40776标准株接种的vero细胞培养物提取...
【关键词】 猴病毒SV40； T-ag-C抗原基因； 序列分析；
【中文期刊】 陈友鹏 梁旭竞 等 《新医学》 2011年42卷5期 348-350页 ISTICCA
【摘要】 生物型人工肝(BAL)治疗需要合适的种子细胞,正常人肝细胞是BAL较为理想的细胞来源.然而肝细胞属于终末分化细胞,体外生存期短、来源受限,因此在应用方面受到限制.近年来分子生物学技术的发展使正常细胞永生化成为可能.肝细胞的永生化对于药物毒理...
【中文期刊】 陈辉 金辉 等 《解剖学报》 2008年39卷5期 699-702页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 构建胃壁细胞定位表达SV40T的真核表达载体并制备转基因小鼠动物模型,为研究胃癌发病机制提供动物模型.方法 从构建的胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中酶切回收3.8kb的基因片段H+-K+ATPase β pro...
【关键词】 SV40T抗原； Southern blotting； 定位表达；
【中文期刊】 陈辉 杜春艳 等 《山东医药》 2008年48卷26期 39-41页 ISTICCA
【摘要】 构建胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV和非特异性表达载体pcDNA3.1(-)/SV,行酶切及测序鉴定.用脂质体转染法将构建的载体导入食管癌细胞EC9706细胞株,RT-PCR法检测SV40T抗原基因的表达,免疫组化法检...
【中文期刊】 常海 邓军 等 《实用医院临床杂志》 2008年5卷3期 24-26页 ISTIC
【摘要】 目的 探讨SV40T抗原基因转染构建的永生化黑素细胞的遗传稳定性.方法 体外培养黑素细胞,对第20代的永生化黑素细胞进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞增殖情况,同时分析染色体核型,流式细胞仪分析细胞周期和DNA倍体;逆转录-聚合酶链...
【中文期刊】 毕杨 何昀 等 《医学分子生物学杂志》 2008年5卷4期 303-308页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带双自杀基因且可诱导敲除SV40T的逆转录病毒载体,优化目前的肝细胞永生化.方法 去除eGFP终止子taa的pSEB-HUS质粒为逆转录病毒基础质粒.先将SV40T及其启动子hEFH亚克隆至pSEB-HUS,再将LoxP位点插入...
【中文期刊】 赵擎 辛绍杰 等 《生物技术通讯》 2007年18卷1期 107-110页 ISTICCA
【摘要】 正常体细胞在细胞分裂过程中由于无法维持端粒的长度和染色体的稳定而衰老、死亡.建立基因稳定、无致瘤性的永生化细胞是永生化研究的目的所在.利用Cre-loxP系统构建的可恢复性永生化细胞可用于以细胞为基础的临床治疗.分化良好并具有肝脏正常合成代...
【中文期刊】 马海蓉 李维琪 等 《生物技术》 2004年14卷2期 17-20页 ISTICCA
【摘要】 以P53蛋白与SV40大T抗原之间的相互作用作为药物分子靶标,利用酵母双杂交系统的α-半乳糖苷酶活力的测定方法,测定了两个系列的化合物对于P53蛋白与SV40大T抗原相互作用的影响.其中一个系列包括ZnCl,、MgCl2、CaCl2和CuC...
【关键词】 酵母双杂交系统； 药物筛选； P53蛋白与SV40大T抗原之间的相互作用；
【中文期刊】 孙维佳 劳学军 等 《中国现代医学杂志》 2004年14卷2期 43-45,49页 ISTICCA
【摘要】 目的构建带有SV40LT抗原基因的逆转录病毒载体.方法采用体外重组技术构建带SV40LT抗原基因的逆转录病毒载体,酶切、测序进行鉴定,脂质体介导转染PA317包装细胞,经G418筛选出抗性克隆,通过NIH3T3细胞测定病毒滴度.结果酶切分析...
【关键词】 SV40LT抗原基因； 逆转录病毒载体； 载体构建；
【中文期刊】 马海蓉 李维琪 等 《生物技术》 2004年14卷1期 16-19页 ISTICCA
【摘要】 为确定一种定量研究酵母体内蛋白质-蛋白质之间相互作用的简便、快捷的方法,为抗癌小分子化合物药物筛选提供一条可行性途径.本文选择P53蛋白与SV40大T抗原为靶蛋白对,首先用酵母双杂交系统(LiAc法质粒共转化酵母细胞)方法定性证明了两者之间...
【关键词】 P53蛋白与SV40大T抗原； 酵母双杂交系统； α-半乳糖苷酶活力测定；
【中文期刊】 王新文 金岩 等 《第四军医大学学报》 2003年24卷6期 506-509页 ISTICCA
【摘要】 目的: 研究SV40大T抗原(LT)基因对人正常皮肤成纤维细胞体外转化作用, 以及转化后细胞生物学特性的改变. 方法: 采用脂质体介导的方法,利用含有LT cDNA的质粒psv3-neo转染人正常皮肤成纤维细胞. G418筛选后,挑选阳性克...
【中文期刊】 步星耀 章翔 等 《中华神经外科疾病研究杂志》 2002年1卷1期 54-56页 ISTICCA
【摘要】 目的观察猴病毒40(SV40)DNA及大T抗原(Tag)在人脑胶质瘤的定位表达情况,探讨其在胶质瘤发生发展中的生物学意义.方法采用原位杂交和免疫组化技术,检测256例人脑胶质瘤和11例正常脑组织标本.结果 SV40 DNA定位于胶质瘤细胞核...
【关键词】 胶质瘤； 猴病毒40(SV40)； DNA；
【中文期刊】 缪庆 刘秉慈 等 《中国预防医学杂志》 2002年3卷3期 191-194页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的建立永生化大鼠成骨细胞系ROB-1并探讨氟对其DNA的损伤.方法用酶消化法原代分离SD胎鼠颅骨成骨细胞,用Lipofect AMINE作载体对其转染SV40大T基因,并经PCR法鉴定大T基因整合情况.采用碱性磷酸酶染色法鉴定转染细胞系中...
【中文期刊】 甄海宁 章翔 等 《中华实验和临床病毒学杂志》 2001年15卷1期 73-76页 MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的探讨SV40早期区域基因编码产物大T抗原(Tag)表达及与抑癌蛋白p53的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法采用免疫共沉淀及Western印迹法检测43例人脑肿瘤组织及5例正常人脑组织中Tag的表达，并对18例Tag阳性瘤组织检测...
【中文期刊】 步星耀 赵红卫 等 《肿瘤》 2001年21卷5期 374-376页 ISTICCA
【摘要】 目的探讨SV40早期区域基因编码产物大T抗原(Tag)表达及与抑癌蛋白p53的相互作用在人脑胶质瘤发生发展中的意义.方法采用免疫组织化学方法检测89例人脑胶质瘤组织和11例正常人脑组织中Tag的表达,并对Tag表达阳性瘤组织进行免疫共沉淀和...
【中文期刊】 甄海宁 章翔 等 《第四军医大学学报》 2001年22卷2期 135-137页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨SV40早期区域基因编码产物大T抗原（Tag）的表达及与抑癌 蛋白p53，pRb 的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义. 方法 采用免疫共沉淀结合银 染色及Western印迹 法检测65例人脑肿瘤及8例正常人脑组织中 Tag的表达...
【中文期刊】 李炜 余卫业 等 《江西医药》 2008年43卷7期 656-659页 CA
【摘要】 目的 构建永生化肝细胞系,观察其生长状态及检测其相关生物免疫学特性.方法 拟利用基因重组克隆方法构建含有sv40T、EGFP基因片段以及LoxP序列,插入Cre基因片段,采用脂质体转染法将新载体pSV-GFP-Cre-LOX转染至来源于成人...
【中文期刊】 李培杰 赵国强 《肿瘤基础与临床》 2008年21卷5期 384-387页
【摘要】 目的 构建含有重组SV40大T抗原基因的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag,转染真核细胞Eca-9706并检测SV40大T抗原基因在真核细胞内的表达.方法 以PCR方法从含有SV40大T抗原基凶的质粒上扩增出SV40大T抗原基因作为靶...
【中文期刊】 刘广芝 冯捷 等 《中原医刊》 2006年33卷11期 1-4页
【摘要】 目的研究SV40 T基因对其诱导的永生化细胞系细胞表型的影响.方法以手术切除的卵巢肉瘤样癌腹壁转移组织为材料,进行体外培养.将永生化基因--SV40 T抗原基因转染第10代细胞,经筛选,抗性克隆扩大培养,得到永生化细胞系.通过光学显微镜、电...
【中文期刊】 张言 包明月 等 《中国生物工程杂志》 2024年44卷9期 42-52页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用猿猴病毒40(Simian virus 40,SV40)Large T(LT)抗原慢病毒转染含有LoxP-Stop-LoxP(LSL)元件的 Cas9 转基因小鼠(LSL-Cas9)胚胎成纤维细胞(mouse embryonic ...
【关键词】 LSL-Cas9转基因小鼠； 永生化细胞系； SV40 LT抗原；
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