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【中文期刊】 张珂 谈景福 等 《上海中医药大学学报》 2025年39卷4期 25-34页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:中药丹参是临床常用的活血化瘀药,主要用于心脑血管疾病的治疗,其关键活性成分丹参酮是决定丹参药材发挥临床疗效的重要活性成分.阐明其生物合成转录调控机制对于提升丹参品质具有重要理论意义,对天然药物资源的保护和可持续利用至关重要.方法:通过...
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【中文期刊】 郭子豪 闫朝清 等 《食品与生物技术学报》 2025年44卷5期 137-145页
【摘要】 [目的]金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcus aureus protein A,SPA)对免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)具有高度的特异性,已广泛应用于单克隆抗体的纯化.然而,商品介质价格高昂,限制了其...
【关键词】 抗体；抗体纯化；金黄色葡萄球菌蛋白A；
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【中文期刊】 王素娟 田晓平 等 《新乡医学院学报》 2024年41卷3期 214-220页ISTICCA
【摘要】 目的 利用噬菌体展示技术及重组抗体构建技术筛选出特异性醛固酮(ALD)抗体,为ALD诊断试剂盒的研发提供原材料.方法 取5只健康清洁级新西兰大白兔,将抗原ALD-血蓝蛋白(KLH)稀释至2 mg·L-1,采用背部多点注射方法对5只新西兰大白...
- 概要：
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【中文期刊】 王晓玲 郭明飞 等 《医学理论与实践》 2024年37卷11期 1805-1807,1817页
【摘要】 目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112 蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体.方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112 个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pE...
- 概要：
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【中文期刊】 《基因组蛋白质组与生物信息学报（英文版）》 2013年11卷4期 207-218页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【关键词】 Nicotinic receptor；Affinity purification；Quantitative proteomics；
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【中文期刊】 纳米尔 袁勤生 《中国天然药物》 2004年2卷6期 379-384页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 本文报道了用金属螯合层析从紫草籽中分离Cu/Zn超氧化物歧化酶的一种新方法.在金属螯合层析过程中,运用了pH梯度和组氨酸梯度两种洗脱技术,取得良好效果.Cu/Zn超氧化物歧化酶最终比活为5368.75 U/mg,纯化倍数366.75,得率1...
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【中文期刊】 崔克乐 李静 等 《安徽医科大学学报》 2018年53卷1期 40-45页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E. coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-Mm...
- 概要：
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【中文期刊】 王静 张学梅 等 《中南大学学报（医学版）》 2017年42卷4期 365-373页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用亲和纯化技术联合质谱分析筛选鉴定与S100A8和S100A9相互作用的蛋白,为探讨S100A8和S100A9在结肠炎相关性结肠癌发生发展中的作用机制提供线索.方法:构建含有S100A8和S100A9 CDS区和Flag亲和标签的真...
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【中文期刊】 谌海兰 陈特 等 《中国老年学杂志》 2017年37卷3期 525-528页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽（ NT-proBNP）单克隆抗体，将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定，并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法用带His-Trx-标签蛋白的NT-proBNP免疫Balb／C小鼠制备单克隆抗...
- 概要：
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【中文期刊】 程愉宣 王留洋 等 《生物工程学报》 2025年41卷8期 3262-3274页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 随着抗体制备需求的持续增加,降低分离工艺成本和提高分离效率是抗体生产亟需解决的问题.目前用于抗体分离纯化的层析介质往往是针对抗体的单一性质,如亲和性、疏水性和电荷性,存在纯化效率不高或者介质吸附载量较低等问题.为此,本研究制备了一种用于抗体...
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【中文期刊】 李洪波 高学飞 等 《中国药理学通报》 2015年8期 1165-1168页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的：利用大肠杆菌表达可溶性hCTRP6蛋白并分析其活性。方法重组载体转化大肠杆菌表达菌株、IPTG诱导表达、纯化后测定活性。结果 Trx-hCTRP6蛋白在大肠杆菌中高效表达,经镍亲合纯化和分子筛纯化,Trx-hCTRP6在细胞和动物水平...
【关键词】 C1q/TNFα相关蛋白-6；大肠杆菌；重组蛋白；
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【中文期刊】 李洪波 胡兴 等 《中国药理学通报》 2014年7期 1023-1025,1026页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的：利用大肠杆菌表达可溶性的hCTRP2球状功能区蛋白。方法重组表达载体转化大肠杆菌BL21-codonplus （DE3）菌株、IPTG诱导表达，并利用镍亲合纯化和分子筛纯化。结果 hCTRP2球状功能区蛋白实现了在大肠杆菌中的高效表达...
【关键词】 C1 q/TNFα相关蛋白-2；球状区；大肠杆菌；
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【中文期刊】 王明强 武金霞 等 《遗传》 2013年35卷11期 1274-1282页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 蛋白质相互作用的研究,是揭示生物体正常生长发育及其应对各种生物或(和)非生物胁迫的分子机制及其调控网络的重要途径.文章综述了近年来发展起来的研究蛋白质相互作用的常用实验性方法,如酵母双杂交系统、串联亲和纯化、免疫共沉淀、GST Pull-d...
- 概要：
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【中文期刊】 赵秀芹 夏强 等 《中国人兽共患病学报》 2012年28卷12期 1167-1172页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用pJV53质粒编码的分枝杆菌重组工程系统将串取亲和纯化(TAP)标签敲入耻垢分枝杆菌基因组.方法 从质粒pBS1479中扩增出tap片段,从质粒pSMT3中扩增hyg片段,从耻垢分枝杆菌基因组中分别扩增出aasf基因及其5'端非编...
- 概要：
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【中文期刊】 费凡 闫巧娟 等 《西北植物学报》 2009年29卷12期 2521-2526页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 运用传统的层析技术对膜荚黄芪种子中两种几丁质酶进行分离纯化,并对分离纯化中各个步骤得到的蛋白进行了活性研究.结果表明:(1)粗提液的硫酸铵沉淀经再生几丁质亲和柱和凝胶过滤层析Sephadex G-75得到几丁质酶A.(2)粗提液的硫酸铵沉淀...
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【中文期刊】 魏敬双 陶苒 等 《生物工程学报》 2004年20卷2期 257-261页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为克服血源免疫球蛋白制品的不足,开发了抗甲肝病毒基因工程单克隆抗体anti-HAV IgG.用无血清培养基培养rCHO工程细胞株,上清液经过rProtein A SFF亲和层析→脱盐→离子交换层析→超滤换液纯化后,所得anti-HAV Ig...
【关键词】 重组人抗甲肝病毒单抗；蛋白纯化；亲和层析；
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【中文期刊】 赖燕来 孙朝晖 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年20卷5期 578-582页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 核受体相关因子1(nuclear receptor-related factor 1,Nurr1)是主要表达于中脑黑质及腹侧被盖区多巴胺能神经元的一种转录因子,属于核受体超家族成员,其功能性配体尚未被确认.研究表明,Nurr1对中脑多巴胺神...
- 概要：
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【中文期刊】 杨智 梁小明 等 《中南药学》 2018年16卷1期 92-95页ISTICCA
【摘要】 从血浆中分离纯化出各种有价值的蛋白是生物技术领域的重要产业.血管性血友病因子可从血浆中提取,能有针对性地治疗遗传性和获得性血管性血友病,为患者提供最佳的治疗手段.蛋白层析纯化法能得到纯度高,活性佳的蛋白分子,是血管性血友病因子提纯的主要方法...
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【中文期刊】 王一丞 李园园 《武警医学》 2017年28卷7期 719-723页ISTICCA
【摘要】 目的 通过串联亲和纯化联合质谱技术(TAP-MS)筛选胃癌细胞中Rab25相互作用蛋白.方法 利用慢病毒转染技术构建稳定表达StrepⅡ-6His-EGFP-Rab25融合蛋白的SGC7901细胞系;通过StrepⅡ-6His标签进行串联亲...
- 概要：
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【中文期刊】 周雁翔 王上 等 《微生物学免疫学进展》 2025年53卷2期 55-60页ISTICCA
【摘要】 目的 通过测试国产亲和树脂层析和离子交换树脂纯化的载量、优化亲和层析洗脱条件,确定人纤维蛋白溶酶原(human plasminogen,Pg)的制备工艺.方法 样品上样于层析柱,洗涤过程中以不同的时间点收集流穿液,检测收集样品中Pg的含量,...
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【中文期刊】 邹红春 谭桂湘 等 《生命科学研究》 2016年20卷1期 16-20页ISTICCA
【摘要】 建立基于生物素AP-tag标签的FOXM1真核表达载体,利用生物素与链霉亲和素的高特异性、高亲和力的结合性质对FOXM1蛋白进行纯化,为后续鉴定其互作分子的研究奠定基础.分别构建真核表达载体pcDNA3.1-AP-FOXM1和大肠杆菌生物素...
【关键词】 生物素化FOXM1；BirA生物素连接酶；HEK 293T细胞；
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【中文期刊】 赵瑜 胡月新 等 《昆明医科大学学报》 2015年36卷6期 31-34页ISTICCA
【摘要】 目的 克隆人VEGFA基因,与原核载体融合表达、纯化及其鉴定,并将其应用于肿瘤血管生长研究过程中.方法 采用PCR方法扩增人VEGFA序列,将其克隆入pGEX-KG原核载体,获得pGEX-KG-hVEGFA重组质粒.将该质粒转化入E.col...
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【中文期刊】 张勇 张君 等 《医学综述》 2015年10期 1745-1748页ISTICCA
【摘要】 配体与受体间的识别及相互作用是分子发挥其功能的重要途径，具有重要的生物学意义。但是，寻找某一分子的受体并不容易，往往成为研究的瓶颈所在。目前寻找及验证某一对配体／受体分子及其对应关系的方法有很多，包括免疫共沉淀、噬菌体展示、酵母双杂交、分子...
- 概要：
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【中文期刊】 李洪波 吴东海 《国际药学研究杂志》 2014年41卷2期 216-220页ISTICCA
【摘要】 目的 制备人补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白1(hCTRP1)的特异性抗体.方法 合成了hCTRP1的C端抗原肽并免疫新西兰大白兔,利用亲合纯化色谱柱对抗体进行了纯化.结果 间接ELISA测定表明,抗血清效价达1∶64 000,Wester...
【关键词】 人C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白1；抗原肽；多克隆抗体；
- 概要：
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【中文期刊】 张萍萍 尹利荣 等 《天津医药》 2014年8期 755-758页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的：构建pQE-30Xa/HD-5原核表达载体，纯化重组蛋白并进行抗真菌活性的初步鉴定。方法以pcDNA3.1(+)/HD-5为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增编码HD-5成熟肽的基因。构建pQE-30Xa/HD-5重组表达载体，并对重组...
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【中文期刊】 梁俊波 缪时英 等 《医学研究杂志》 2014年43卷7期 19-22页ISTIC
【摘要】 目的 利用串联亲和纯化结合质谱分析分离和鉴定与蛋白激酶NLK结合的蛋白复合物组分.方法 将RFP、NLK和其突变体NLKK155M克隆至本室改造的带有Flag和Strep双标签的反转录病毒载体pMSCVpuro中,通过酶切鉴定并测序验证其构...
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【中文期刊】 刘侠 《医学综述》 2014年20卷7期 1153-1156页ISTICCA
【摘要】 为了进一步研究蛋白质功能并建立蛋白质在细胞内的相互作用网络,各种研究相互作用蛋白质的方法应运而生,串联亲和纯化(TAP)技术就是其中之一.TAP利用基因重组技术将标签基因融合入靶蛋白基因,转入细胞系后表达带标签的靶蛋白,使用标签的特异性对靶...
- 概要：
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【中文期刊】 吴昌英 何涛 等 《生物加工过程》 2010年8卷2期 50-54页ISTICCABP
【摘要】 建立运用兔红细胞膜制备亲和树脂来纯化红芸豆中红细胞凝集素的方法.红芸豆经过浸提,(NH_4)_2SO_4沉淀,红细胞膜亲和树脂吸附、洗脱得到红细胞凝集素(PHA-E)试样.采用电泳法测定其纯度、相对分子质量和等电点.用体积分数2%的兔红细胞...
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【中文期刊】 周丽 陈谋通 等 《癌变·畸变·突变》 2009年21卷4期 263-267页ISTICCA
【摘要】 背景与目的:为研究三氯乙烯诱导的差异蛋白SET在肝细胞L-02中的相互作用,构建带串联亲和纯化(tandem affinitypurification,TAP)标签融合表达的真核表达载体pcDNA3.1/SET-TAP.材料与方法:从L-0...
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【中文期刊】 夏雨 周景文 等 《食品与生物技术学报》 2017年36卷2期 122-128页
【摘要】 吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)是一种新型辅酶,具有广阔的应用前景.传统PQQ检测方法在检测发酵液中PQQ浓度时都存在一定的缺陷,且检测效率偏低.本研究在大肠杆菌(Escherichia coli BL...
- 概要：
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【中文期刊】 李田田 陈利苹 等 《中国预防兽医学报》 2017年39卷6期 504-507页
【摘要】 为筛选与结核分枝杆菌(MTB)的PE25/PPE41和PE35/PPE68两对异源二聚体相互作用的宿主蛋白,本研究以这两对异源二聚体为诱饵蛋白筛选与其相互作用的宿主蛋白.首先将PCR扩增的PE25/PPE41或PE35/PPE68基因串联克...
【关键词】 结核分枝杆菌；PE25/PPE41；PE35/PPE68；
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【中文期刊】 龚露 钟杰 等 《山地农业生物学报》 2017年36卷2期 19-24页
【摘要】 以野生型烟草(Nicotiana tabacum)为试验材料,采用RT-PCR克隆获得CSN复合体亚基CSN4cDNA序列,基因登录号为KC866360.序列分析表明,CSN4基因ORF长为1194 bp,编码398个氨基酸,蛋白分子质量为...
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【中文期刊】 袁敏 张越 等 《河北农业大学学报》 2017年40卷2期 18-23页
【摘要】 为了获得敏感性和特异性高的TFL1多克隆抗体,本研究构建了GST-TFL1和His-TFL1原核表达载体并转入大肠杆菌表达菌株BL21中.经IPTG诱导和蛋白纯化,成功获得了分子量约为46 kD的GST-TFL1和22 kD的His-TFL...
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【中文期刊】 华伟伟 徐维元 等 《中国食品学报》 2016年16卷10期 80-86页
【摘要】 以离子液体为萃取溶剂,将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体,通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物;利用螯合的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对组氨酸标签特异的亲和性,对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,结果表明:...
- 概要：
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【中文期刊】 赵玉红 李欣 等 《实验技术与管理》 2016年33卷5期 48-51,57页
【摘要】 设计“?KTAprime plus蛋白质层析系统纯化绿色荧光蛋白(GFP)”的综合实验，以 GFP 蛋白为研究对象，在大肠杆菌中大量表达重组 GFP蛋白，经镍柱亲和层析、离子交换层析以及凝胶过滤层析3种常用层析技术逐步纯化，各步纯化样品经 ...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张晓娅 张国芳 等 《河北农业大学学报》 2016年39卷2期 15-20页
【摘要】 NF-YC9是模式植物拟南芥核因子Y家族成员之一,在开花调控等过程中发挥重要作用,但其蛋白的特性及其作用的分子机制尚待探究.本文首先扩增获得了NF-YC9基因的序列,采用重组技术构建了与麦芽糖结合蛋白MBP编码基因融合的重组表达载体,将其转...
- 概要：
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【中文期刊】 方亚男 段敬霞 等 《食品与生物技术学报》 2016年35卷7期 747-751页
【摘要】 研究了3 α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)经化学修饰后的稳定性变化.已构建的基因工程菌E.coli BL21 (DE3)/pET28a-hsd经诱导表达、镍柱亲和纯化得到电泳纯的3α-HSD酶,酶蛋白得率是16.5％,活性回收率为64.7...
【关键词】 3α-羟类固醇脱氢酶；亲和纯化；邻苯二甲酸酐；
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【中文期刊】 柳运文 卢旺 等 《农产品加工（下半月）》 2015年8期 61-63页
【摘要】 通过对2种常用快筛方法—一酶联免疫吸附测定法(ELISA)和胶体金免疫层析法(GICA)进行比较分析,认为胶体金免疫层析法(GICA)优于酶联免疫吸附测定法(ELISA),反相高效液相色谱法检测黄曲霉毒素中,样品的2种净化处理(免疫亲和层析...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈扬扬 马贵军 等 《信阳师范学院学报（自然科学版）》 2014年1期 31-33,51页
【摘要】 抗体的捕获层析的成本在整个抗体纯化工艺中占有相当的比例．分析比较了新型小分子仿生亲和介质和常规蛋白A的动态载量、循环使用次数和线性流速等参数，并计算了相应的生产效率，发现新型小分子仿生亲和介质最高生产效率能达到蛋白A亲和层析介质最高生产效率...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 杨雄 刘秀侠 等 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 2014年42卷5期 205-210,216页
【摘要】 [目的]合成并克隆HIV-1单克隆抗体b12的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达,并分析表达产物的活性.[方法]以单抗b12的重链和轻链全基因为模板,分别扩增其可变区基因片段后,用重叠PCR的方法将二者拼接起来,形成scFv-VL-Link...
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