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            【中文期刊】 岳莎  周淑如  等 《生物化学与生物物理进展》 2014年41卷6期 617-622页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 RNA结合蛋白在RNA的生成与代谢中发挥着重要作用.我们在近年报道的PAR-CLIP (photoactivatableribonucleoside-enhanced crosslinking and immunoprecipitation...

            【关键词】 紫外交联串联亲和纯化RNA结合蛋白

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            【中文期刊】 《细胞研究(英文版)》 2009年19卷9期 1090-1097页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 In fat and muscle cells, insulin-stimulated glucose uptake is mainly mediated by glucose transporter 4 (GLUT4), which tr...

            【关键词】 GLUT4AS 160RUVBL2

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            【中文期刊】 刘雁霞  樊振川  《中国生物工程杂志》 2017年37卷11期 109-115页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:亮氨酸拉链转录因子1(LZTFL1)是一种与纤毛信号转导相关的蛋白质,关于其如何在信号转导中发挥作用以及作用机制目前尚不清楚.莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是研究纤毛信号传导的模式生物,而目前对莱茵衣藻...

            【关键词】 莱茵衣藻LZTFL1蛋白质纯化

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            【中文期刊】 童霄霞  杨远勤  等 《生物技术通报》 2017年33卷5期 176-182页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在得到较高浓度和纯度的C19orf18蛋白,再将得到的目的蛋白用于制备其特异性的多克隆抗体.利用PCR技术扩增出C19orf18基因的胞内段和胞外段,中间用柔性肽连接,再将目的片段克隆到pET28a(+)与pET32a(+)载体上,通过诱...

            【关键词】 C19orf18蛋白原核表达抗原亲和纯化

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            【中文期刊】 任海月  董彬  等 《生物工程学报》 2016年32卷8期 1124-1132页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 IFT46是纤毛内运输蛋白IFT复合物B(IFT-B)的一个重要组分,对于纤毛的组装、运动和感知发挥着重要作用.为深入研究IFT46的作用机制,利用ift46基因全序列分别构建了带有GST和MBP标签的原核表达载体pGEX-2T-ift46...

            【关键词】 莱茵衣藻纤毛IFT46

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            【中文期刊】 王姝婧  陈丙友  等 《生物工程学报》 2016年32卷9期 1175-1184页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 内含肽是前体未成熟蛋白中的一段具有自我剪接功能的多肽链,在蛋白质纯化、蛋白质连接、环肽制备、蛋白标记以及生物传感器等方面广泛应用.本文综述了内含肽应用于蛋白质亲和纯化的发展历程,分别对层析型和非层析型内含肽纯化体系进行了分析和讨论,并总结了...

            【关键词】 连续型内含肽断裂内含肽亲和纯化系统

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            【中文期刊】 张立群  李园园  等 《第三军医大学学报》 2016年38卷10期 1054-1059页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 改进串联亲和纯化质谱(TAP-MS)技术,鉴定并验证Rab40b和Rab40c在树突状细胞中的相互作用蛋白质.方法 用分子克隆技术构建融合蛋白基因eXact-6×His-EYFP-Rab40b和eXact-6×His-EYFP-Rab...

            【关键词】 树突细胞Rab40b/cCullin5

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            【中文期刊】 秦玉洁  张廷虹  等 《生物工程学报》 2016年32卷1期 105-113页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 流感病毒属于正黏病毒科,为有包膜包裹的单股负链RNA病毒.它的8个基因片段编码至少16种病毒蛋白,其中3个蛋白组成流感病毒的聚合酶复合体.流感病毒聚合酶碱性蛋白1 (PB1)是该复合体的组分之一,在病毒的转录、复制及重配中发挥重要的作用.为...

            【关键词】 流感病毒PB1多克隆抗体

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            【中文期刊】 曾嵘  靳步昆  等 《生物技术通报》 2016年32卷12期 40-46页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 亲和分离技术在蛋白质的分离纯化过程中发挥着越来越重要的作用,开发合适的配基是亲和分离的关键。按生物大分子亲和配基、小分子亲和配基、金属亲和配基三大类对亲和配基的研究情况进行综述,重点介绍其发展现状、作用机理以及目前存在的主要问题,并对亲和配...

            【关键词】 亲和纯化层析

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            【中文期刊】 程华  方向东  等 《生物技术通报》 2016年32卷5期 146-150页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 构建载体表达人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)蛋白,用以获得抗GPC3单克隆抗体。用PCR技术扩增GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入p3XFLAG-CMV-14载体,构建pCMV-gpc3表达载体。通过脂质体将该载...

            【关键词】 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达脂质体转染

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            【中文期刊】 范芳芳  孙慧莹  等 《生物工程学报》 2015年31卷12期 1753-1763页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础.首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出AttB-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重...

            【关键词】 阳离子多肽位点特异性重组GST融合蛋白

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            【中文期刊】 翁代慧  雷迎峰  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2015年31卷12期 1588-1592页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建2型登革病毒(DENV2)非结构蛋白3(NS3)与亲和标签融合蛋白的表达质粒,串联亲和纯化(TAP)法获得与NS3相互作用的蛋白.方法 根据DENV2基因序列,设计引物;以DENV2 cDNA为模板,PCR扩增出NS3基因,经酶切...

            【关键词】 登革病毒NS3串联亲和纯化

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            【中文期刊】 李洪波  李娜  等 《中国医院药学杂志》 2015年35卷3期 194-197页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:利用大肠杆菌表达可溶性hCTRP1球状功能区蛋白并分析其生物活性.方法:重组质粒转化大肠杆菌BL2卜codonplus (DE3)菌株、IPTG(异丙基-β-n硫代半乳糖苷)诱导表达并纯化.结果:hCTRP1球状区蛋白实现在大肠杆菌中...

            【关键词】 C1q/TNFα相关蛋白-1球状区大肠杆菌

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            【中文期刊】 杨辉  杨彬  等 《生物技术通报》 2015年12期 75-80页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在建立从重组CHO细胞发酵培养液中纯化抗TNF-α单克隆抗体的两步串联层析法。将含有抗TNF-α单克隆抗体的料液经两次离心、一步过滤的预处理后,用protein A填料捕获,阳离子填料Sourec30精细纯化。精细纯化过程中利用DoE的方...

            【关键词】 两步抗体纯化平台抗TNF-α单克隆抗体亲和层析

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            【中文期刊】 张志飞  赵志丽  等 《生物技术通报》 2014年8期 23-27页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 串联亲和纯化法(TAP)是一种纯化生理条件下蛋白复合物的技术,已广泛应用于鉴定蛋白相互作用和揭示蛋白复合物互作网络。近年来,随着TAP新型标签的不断出现以及与其他技术的联用,TAP技术正逐渐应用于植物蛋白质互作研究中。综述了TAP亲和标签选...

            【关键词】 串联亲和纯化亲和标签植物

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            【中文期刊】 何伟逸  李瑶  等 《中国食品卫生杂志》 2014年26卷4期 340-343页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 Ara h1是花生的一种主要致敏原蛋白,能够使花生过敏患者产生特异的IgG与IgE,从而导致花生过敏症状.Ara h1与其特异IgG和IgE的结合是导致花生致敏的一个重要原因.本研究利用Protein A亲和层析柱与Ara h1作为配体的亲...

            【关键词】 血清Ara h1亲和层析

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            【中文期刊】 王翠杰  黄永东  等 《生物工程学报》 2014年30卷10期 1634-1638页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ)是人体内最重要的抗凝血物质,利用转基因技术生产重组人抗凝血酶Ⅲ (rhATⅢ)受到了越来越多的关注,如何有效地将rhAT Ⅲ从转基因羊奶中分离纯化出来是实现其产业化的关键所在.本研究建立了基于等电点沉淀和肝素亲和层析...

            【关键词】 乳腺生物反应器重组人抗凝血酶Ⅲ肝素亲和层析

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            【中文期刊】 周海燕  马军  等 《生物工程学报》 2013年29卷7期 998-1005页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 PARP1是动物细胞内的一种重要的DNA修复酶.近几年PARP1作为新型的抗癌靶点,受到广泛的关注.为了获得高活性的PA RP1,首先将hPARP1基因克隆到载体pFastBacTM1中,构建转移载体pFast-hPARP1;然后转化大肠杆...

            【关键词】 hPARP1杆状病毒表达

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            【中文期刊】 夏君  谢炯  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2013年33卷3期 184-187页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 克隆表达登革病毒非结构蛋白NS4A,分离纯化与其相互作用的细胞蛋白.方法 用特异性引物PCR扩增出FLAG-NS4A-HA基因片段,克隆至真核表达载体pSG5中,将重组质粒通过脂质体法瞬时转染入A549细胞,并通过Western bl...

            【关键词】 登革病毒NS4A串联亲和纯化

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            【中文期刊】 赵倩倩  周晓今  等 《中国生物工程杂志》 2013年33卷6期 125-130页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为深入研究转基因玉米所表达的植酸酶蛋白的酶学性质,评价重组蛋白的致敏性和饲用安全性,必须获得高纯度植酸酶蛋白.利用识别4个不同表位的单克隆抗体制备了植酸酶蛋白亲和层析体系.结果显示,通过80%硫酸铵沉淀植酸酶蛋白粗提液初步浓缩目的蛋白后,再...

            【关键词】 植酸酶蛋白纯化免疫亲和层析

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            【中文期刊】 李玉叶  梁兆端  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2011年31卷6期 487-491页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 构建固有免疫调控蛋白--双链RNA(dsRNA)调控的蛋白激酶(PKR)的串联亲和纯化系统(TAP),初步研究PKR蛋白功能,以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析.方法 通过PCR扩增PKR目的基因,克隆至真核表达载体pcT...

            【关键词】 双链RNA蛋白激酶PKR亲和

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            【中文期刊】 蔡荣  叶昕  《生物工程学报》 2010年26卷3期 393-397页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 PHD finger8(PHF8)蛋白是最新发现的一种带有PHD结构域和Jmjc结构域的蛋白.现有研究表明其可能在基因转录、组蛋白去甲基化等方面发挥重要作用.为研究其功能,本研究构建原核表达载体pET41b-PHF8 faa886-936)...

            【关键词】 PHF8多克隆抗体亲和纯化

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            【中文期刊】 朱李茹  唐晓磊  等 《国际免疫学杂志》 2016年39卷2期 116-120页ISTICCA

            【摘要】 目的 制备鼠抗重组跨膜四蛋白33(TSPAN33)抗体并验证TSPAN33在桥本氏甲状腺炎外周血B细胞中的表达.方法 通过PCR法从霍奇金淋巴瘤细胞的eDNA中扩增TSPAN33基因,并构建到pET32a表达载体中.使用IPTG诱导重组蛋白...

            【关键词】 跨膜四蛋白33亲和纯化抗体

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            【中文期刊】 刘侠  刘剑仑  等 《现代生物医学进展》 2015年15卷29期 5613-5616页ISTICCA

            【摘要】 目的:为了研究赖氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)及其相互作用蛋白质在乳腺癌中的功能,构建带Strep Ⅱ/FLAG串联亲和标签的重组LOX蛋白慢病毒表达载体并在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达.方法:设计引物通过聚合酶链...

            【关键词】 串联亲和纯化标签赖氨酰氧化酶

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            【中文期刊】 杨爽  倪兵  《免疫学杂志》 2015年31卷4期 283-287,292页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 鉴定Treg细胞中Foxp3相互作用蛋白.方法 构建包含SBP和Protein G结合肽的Tags的Foxp3 knock-in转基因小鼠,分选Treg细胞,用亲和磁珠法纯化Foxp3相互作用蛋白复合体,质谱测序鉴定复合体蛋白组分并进...

            【关键词】 调节性T细胞Foxp3亲和磁珠纯化

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            【中文期刊】 徐进  刘涛  等 《现代免疫学》 2014年34卷5期 353-357页ISTIC

            【摘要】 制备野生型信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段和高亲和力突变体,并进行纯化条件优化与结合活性鉴定.通过全基因合成获得SIRPα-wt和高亲和力突变体SIRPα-cv1的全基因;利用分子克隆技术将其连入表达载体,最终通过大肠杆菌BL21(DE3...

            【关键词】 SIRPαCD47融合蛋白

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            【中文期刊】 吴沁航  潘扬  等 《药物生物技术》 2014年21卷6期 521-524页ISTICCA

            【摘要】 将从全人源噬菌体单链抗体库中经亲和筛选获得的抗白介素21受体单链抗体C2进行表达,摸索IPTG诱导表达的最佳浓度,经镍柱亲和层析分离纯化,HPLC鉴定单链抗体C2的纯度,并通过非竞争性ELISA固相法,经确定最佳抗原包板浓度、最佳抗原包板时...

            【关键词】 单链抗体白介素21受体表达

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            【中文期刊】 齐晨  杨修亮  等 《药物生物技术》 2014年21卷5期 385-388页ISTICCA

            【摘要】 3'-磷酸腺苷-5'-磷酰硫酸(PAPS)是生物肝素酶法制备途径的硫磺基供体,价格高且易分解.芳基硫磺基转移酶(ASTIV,EC 2.8.2.1)可以转化对硝基硫酸苯酯(PNPS)和3'-磷酸腺苷-5'-磷酸(PAP)生成PAPS.利用大肠...

            【关键词】 3'-磷酸腺苷-5'-磷酰硫酸肝素芳基硫磺基转移酶

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            【中文期刊】 周剑  刘东  《免疫学杂志》 2014年30卷6期 516-518页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 利用串联亲和纯化和液相质谱技术研究HBcAg在人肝癌细胞株HepG2中的相互作用蛋白.方法 构建HBcAg重组质粒pMSCV-HBc,采用串联亲和纯化技术富集HepG2细胞中HBcAg结合蛋白,电泳分离免疫沉淀复合物并从胶中切取HBc...

            【关键词】 乙肝核心抗原相互作用蛋白串联亲和纯化

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            【中文期刊】 丁建坤  彭育才  等 《中国生物制品学杂志》 2014年27卷5期 695-699页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 比较应用于抗体药物捕获的耐碱的4种蛋白A亲和层析介质和2种小分子亲和层析介质的性能,为单抗纯化工艺的选择提供参考.方法 利用两种单抗纯品(mAb1和mAb2)测定4种蛋白A亲和层析介质MabSelectSuRe、POROS MabCa...

            【关键词】 单克隆抗体纯化亲和层析

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            【中文期刊】 王海龙  殷丽天  等 《环境与健康杂志》 2013年30卷7期 593-597页ISTICCA

            【摘要】 目的 克隆刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1(TgRACK1)基因,原核表达、纯化TgRACK1,并分析其抗原性.方法 制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgRACK1基因全长编码序列(GenBank登录号:AY547291)的开放阅读框设计...

            【关键词】 刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1原核表达

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            【中文期刊】 雷霁卿  刘罗根  等 《热带医学杂志》 2013年13卷6期 677-680,684页ISTICCA

            【摘要】 目的 通过RNAi和蛋白复合物鉴定来初步分析布氏锥虫未知锌指蛋白TbZC3H8的特性及功能.方法 运用蛋白数据库和分析软件对TbZC3H8进行序列分析和结构域预测;构建RNAi诱导表达细胞株分析TbZC3H8经RNAi敲低后对锥虫生长的影响...

            【关键词】 布氏锥虫CCCH型锌指蛋白RNAi

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            【中文期刊】 李宏睿  张文波  等 《中国动脉硬化杂志》 2009年17卷4期 277-280页ISTICCA

            【摘要】 目的 应用大肠杆菌表达系统进行小鼠瘦素基因的克隆、表达、产物纯化与鉴定.方法应用聚合酶链扩增技术,以含有小鼠瘦素cDNA序列的质粒pMET mouse leptin为模板,扩增后克隆至载体pET-28a(+)构建重组表达载体pET-28a-...

            【关键词】 小鼠疫素包涵体Western.Blotting

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            【中文期刊】 《中国人民解放军军医大学学报(英文版)》 2009年24卷2期 76-83页CA

            【摘要】 Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) are ligand-activated transcription factors known to play a pivotal r...

            【关键词】 PPARδLBDMaltose-binding proteinSoluble expression

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            【中文期刊】 串俊兰  谢天  等 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 2019年21卷12期 881-887页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人源四次跨膜超家族蛋白12大胞外片段(TSPAN12-LEL)的原核表达质粒,诱导表达和纯化后获得可溶的重组蛋白.方法:实验研究.首先将目的基因克隆至pMa1-c2x载体上,再经PCR扩增、酶切、连接,将带麦芽糖结合蛋白(MBP)...

            【关键词】 人源四次跨膜超家族蛋白12麦芽糖结合蛋白原核表达

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            【中文期刊】 苗娅  张甜甜  等 《昆虫学报》 2018年61卷1期 59-67页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]对中华按蚊Anopheles sinensis谷胱甘肽-S-转移酶E6(AsGSTE6)进行初步晶体学研究,为深入研究其空间结构奠定基础.[方法]利用生物信息学软件,首先对中华按蚊AsGSTE6进行生物信息学预测和分析;然后进行分子...

            【关键词】 中华按蚊谷胱甘肽-S-转移酶AsGSTE6

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            【中文期刊】 曾琳  王滢  等 《中草药》 2018年49卷7期 1548-1555页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 对黑尾胡蜂磷脂酶的分离方法和活性进行研究,为黑尾胡蜂的毒性机制研究和药用发掘提供实验数据.方法 通过葡聚糖凝胶G-75分子筛柱和肝素亲和柱对黑尾胡蜂毒液中的磷脂酶活性成分进行分离.利用质谱对目的蛋白进行肽指纹图谱分析,利用蛋白测序仪测...

            【关键词】 黑尾胡蜂磷脂酶A1分离纯化

            OA
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            【中文期刊】 潘剑茹  陈莉娟  等 《生物工程学报》 2017年33卷7期 1168-1177页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 超氧化物歧化酶(SOD)家族是保护细胞免受正常代谢过程中产生的活性氧(ROS)毒性所必需的,含Mn2+离子的超氧化物歧化酶(Mn-SOD,SOD2)是其中最重要的一种.本研究合成了人源SOD2全基因序列,并将其插入带有GST的原核表达载体p...

            【关键词】 Mn超氧化物歧化酶构建融合蛋白

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            【中文期刊】 潘剑茹  吴伦巧  等 《生物工程学报》 2017年33卷5期 828-837页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 穿膜肽TAT介导的双效抗氧化酶GST(谷胱甘肽巯基转移酶)-TAT-SOD1 (Cu,Zn超氧化物歧化酶),可有效清除胞内自由基,其预防氧化损伤的效果强于SOD1-TAT,但前者的跨膜能力不如后者.为增强双效抗氧化酶的跨膜效率,本研究融合了...

            【关键词】 GST-SOD1-R9构建融合蛋白

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