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            【中文期刊】 魏佳琪  孙振  等 《病毒学报》 2024年40卷2期 432-437页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 Sf弹状病毒(Sf-rhabdo virus,S f-RV)是2014年从雌性草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda,Sf)蛹中分离得到的昆虫细胞系(Sf)中发现的一种弹状病毒,为线性负义单链RNA病毒.在Sf细胞系中发现的...

            【关键词】 Sf弹状病毒Sf细胞系昆虫细胞杆状病毒表达载体系统

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            【中文期刊】 张丽娜  巴隆  等 《吉林大学学报(医学版)》 2025年51卷1期 51-57页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导激酶(SGK)1基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK1-mcherry,并观察载体在转染HEK293细胞后的表达情况.方法:PCR法扩增SGK1目的基因片段,并与经过Hind Ⅲ和Sbf ...

            【关键词】 血清和糖皮质激素诱导激酶1真核表达载体HEK293细胞

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            【中文期刊】 刘雅妮  杨静欢  等 《中国组织工程研究》 2025年29卷5期 1091-1100页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:纤维肌痛综合征作为常见风湿病,其发病与中枢敏化及免疫异常有关,但具体过程尚未阐明,缺乏特异性诊断标志物,不断探索该病的发病机制具有重要的临床意义.目的:基于加权基因共表达网络分析(WGCNA)等生物信息学方法和机器学习算法筛选纤维肌痛...

            【关键词】 纤维肌痛综合征生物信息学机器学习

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            【中文期刊】 常卿  芦亚菲  等 《生物学杂志》 2025年42卷3期 108-112页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 提供一种全新的用于融合标签切除的工具酶DrICE的载体构建和表达纯化方法以及含有该蛋白酶特异性酶切位点的表达载体的构建方法.同时对其在重组蛋白纯化过程中融合标签的切除进行应用,表明DrICE可以作为一种专门用于特异性切除重组表达蛋白融合标签...

            【关键词】 DrICE融合标签载体构建

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            【中文期刊】 黄冉  单明  等 《安徽医科大学学报》 2025年60卷7期 1241-1245页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建HACE1慢病毒过表达细胞株,检测其对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响.方法 以人HACE1全长的cDNA序列的菌液为模板,构建慢病毒表达质粒pCDH-HACE1并筛选慢病毒细胞株.采用Western blot法检测其在胶质瘤细胞中的表...

            【关键词】 HACE1过表达慢病毒载体

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            【中文期刊】 吴钊淳  李友  等 《吉林大学学报(医学版)》 2025年51卷1期 1-8页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建PR锌指区域蛋白(PRDM)5基因的过表达慢病毒载体,建立稳定转染的小鼠神经瘤母细胞Neuro-2a,为探讨PRDM5在缺血性脑卒中(IS)发病机制中的作用奠定基础.方法:在NCBI上搜索PRDM5的序列并设计引物,PCR法扩增获...

            【关键词】 PR锌指区域蛋白过表达慢病毒载体稳定表达

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            【中文期刊】 徐媛媛  谢莹雪  等 《中国畜牧兽医》 2025年52卷9期 4009-4020页

            【摘要】 [目的]克隆水牛B细胞易位基因2(B-cell translocation gene 2,BTG2)基因编码区,分析其编码蛋白的生物学特性,构建过表达载体并转染水牛卵巢颗粒细胞,探究该基因在水牛不同组织中的表达模式,为后续深入研究水牛BTG...

            【关键词】 水牛BTG2基因生物信息学

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            【中文期刊】 柴茂  马震原  等 《中国动物传染病学报》 2025年33卷2期 124-131页

            【摘要】 利用昆虫杆状病毒表达系统(BEVS)表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并制备单克隆抗体.构建PEDV N基因重组穿梭质粒pFastBac-N,转化至感受态细胞DH10Bac中获取重组杆粒Bacmid-N,将Bacmid-N转染至SF9...

            【关键词】 昆虫杆状病毒表达系统猪流行腹泻病毒单克隆抗体

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            【中文期刊】 刘文英  左研熙  等 《湖北农业科学》 2025年64卷7期 120-127页

            【摘要】 为探究多根紫萍(Spirodela polyrrhiza)中无色花青素还原酶编码基因SpLAR在原花青素生物合成中的作用,基于多根紫萍转录组数据获取SpLAR全长cDNA序列,成功克隆该基因;对SpLAR蛋白的特性进行预测,并检测了不同培养...

            【关键词】 多根紫萍(Spirodela polyrrhiza)SpLAR基因生物信息学

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            【中文期刊】 沙宇轩  孙明军  等 《中国动物检疫》 2025年42卷10期 70-77页

            【摘要】 沙门氏菌作为一种典型的胞内寄生菌,能激发强大的免疫反应,其中减毒沙门氏菌疫苗是当前疫苗研究的热点之一.为了解重组减毒沙门氏菌疫苗(recombinant attenuated Salmonella vaccines,RASV)的减毒策略和应...

            【关键词】 重组减毒沙门氏菌疫苗疫苗载体免疫原性

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            【中文期刊】 廖加磊  《福建畜牧兽医》 2025年47卷2期 54-56页

            【摘要】 本研究对鸡柔嫩艾美耳球虫RNA进行提取及反转录,克隆鸡柔嫩艾美耳球虫IMP1 基因,并将PCR产物连接于pEasy-Blunt-Simple载体中,PCR鉴定正确后送公司测序,进行序列分析.结果:成功克隆鸡柔嫩艾美耳球虫EtIMP1 基因,...

            【关键词】 鸡柔嫩艾美耳球虫IMP1基因克隆

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            【中文期刊】 郎遥玲  王倩  等 《中国组织工程研究》 2024年28卷1期 7-11页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:出于对转基因植物的食用安全和生态安全的考虑,标记基因的存留是影响转基因植物的首要安全问题.目的:基于免疫防龋原理,课题组针对表面蛋白和葡糖基转移酶这2种致龋毒力因子,构建植物防龋疫苗融合基因表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOC...

            【关键词】 植物疫苗免疫防龋表达载体

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            【中文期刊】 张春  苏丛  等 《安徽医科大学学报》 2024年59卷3期 398-402页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建p62 基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62 基因的作用提供途径与方法.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62 基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA...

            【关键词】 P62慢病毒载体构建三质粒包装系统

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            【中文期刊】 李胜男  何嘉文  等 《吉林大学学报(医学版)》 2024年50卷5期 1322-1329页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建胞质分裂作用因子4(DOCK4)过表达慢病毒载体,建立DOCK4稳定过表达的Neuro-2a细胞.方法:在美国国家生物信息中心(NCBI)查找DOCK4的序列并设计合成引物,采用聚合酶链式反应(PCR)法扩增获取DOCK4基因序列...

            【关键词】 胞质分裂作用因子4过表达慢病毒载体Neuro-2a细胞

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            【中文期刊】 代鹏钰  杨蕊  等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2024年31卷7期 669-674页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:利用昆虫杆状病毒表达系统(昆虫BEVS)表达糖酵解酶α-烯醇化酶(ENO1)及其3种酶活性位点缺失突变的ENO1蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,为后续宫颈癌的代谢治疗研究奠定基础.方法:利用分子克隆技术将优化后EN...

            【关键词】 α-烯醇化酶昆虫杆状病毒表达系统蛋白表达

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            【中文期刊】 李娇  王慧  等 《工业微生物》 2024年54卷2期 85-91页ISTICCA

            【摘要】 双歧杆菌是一种典型的益生菌,可被当作蛋白表达的生物安全级微生物底盘.重组双歧杆菌可以表达生物活性蛋白,具有广泛的食品应用价值和生物医学研究价值.文章综述了近年来对重组双歧杆菌蛋白表达应用的研究进展,以期为工程双歧杆菌的开发提供思路.

            【关键词】 双歧杆菌表达载体表达体系

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            【中文期刊】 陆娇娇  郑娴  等 《中国实验诊断学》 2024年28卷10期 1199-1204页ISTIC

            【摘要】 目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体,建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系.方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段,利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中,并对...

            【关键词】 BPIFC基因真核表达载体HaCaT细胞

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            【中文期刊】 辛晨  况春燕  等 《贵州医科大学学报》 2024年49卷11期 1593-1600页ISTIC

            【摘要】 目的 构建携带小鼠Schlafen3(Slfn3)基因的重组过表达质粒,并观察其在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率.方法 从GenBank基因数据库获取小鼠Slfn3基因序列,利用VectorNTI软件对其进行引物设计,通过PCR扩增获得...

            【关键词】 Schlafen3内皮祖细胞重组腺病毒

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            【中文期刊】 韩稳琦  王毅  等 《陕西医学杂志》 2024年53卷1期 32-36页ISTICCA

            【摘要】 目的:探讨持续高浓度葡萄糖干预对Kv11.1离子通道蛋白表达的影响.方法:①采用双酶切法和基因重建技术将HERG基因插入到表达绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1中,构建Kv11.1离子通道蛋白的表达载体pEGFP-N1-HERG并测...

            【关键词】 HERG基因真核表达载体高糖干预

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            【中文期刊】 王永康  曹恒  等 《微生物与感染》 2024年19卷5期 267-279页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus,GETV)(GenBank:OM363683).首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV....

            【关键词】 盖塔病毒感染性克隆病毒拯救

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            【中文期刊】 巴隆  张丽娜  等 《山西医科大学学报》 2024年55卷7期 849-854页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-induced protein kinase 3,SGK3)基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry,并观察和验...

            【关键词】 血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3真核表达载体聚合酶链式反应

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            【中文期刊】 张关锋  杨泰  等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷4期 1511-1519页

            【摘要】 枯草芽孢杆菌是一类可形成芽孢的具有多种生理功能且对动物机体无毒副作用的理想益生菌.在饲料中添加枯草芽孢杆菌具有调节畜禽肠道功能、平衡微生物区系,提高免疫力和促生长等作用.枯草芽孢杆菌还可以作为饲料发酵菌种,经发酵后的饲料会降低抗营养因子的含...

            【关键词】 枯草芽孢杆菌肠道菌群发酵菌种

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            【中文期刊】 黄丽清  段安琴  等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷5期 1807-1818页

            【摘要】 [目的]获取水牛分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因CDS区序列,并预测其编码蛋白的结构功能,构建SFRP1基因真核表达载体,检测SFRP1基因在水牛不同组织中的表达情况,为探索SFRP1基因在水牛生长发育中的作用奠定基础.[方法]以水牛...

            【关键词】 水牛SFRP1基因序列分析

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            【中文期刊】 蒋道梅  姚新欣  等 《赣南医学院学报》 2024年44卷6期 571-579页

            【摘要】 目的:利用基因工程抗体技术制备TP53重组抗体,并进行临床病理诊断应用的初步探究.方法:将杂交瘤来源的TP53单克隆抗体重链及轻链可变区基因分别与pGEM-T载体连接,测序分析并选择有效重链及轻链序列分别与pFUSEss-CHIg-mG2B...

            【关键词】 TP53单克隆抗体抗体,单克隆基因工程抗体技术

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            【中文期刊】 孔瑞红  谢可  等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷12期 5185-5197页

            【摘要】 [目的]试验旨在探究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,CEBPA)基因在如皋黄鸡中的生物学特征、组织表达水平,并构建其表达载体.[方法]对如皋黄鸡CEBPA基因CDS区进...

            【关键词】 如皋黄鸡CEBPA基因生物信息学

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            【中文期刊】 陈燕玲  《福建畜牧兽医》 2024年46卷3期 1-4页

            【摘要】 目的:通过构建猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)E基因原核表达载体pET-E,为后续探讨E基因的原核表达以及功能研究奠定基础.方法:将PEDV E基因通过PCR方法进行扩增,PCR产...

            【关键词】 猪流行性腹泻病毒E基因原核表达

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            【中文期刊】 邹菊红  莫智化  等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷5期 1819-1826页

            【摘要】 [目的]研究旨在对努比亚山羊大脑富集Ras同源物(Ras homolog enriched in brain,Rheb)基因进行克隆和分析,并构建其真核表达载体,为进一步揭示Rheb对努比亚山羊骨骼肌调控的分子机理奠定基础.[方法]试验采用...

            【关键词】 努比亚山羊Rheb基因生物信息学

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            【中文期刊】 潘诗雨  尹娜  等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷5期 1837-1845页

            【摘要】 [目的]为分析鸡损伤特异性DNA结合蛋白和泛素连接酶复合物骨架蛋白库林4相关因子1(DDB1 and CUL4 associated factor 1,DCAF1)蛋白的生物学特性,构建DCAF1基因的真核表达载体,并初步探究其对J亚型禽白...

            【关键词】 DCAF1ALV-J

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            【中文期刊】 房帅  王刚  等 《中国实验血液学杂志》 2023年31卷6期 1890-1893页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 血友病A是一种由凝血因子Ⅷ突变引起的X-连锁隐性出血性疾病.目前主要以外源凝血因子替代治疗为主.随着基因治疗的不断发展,为血友病A的治疗提供了新的研究方向.应用CRISPR-Cas9技术选择合适的靶位点,并通过相应的载体介导外源性B结构域删...

            【关键词】 血友病ACRISPR-Cas9基因治疗

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            【中文期刊】 任晓敏  云岚  等 《西北植物学报》 2023年43卷9期 1441-1449页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了验证IPT基因在新麦草中的功能,为后续新麦草IPT基因进一步功能验证提供试验材料和理论依据.研究以DT型和ST型的新麦草分蘖节为材料,通过RNA-seq分析和qRT-PCR试验验证IPT的相对表达量并进行GO富集分析,采用PCR法克隆I...

            【关键词】 新麦草IPT基因克隆

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            【中文期刊】 赵潇颖  宿建胜  等 《吉林大学学报(医学版)》 2023年49卷5期 1366-1374页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:以人源性抗菌肽(AMPs)富组蛋白5(Hst5)和LL-37为亲本,设计新型杂合肽H5LL,并通过基因工程技术构建重组乳酸菌表达载体,实现AMPs的高效和安全表达.方法:采用生物信息学方法对H5LL进行理化参数、亲/疏水性、剪切位点、...

            【关键词】 富组蛋白5抗菌肽生物信息学

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            【中文期刊】 李云霞  边延林  等 《中国医药工业杂志》 2023年54卷5期 742-752页ISTICCSCDCA

            【摘要】 间充质干细胞(MSCs)在人体内分布广泛,具有强大的自我更新能力、多能性以及免疫调节能力,并且具有迁移到受损组织和肿瘤部位的特性,表达抗体的MSCs在肿瘤治疗方面显示出良好的应用前景.然而,MSCs难以转染,限制了实际应用.该文采用4种方法...

            【关键词】 间充质干细胞抗体表达慢病毒

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            【中文期刊】 肖捷  纪华  等 《新乡医学院学报》 2023年40卷9期 801-809页ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨哺乳动物细胞表达载体启动子上增强子和CpG岛调控元件在转基因沉默和位置效应中的作用.方法 应用带增强子的八聚体结合转录因子4(OCT4)基因启动子、带CpG岛的性别决定区Y框蛋白2(SOX2)基因启动子、带增强子和CpG岛的巨细胞...

            【关键词】 增强子CpG岛转基因沉默

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            【中文期刊】 宋越  苏胜杰  等 《中国畜牧兽医》 2023年50卷6期 2479-2486页

            【摘要】 [目的]构建溶血性曼氏杆菌截短型白细胞毒素(LktA)原核表达系统,表达融合蛋白并进行纯化和鉴定,为溶血性曼氏杆菌检测方法的建立提供物质基础.[方法]设计并合成特异性引物,PCR扩增羊溶血性曼氏杆菌lkta截短基因;用限制性内切酶EcoR ...

            【关键词】 截短型蛋白原核表达载体毒力因子

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            【中文期刊】 牛欣雨  郑亮  等 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年35卷4期 74-80页

            【摘要】 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)为猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)的病原体.Nsp10是PEDV编码的一种非结构蛋白,在病毒的复制过程中发...

            【关键词】 猪流行性腹泻病毒真核表达载体Nsp10蛋白

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            【中文期刊】 王聿晗  孙世宇  等 《福建农业学报》 2023年38卷5期 574-582页

            【摘要】 [目的]制备马缨杜鹃(Rhododendron delavayi)查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)基因表达的重组蛋白并验证其活性,为解析查尔酮异构酶功能提供理论依据,为改良植物花色、增加药用成分奠定基础.[方法]...

            【关键词】 马缨杜鹃查尔酮异构酶原核表达载体

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            【中文期刊】 张宇  李超  等 《中国兽医杂志》 2023年59卷9期 49-59页

            【摘要】 为了分析小鼠泛素特异性蛋白酶2(USP2)2种主要转录本(Usp2-45和Usp2-69)及其编码蛋白的理化特性,构建Usp2-45真核表达载体和Usp2启动子荧光素酶报告质粒,探究生物钟系统对Usp2不同转录本启动子的调控作用,本试验利用...

            【关键词】 泛素特异性蛋白酶2生物钟生物信息学

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            【中文期刊】 葛志毅  赵微  等 《现代畜牧兽医》 2023年11期 1-5页

            【摘要】 试验旨在探究羊痘病毒80、81基因的生物学功能.利用在线软件对80、81基因进行生物信息学分析,以此为基础通过PCR技术扩增80、81基因,与真核表达载体pCDNA3.1构建重组质粒;重组质粒转染Vero细胞,CCK-8测定重组质粒在细胞中...

            【关键词】 羊痘病毒真核表达载体生物学分析

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            【中文期刊】 邢天琦  许迪  等 《中国畜牧兽医》 2023年50卷11期 4338-4348页

            【摘要】 [目的]获取巴马小型猪ATP结合盒D亚科成员4(ATP binding cassette subfamily D member 4,ABCD4)基因CDS区序列并预测其编码蛋白的结构功能,构建真核表达载体,了解ABCD4基因在巴马小型猪中的...

            【关键词】 巴马小型猪ABCD4基因序列分析

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            【中文期刊】 陈旭  董依萌  等 《中国畜牧兽医》 2023年50卷9期 3663-3670页

            【摘要】 [目的]探究干细胞因子(stem cell factor,SCF)对梅花鹿色素合成过程的影响.[方法]构建梅花鹿SCF基因野生型(SCF1-9)和突变型(SCF789)表达载体并转染HEK293细胞.用孵育HEK293细胞的培养液培养小鼠黑...

            【关键词】 梅花鹿SCF基因表达载体

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