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            【中文期刊】 黄宪章  赵学芹  等 《南方医科大学学报》 2011年31卷11期 1914-1917页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建靶向人Akt基因的shRNA真核表达载体,通过RNAi下调Akt基因在结肠癌Lovo细胞系中的表达,观察对结肠癌细胞生长的影响.方法 将靶向人Akt基因的两条shRNA(Akt1-U6-1#;Aktl-U6-2#)表达序列克隆到入...

            【关键词】 蛋白激酶BshRNA表达载体

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            【中文期刊】 曹洁  杨朝霞  等 《中国病理生理杂志》 2011年27卷12期 2376-2381页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建靶向RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,观察其对内质网应激(ERS)状态下人正常肝细胞株L02凋亡的影响.方法:根据PERK基因核苷酸序列,按照小干扰RNA(siRNA)靶序...

            【关键词】 基因,PERKRNA干扰shRNA

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            【中文期刊】 史菲  邱晨  等 《海南医学》 2011年18期 4-7页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建小鼠整合素β1的shRNA表达载体,用RNA干扰下调整合素β1基因在小鼠支气管平滑肌细胞中的表达.方法设计并合成靶向小鼠整合素β1基因的shRNA表达载体,转染入哮喘小鼠的支气管平滑肌细胞,检测shRNA表达载体对靶基因的抑制效...

            【关键词】 整合素β1shRNA表达载体RNA干扰

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            【中文期刊】 徐伟  魏苏  等 《徐州医学院学报》 2010年30卷3期 192-195页ISTICCA

            【摘要】 目的 通过构建骨桥蛋白(osteopontin,OPN)shRNA表达载体,探索卵巢癌基因治疗新途径.方法 根据基因库上的OPN-mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链.寡核苷酸链退火后用 T4DNA连接酶连接到线...

            【关键词】 骨桥蛋白shRNA表达载体

            浏览:89 被引:0 下载:20
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            【中文期刊】 邵淑丽  崔婷婷  等 《现代肿瘤医学》 2010年18卷2期 250-252页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建靶向mrp1基因的shRNA表达载体.方法:根据mrp1基因序列设计并合成编码shRNA的DNA模板,将其定向克隆到psilencer2.1U6-neo质粒上,构建重组载体.经菌落PCR和DNA测序分析检测重组载体构建结果.结果:...

            【关键词】 mrp1基因psilencer2.1U6-neo质粒shRNA

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            【中文期刊】 张春斌  饶冬梅  等 《黑龙江医药科学》 2011年34卷6期 1-5页

            【摘要】 目的:构建livin α的shRNA表达载体,验证livin靶向RNA干扰重组质粒是否构建成功并成功转化入大肠杆菌,方法:用DNA重组技术将人livnα基因及它对应的靶点 shRNA克隆到表达载体pGenesil-1中,构建livinα的s...

            【关键词】 livinαshRNA表达载体

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            【中文期刊】 肖红卫  刘中华  等 《江西农业学报》 2010年22卷10期 118-121,125页

            【摘要】 目的:旨在观察不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰作用.方法:采用体外培养的Vero细胞,选用不同茎部长度串联shRNA表达载体+EGFP表达载体+脂质体转染的方法,将构建好的干扰载体转染Vero细胞,然后使用实时荧光定量...

            【关键词】 shRNA表达载体Vero细胞脂质体

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            【中文期刊】 杨尚君  王朝莉  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2010年26卷12期 1198-1199,1202页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探索靶向乙型肝炎病毒HBsAg基因的shR-NA表达载体Pgsl、Pgsa、Pgs3及靶向HBeAg基因shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6共转染,对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV抗原表达的抑制...

            【关键词】 乙型肝炎病毒抗原RNA干扰

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            【中文期刊】 陈泓  李力  等 《现代妇产科进展》 2010年19卷6期 419-422,426页ISTIC

            【摘要】 目的:探讨乙酰肝素酶shRNA抑制人卵巢癌细胞系乙酰肝素酶(HPSE)表达及对其侵润侵袭能力的影响.方法:针对HPSE mRNA的不同区域设计并构建不同的shRNA表达载体,脂质体法转染HPSE高表达的人卵巢癌细胞系SKOV3,实时定量PC...

            【关键词】 卵巢肿瘤细胞系肿瘤侵润

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            【中文期刊】 袁禧先  温超  等 《医学研究生学报》 2017年30卷6期 584-590页ISTICPKU

            【摘要】 目的 在转录后水平进行干预的RNA干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛.文中旨在构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过联合RNAi和外源性补充的方式研究Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对结肠癌裸鼠移植...

            【关键词】 皮下移植瘤双基因共表达慢病毒载体SurvivinshRNA

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            【中文期刊】 何泉  徐盈  等 《中国糖尿病杂志》 2015年2期 158-164页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人血管生成素‐2(Ang‐2)短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,观察其在内质网应激(ERS)状态下对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响,探讨Ang‐2基因在 ERS状态下介导血管内皮细胞凋亡的作用和机制。方法采...

            【关键词】 基因血管生成素-2内质网应激

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            【中文期刊】 吕超  曹江  等 《中国实验血液学杂志》 2013年21卷3期 567-570页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究旨在构建靶向AATF基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的人白血病U937细胞系.根据GenBank数据库提供的AATF mRNA序列,以228~249、303 ~ 324、443 ~ 464位序列作为R...

            【关键词】 AATF短发夹RNA白血病

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            【中文期刊】 孙磊  魏清  等 《山东大学学报(医学版)》 2012年50卷6期 70-74,79页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 利用人BNIP3的真核表达载体和靶向BNIP3的shRNA表达载体,研究BNIP3过表达和封闭时对肝癌细胞自噬的影响.方法 从人肝癌细胞系中,通过RT-PCR扩增人BNIP3基因编码区序列,酶切后插入pcDNA3.1-His-C载体,...

            【关键词】 BNIP3表达载体shRNA

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            【中文期刊】 孙磊  魏清  等 《山东大学学报(医学版)》 2012年50卷6期 70-74,79页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 利用人BNIP3的真核表达载体和靶向BNIP3的shRNA表达载体,研究BNIP3过表达和封闭时对肝癌细胞自噬的影响.方法 从人肝癌细胞系中,通过RT-PCR扩增人BNIP3基因编码区序列,酶切后插入pcDNA3.1-His-C载体,...

            【关键词】 BNIP3表达载体shRNA

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            【中文期刊】 吴元明  张晓楠  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2008年24卷2期 115-118页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpin RNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducible Factor-1,HIF1)基因的沉默效果.方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆...

            【关键词】 shRNA表达载体RNA干涉

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            【中文期刊】 袁成福  杨俊霞  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2008年24卷1期 60-68页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 研究人黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因特异的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体pGenesil-1-MCHR2-shRNA对MCHR2表达及特征的影响.将pGenesil-1-MCHR2-shRNA转染到稳定表达人MCHR2基因的...

            【关键词】 MCHR2shRNA真核表达载体基因表达

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            【中文期刊】 干惠珠  张桂珍  等 《中国免疫学杂志》 2007年23卷1期 31-33,37页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨靶向增强型绿色荧光蛋白(EGFP)小发夹结构RNA(Short hairpin RNA,shRNA)对耐阿霉素的人乳腺癌细胞(MCF-7/AdrR)中EGFP基因表达的抑制作用.方法:构建针对EGFP基因的shRNA表达载体,与p...

            【关键词】 RNAi绿色荧光蛋白乳腺肿瘤

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            【中文期刊】 于利利  王泽华  《华中科技大学学报(医学版)》 2007年36卷4期 489-491,499页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 设计构建Livin的shRNA真核表达载体,并转染宫颈癌HeLa细胞,进一步研究该表达载体对目的基因Livin的沉默效果,为宫颈癌基因治疗探索新方法.方法 以Livin为靶基因,以Pgenesil-1质粒为载体,构建重组体,根据Liv...

            【关键词】 LivinshRNA真核表达载体HeLa细胞

            浏览:188 被引:6 下载:4
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            【中文期刊】 郭亚妹  孙昊  等 《宁夏医科大学学报》 2018年40卷3期 249-253,260页ISTIC

            【摘要】 目的 构建整合素α5基因(ITGA5)的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体,并建立稳定沉默ITGA5表达的肝癌细胞系Bel-7404.方法 设计3条ITGA5基因特异性shRNA靶序列和1条非特异性序列作为阴性对照(NC),分别克隆到...

            【关键词】 整合素α5基因短发卡shRNA慢病毒表达载体

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            【中文期刊】 何燕浙  唐德军  《肝胆外科杂志》 2016年24卷4期 298-299,302页ISTIC

            【摘要】 目的 构建Lv-shRNA-hsa-microRNA-691慢病毒表达载体.方法 PCR扩增pri-miR-691-2前体序列,克隆至plenti-GFP慢病毒表达载体;双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测.构建成功后感染人胰腺癌...

            【关键词】 microRNALv-shRNA-hsa-miR-691慢病毒表达载体

            浏览:226 被引:0 下载:8
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            【中文期刊】 凌英会  朱露  等 《畜牧兽医学报》 2019年50卷9期 1888-1896页

            【摘要】 研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响.采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的...

            【关键词】 FST基因卵巢卵泡颗粒细胞慢病毒载体

            浏览:1 被引:8 下载:0
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            【中文期刊】 孙硕文  朱之燕  等 《山东医药》 2015年22期 12-15页ISTICCA

            【摘要】 目的:探讨SIRT1-shRNA慢病毒表达载体转染对人非小细胞肺癌A549细胞SIRT1基因表达、黏附能力、迁移能力及E-cadherin、β-catenin mRNA和蛋白表达量的影响。方法构建SIRT1-shRNA慢病毒表达载体,并用其...

            【关键词】 非小细胞肺癌SIRT1-shRNA慢病毒表达载体SIRT1基因

            浏览:589 被引:2 下载:28
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            【中文期刊】 陈泓磊  吴晓滨  等 《广东医学》 2015年5期 685-687页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建介导 RECQL4 RNA 干扰的 shRNA 慢病毒表达载体。方法将人工合成的 RECQL4 siR-NA 经 PCR 扩增后与线化的 pLKO.1慢病毒表达载体连接,经测序鉴定后,将 pLKO.1-RECQL4-shRNA 与...

            【关键词】 慢病毒表达载体RECQL4shRNA

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            【中文期刊】 曹迎亚  车轶群  等 《癌变·畸变·突变》 2014年5期 348-352页ISTICCA

            【摘要】 目的:建立可条件性诱导PLK1-shRNA稳定表达的食管癌细胞株,为深入研究PLK1在食管癌发生发展中的作用及分子机制提供细胞模型。方法:合成PLK1-shRNA寡核苷酸,退火后连接到慢病毒表达载体pLKO-Tet-On并转化至感受态细胞S...

            【关键词】 PLK1shRNA诱导表达

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            【中文期刊】 易芳  田瑞敏  等 《现代肿瘤医学》 2013年21卷3期 486-488页ISTICCA

            【摘要】 目的:以pGenesil-1质粒为介导,构建针对MBP基因的shRNA表达载体.方法:设计特异性表达MBP shRNA结构的互补DNA序列3个及1个阴性对照序列,退火并克隆至质粒载体pGenesil-1中,转化DH5α菌株,进行重组质粒的酶...

            【关键词】 MBP质粒shRNA表达载体

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            【中文期刊】 田瑞敏  鄢佳程  等 《川北医学院学报》 2013年28卷2期 112-116页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建21.5 kD MBP基因干扰序列21.5 kD MBP-shRNA(21.5 kD MBP short hairpin RNA interference),筛选最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21...

            【关键词】 髓鞘碱性蛋白21.5kD MBP-shRNA表达载体基因干扰

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            【中文期刊】 田潇  尹洁  等 《医学分子生物学杂志》 2012年09卷2期 93-97页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立 p100 表达抑制的 HepG2 肝癌细胞稳定株,并初步探讨 p100 在 HepG2 肝癌细胞中的功能.方法 用脂质体将含有真核细胞筛选标记 Neo 和 GFP 的 p100 shRNA 表达质粒转染人 HepG2 细胞,检测...

            【关键词】 人类p100蛋白HepG2肝癌细胞shRNA表达载体

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            【中文期刊】 干惠珠  张桂珍  等 《中国实验诊断学》 2011年15卷4期 619-621页ISTIC

            【摘要】 目的 构建靶向增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的RNA干扰质粒载体.方法 设计并合成针对EGFP编码区的模板寡核苷酸单链,克隆入pSilencerTM 3.1-H1 neo载体中,对重组质粒进行酶切鉴定和DNA序列测定.结果 重组质粒经限...

            【关键词】 RNAi增强型绿色荧光蛋白shRNA表达载体

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            【中文期刊】 卢绩  陈岐辉  等 《中国实验诊断学》 2010年14卷12期 1921-1923页ISTIC

            【摘要】 目的 构建靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索EZH2基因的作用的研究做准备.方法 根据EZH2 mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和...

            【关键词】 EZH2基因RNA干扰shRNA

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            【中文期刊】 于洪泉  张宇  等 《中国实验诊断学》 2009年13卷12期 1692-1694页ISTIC

            【摘要】 目的 探讨Survivin基因沉默对人脑胶质瘤细胞株U87体外细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 利用脂质体将pGenesil Survivin shRNA干扰质粒转染U87细胞,通过western法检测干扰48h后Survivin 蛋白的抑...

            【关键词】 生存素胶质瘤细胞增殖

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            【中文期刊】 过七根  张炳火  等 《陕西医学杂志》 2008年37卷11期 1454-1456页ISTICCA

            【摘要】 目的:采用RNA 干涉(RNA interference,RNAi) 技术研究神经干细胞相关基因-AF116909在神经干细胞中的作用.方法:构建含AF116909目的基因特异序列的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shR...

            【关键词】 @神经干细胞@RNA干涉基因表达

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            【中文期刊】 陈岐辉  卢绩  等 《中国实验诊断学》 2008年12卷1期 42-46页ISTIC

            【摘要】 目的 构建靶向H1WI基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索HIWI基因的作用的研究做准备.方法 根据HIWI mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和...

            【关键词】 HIWI基因RNA干扰shRNA

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            【中文期刊】 干惠珠  张桂珍  等 《中国生物制品学杂志》 2007年20卷1期 5-8页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 探讨靶向mdr1基因的shRNA表达载体对耐阿霉素的人红白血病细胞(K562/ADM)P-gp表达的抑制作用.方法 合成靶向mdr1基因的短发夹shRNA表达载体,转染K562/ADM细胞.利用RT-PCR检测转染细胞中mdr1基因m...

            【关键词】 shRNA表达载体mdr1基因人红白血病细胞

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            【中文期刊】 干惠珠  张桂珍  等 《蚌埠医学院学报》 2007年32卷4期 384-387页ISTIC

            【摘要】 目的:设计并构建靶向mdr1基因shRNA真核表达质粒.方法:以mdr1为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸,退火形成互补双链结构,再克隆至pSilencerTM 3.1-H1 neo载体,构建重组的短发夹shRNA表达载体.采用酶切法...

            【关键词】 mdr1基因RNA干扰shRNA表达载体

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            【中文期刊】 汪光蓉  张国元  等 《免疫学杂志》 2007年23卷3期 311-315页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础.方法 运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认...

            【关键词】 乙型肝炎病毒抗原shRNA

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            【中文期刊】 闫海龙  陈晓旭  等 《家畜生态学报》 2017年38卷8期 7-13页

            【摘要】 UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用.根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区...

            【关键词】 组蛋白去甲基化UtxshRNA

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            【中文期刊】 何燕浙  唐德军  《养生保健指南》 2016年18期 1-1页

            【摘要】 目的:构建 Lv-shRNA-hsa-microRNA-691慢病毒表达载体。方法:双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测。构建成功后感染人胰腺癌细胞Panc-1,48h后Real-time Q-PCR检测miR-691的表达。结果...

            【关键词】 microRNALv-shRNA-hsa- miR-691慢病毒表达载体

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            【中文期刊】 吕延成  潘晓瑜  等 《湖北农业科学》 2015年54卷15期 3779-3783页

            【摘要】 根据乙型单纯疱疹病毒(HSV-2)UL54基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆至真核表达载体pGPU6/GFP/Neo中,经脂质体介导转染HEK293细胞,倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测HEK293细胞...

            【关键词】 UL54基因RNA干扰短发夹RNA

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            【中文期刊】 龚云  乔树叶  等 《畜牧兽医学报》 2014年45卷1期 62-68页

            【摘要】 本试验旨在克隆水牛阴阳因子1(YY1)基因,并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段.以水牛成纤维细胞cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增水牛YY1基因CDS序列,将其连接插入到pMD18-T载体中,进行序列测序并分...

            【关键词】 水牛YY1基因shRNA慢病毒表达载体

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            【中文期刊】 过七根  《九江学院学报(自然科学版)》 2013年28卷1期 60-62,65页

            【摘要】 目的 探讨Stat3基因在脑胶质瘤细胞中的表达及作用.方法 将对应Stat3基因特异序列的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体转染到脑胶质瘤细胞株SHG44,观察细胞形态的变化;用TdT介导的dUTP缺口...

            【关键词】 stat3基因脑胶质瘤细胞shRNA表达载体

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