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            【中文期刊】 包广宇  丁秀芝  等 《中国免疫学杂志》 2007年23卷9期 782-784,788页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨细胞因子TNF-α、IFN-γ、IFN-α、PDGF-BB、bFGF对TGF-β1启动活性的影响.方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增获得含有人TGF-β1基因启动子序列的-1 328~+812 bp片段,与氯霉素乙酰基转移酶...

            【关键词】 TGF-β1基因启动子

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            【中文期刊】 张媛  王富强  等 《生物工程学报》 2007年23卷4期 618-622页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以产黄青霉(Penicillium chrysogenum Thom)cDNA为模板,克隆得到一个新的谷胱甘肽转移酶基因PcgstB,其开放阅读框长651bp,编码216个氨基酸的蛋白质.与已知序列进行BLASTp比较显示,该蛋白具有保守的...

            【关键词】 谷胱甘肽转移酶产黄青霉原核表达

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            【中文期刊】 魏丽丽  李成华  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2007年28卷2期 130-133页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 获取人白介素24(IL-24)cDNA,构建原核表达载体以表达含有谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白GST-IL-24.方法 以人外周血单核细胞(PBMC)总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-24 cDNA,克隆入原核表达载体pG...

            【关键词】 白介素24二次PCR突变纠正

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            【中文期刊】 邱重晏  王正祥  《微生物学通报》 2006年33卷4期 91-94页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以粗糙脉胞霉CICIM F00021染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到粗糙脉胞霉酸性蛋白酶结构基因.对其序列进行了测定和分析,表明扩增得到的片段为酸性蛋白酶基因.将扩增出的酸性蛋白酶基因克隆入酵母表达载体中获得重组质粒pPIC9K-ap...

            【关键词】 粗糙脉胞霉酸性蛋白酶克隆

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            【中文期刊】 王宁波  殷瑜  等 《中国抗生素杂志》 2006年31卷11期 654-656,674页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以始旋链霉菌(Streptomyces pristinaespiralis)HCCB2003-8的染色体DNA为模板,通过优化PCR条件扩增出FMN还原酶、PⅡA合酶的基因片段.与文献报道的基因序列做同源比较,snaA和snaB碱基序列分别...

            【关键词】 始旋链霉菌普那霉素基因克隆

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            【中文期刊】 黄彦  韦宇拓  等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷1期 68-71页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L-乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L-乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L-乳酸脱...

            【关键词】 L-乳酸L-乳酸脱氢酶乳酸片球菌

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            【中文期刊】 洪剑辉  张梁  等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷3期 391-394页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以扣囊复膜孢酵母染色体DNA为模板,通过PCR方法扩增到其β-葡萄糖苷酶基因bgl1,经EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切并和经相同酶切的穿梭表达载体pYX212连接,构建了重组质粒pYX-sbgl,转化酿酒酵母W303-1A,bgl1基因获...

            【关键词】 扣囊复膜孢酵母β-葡萄糖苷酶纤维二糖

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            【中文期刊】 刘东海  张乐鸣  等 《中国病理生理杂志》 2006年22卷2期 380-383页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:建立乳腺癌中c-erbB-2基因的荧光定量PCR(FQ-PCR)方法.方法:乳腺癌细胞中的c-erbB-2基因与质粒PGEM-T easy vector重组,转化大肠杆菌E.coli DH5a,获得克隆的c-erbB-2基因标准模板....

            【关键词】 乳腺肿瘤基因,c-erbB-2荧光定量-PCR

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            【中文期刊】 叶震敏  汪小华  等 《生物工程学报》 2006年22卷3期 397-402页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,PCR扩增E1A基因,酶切连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,pAdTrasck-CMV-E1A经PmeI线性化后,与pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,筛选重组腺病毒质粒pAdEa...

            【关键词】 裂解型腺病毒Ad-E1A人脐静脉内皮细胞

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            【中文期刊】 谭慧芳  张国青  等 《微生物学通报》 2006年33卷6期 68-73页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用RT-PCR的方法,以特异腐质霉(Humicola insolens)H31-3总RNA为模板,克隆到中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因egl2的cDNA,将其插入到表达载体pGAPZαA中,重组质粒经线性化,电击转化毕赤酵母(Pichia pas...

            【关键词】 特异腐质霉毕赤酵母内切葡聚糖酶Ⅱ

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            【中文期刊】 张雷  陈建平  等 《生物医学工程学杂志》 2006年23卷2期 379-382页MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 以军团菌DNA为模板,PCR扩增获得军团菌主要外膜蛋白基因(Major outer membrane protein gene, ompS),与原核表达质粒pUC18定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21,并用限制性酶酶切分析、聚合酶...

            【关键词】 军团菌主要外膜蛋白基因(ompS)克隆

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            【中文期刊】 王龙刚  邬敏辰  等 《微生物学通报》 2006年33卷6期 39-42页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 根据NCBI中报道的Brevibacterium sterolicum ATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacterium sp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来...

            【关键词】 Brevibacterium sp.DGCDC-82胆固醇氧化酶克隆

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            【中文期刊】 周长林  杨毅刚  等 《中国药科大学学报》 2006年37卷4期 367-370页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建共表达载体pETDuet-aroB-qutB,在大肠杆菌中同时表达奎尼酸合成途径中的关键酶脱氢奎尼酸合成酶(DHQase)和奎尼酸脱氢酶(QDHase).方法:分别以大肠杆菌(B21)和构巢曲霉(ATCC 24919)基因组为模板...

            【关键词】 脱氢奎尼酸合成酶奎尼酸脱氢酶奎尼酸

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            【中文期刊】 张敏睿  朱娟莉  等 《微生物学通报》 2006年33卷5期 80-83页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为获得丙型肝炎病毒的核心蛋白(Core),将克隆有Core基因的表达载体pBVIL1-Core转化大肠杆菌HB101,温度诱导表达Core蛋白.同时利用PCR方法以含有丙型肝炎病毒全基因的质粒PBRTM/HCV为模板扩增Core基因,克隆进...

            【关键词】 丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达

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            【中文期刊】 马艳丽  任万华  《临床肝胆病杂志》 2006年22卷3期 221-222页ISTICPKUCA

            【摘要】 <篇首> 乙型肝炎病毒基因组为双链松弛环状DNA(rcDNA).HBV感染发生后,HBVDNA进入细胞,rcDNA转化为共价闭合环状DNA(cccDNA),并以cccDNA为模板开始一系列的病毒复制过程.HBV复制是一种保守的机制,在转录后模板...

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            【中文期刊】 张青  张思河  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2006年22卷2期 196-199页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的: 以鼠源抗γ-sm抗体重链Fd片段为模板, 筛选人源性抗人γ-精浆蛋白抗体轻链.方法: 利用RT-PCR从前列腺癌患者外周血淋巴细胞扩增出全套的人抗体轻链基因, 克隆入含鼠源性抗γ-sm抗体重链Fd片段的噬粒载体pComb3X/mFd...

            【关键词】 噬菌体抗体库导向筛选前列腺癌

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            【中文期刊】 车在前  高平进  等 《中国病理生理杂志》 2006年22卷12期 2317-2321页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:克隆和构建带大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/CTGF,并观察其对血管外膜成纤维细胞(AF)表型的影响.方法:以AF总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得CTGF的cDNA...

            【关键词】 结缔组织生长因子血管外膜成纤维细胞

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            【中文期刊】 李霞  张健  等 《解放军医学杂志》 2006年31卷2期 128-131页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建CblN/Grb2嵌合分子,表达和纯化GST-CblN/Grb2融合蛋白,并考察嵌合分子CblN/Grb2在体外是否具有泛素连接酶活性.方法提取SKBR-3细胞的总RNA并反转录为cDNA,作为模板用PCR扩增Grb2基因的SH2片...

            【关键词】 重叠延伸PCR重组融合蛋白质类泛素蛋白连接酶类

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            【中文期刊】 林琳  任风  等 《中国微生态学杂志》 2006年18卷1期 29-31页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的用乳酸菌质粒表达载体pNZ2103克隆BALB/c小鼠金属硫蛋白(MT)-1 cDNA基因.方法设计一对含有限制酶Pst1和Hind Ⅲ位点的引物.以质粒pET21a-MT为模板,采用PCR法扩增BALB/c小鼠MT-1 cDNA.用限...

            【关键词】 BALB/c小鼠金属硫蛋白乳酸菌质粒表达载体pNZ2103

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            【中文期刊】 杨静  杨雅平  等 《首都医科大学学报》 2006年27卷2期 155-157页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的为寻找更多有效的旋毛虫病疫苗候选抗原分子,构建旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库.方法以旋毛虫成虫cDNA文库为模板,进行PCR扩增.扩增产物500~2 000 bp之间的DNA片段用BamH Ⅰ、HindⅢ酶切,将酶切产物克隆入真核表达载...

            【关键词】 旋毛虫cDNA表达质粒文库构建

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            【中文期刊】 陈书霞  姚莲芳  等 《植物生理学通讯》 2006年42卷2期 262-264页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 用基因组微量DNA快速提取方法,从胡萝卜转化再生株样品中快速提取了基因组DNA,并以此为模板进行胡萝卜转化再生株的PCR快速检测的结果表明,这是转基因时PCR检测的一种快速、简便、有效方法.

            【关键词】 DNA提取方法PCR检测胡萝卜再生株

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            【中文期刊】 贾笑英  张金文  等 《西北植物学报》 2006年26卷4期 667-671页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以大肠杆菌BL21染色体DNA为模板,根据glgC基因的全序列设计了1对引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了glgC基因片段,测序结果显示该片段大小为1 296 bp,编码432个氨基酸残基.将该基因克隆到原核表达载体pET-28a-c(...

            【关键词】 glgC基因克隆原核表达

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            【中文期刊】 杨利军  杨涛  等 《中国生物工程杂志》 2006年26卷11期 45-47页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建蛇毒锯鳞蝰素(Echistatin,Ecs)多顺反子串联多拷贝基因.方法:以pMD18T-Ecs为模板,利用三对引物分别扩增Ecs基因,每个Ecs基因都有独立的起始和终止密码子,然后通过三个Ecs基因之间合适的酶切位点使之串联,再...

            【关键词】 蛇毒锯鳞蝰素多顺反子克隆及表达

            浏览:90 被引:2 下载:4
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            【中文期刊】 刘苏虎  张王刚  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2005年26卷2期 115-118,123页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础.方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6-si...

            【关键词】 Fas蛋白RNA干扰质粒

            浏览:299 被引:9 下载:8
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            【中文期刊】 姜秀云  王春凤  等 《微生物学报》 2005年45卷2期 298-300页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,以MPB51成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM-T-51.以...

            【关键词】 牛分枝杆菌MPB51基因克隆

            浏览:95 被引:16 下载:5
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            【中文期刊】 高久春  黄红兰  等 《中国免疫学杂志》 2005年21卷8期 583-585页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒.方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2C cDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒.结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出98...

            【关键词】 柯萨奇B4病毒(CVB4)1型糖尿病非结构蛋白P2C

            浏览:130 被引:1 下载:16
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            【中文期刊】 刘家森  陈淑红  等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷9期 55-58页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以SARS冠状病毒(BJ01株)基因组RNA为模板,经RT-PCR扩增得到SARS-CoV nsp8基因,并克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pNSP8E.pNSP8E转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出可...

            【关键词】 SARS冠状病毒复制酶表达

            浏览:155 被引:3 下载:1
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            【中文期刊】 连云宗  李极品  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷5期 661-662页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达.方法: 以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因.PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后,克隆至原核表达载体pE...

            【关键词】 病毒白细胞介素-10大肠杆菌表达

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            【中文期刊】 侯卫红  田芳  等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷6期 51-55页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了构建小鼠canstatin C端片段的原核表达载体并在大肠杆菌中表达.以小鼠肝脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠canstatin C端片段(mCan-C)基因,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将mCan-C基因定...

            【关键词】 Canstatin cDNA克隆 血管生成抑制素 RT-PCR 原核表达

            浏览:151 被引:1 下载:0
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            【中文期刊】 刘英开  陆树良  等 《中国修复重建外科杂志》 2005年19卷1期 10-14页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的研究真皮生物模板的应用对皮肤组织创伤修复过程中成纤维细胞(fibroblast,FB)生物学行为的影响,探讨其在影响组织修复及减轻瘢痕形成中的作用机制. 方法 SD大鼠120只,在背部造成2.5 cm×2.5 cm的全层皮肤组织缺损创面...

            【关键词】 创面愈合复合移植成纤维细胞

            浏览:148 被引:13 下载:24
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            【中文期刊】 高书颖  张惟材  等 《微生物学报》 2005年45卷1期 139-141页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以质粒pKF3为模板,扩增出两翼与ptsG基因上下游序列同源,中间为氯霉素抗性基因的DNA片段,连至pMD18-T载体,构建得到pMD18-PC.以质粒pQE60-SDH为模板,扩增山梨糖脱氢酶基因sdh,与pMD18-PC连接,得到pMD...

            【关键词】 山梨糖脱氢酶Red重组整合

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            【中文期刊】 吴朝霞  郑文岭  等 《中山大学学报(医学科学版)》 2005年26卷z1期 11-13页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]克隆HBsAg和TAT-HBsAg融合基因,在酿酒酵母中同源重组表达.[方法]以HBV基因组为模板PCR扩增HBsAg和TAT-HBsAg融合基因;从酿酒酵母文库质粒pHSS6-mTn-3xHA/LacZ中筛选出可在酿酒酵母中进行同...

            【关键词】 TAT-HBsAg酿酒酵母同源重组

            浏览:159 被引:0 下载:0
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            【中文期刊】 李志刚  江元森  等 《中山大学学报(医学科学版)》 2004年25卷z1期 25-27页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]构建包含人乙型肝炎病毒(HBV)S基因与PreS2/S基因的重组载体.[方法]设计合成2对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVS基因、PreS2/S基因片段;用HindⅢ和BamHⅠ双...

            【关键词】 肝炎病毒,乙型S蛋白S2S蛋白

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            【中文期刊】 席慧  刘凤华  等 《生物技术通报》 2004年3期 40-44页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 核糖核酸酶HII(RNage HII)能有效降解RNA和DNA杂交链中的RNA链.为进一步研究其功能,利用大肠杆菌XLlblue为模板,相应的寡聚脱氧核苷酸为引物,PCR扩增大肠杆菌RNase HII(rnh 2)基因,并将目的基因连接到克...

            【关键词】 核糖核酸酶H核糖核酸酶HII诱导表达

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            【中文期刊】 许芳  冯建成  等 《微生物学杂志》 2004年24卷2期 10-13页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 实现纳豆激酶基因(nattokinase gene)在大肠杆菌中高活性表达,并说明前肽(pro序列)对纳豆激酶的活性表达必不可少.以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,采用PCR方法分别扩增编码信号肽、前肽及成熟肽的序列(pre-pro-NK)...

            【关键词】 纳豆激酶基因大肠杆菌活性表达

            浏览:125 被引:26 下载:9
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            【中文期刊】 姚海兰  聂凯  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2004年33卷5期 522-525页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的利用基因重组技术构建一种新型原核表达载体,使之表达带有His和GST标签的融合蛋白.方法以质粒pGEX为模板,将PCR扩增出的GST基因插入到载体pQE-30中构建pQE-30-GST,经IPTG诱导GST蛋白表达并用Western b...

            【关键词】 基因载体基因表达融合蛋白

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            【中文期刊】 丛敏  靖学芳  等 《首都医科大学学报》 2004年25卷1期 35-39页ISTICPKUCA

            【摘要】 为使rBPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母表达系统中分泌表达,拟构建synBPIm600酵母表达载体.以pUC18-synBPI414质粒为模板扩增synBPI200基因片段,经XhoI/EcoRI双酶切获得synBPI185 bp基因片段;...

            【关键词】 杀菌/渗透增强蛋白rBPIm23重组抗菌蛋白表达载体

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            【中文期刊】 侯卫红  王天云  等 《遗传》 2004年26卷5期 658-662页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以小鼠肝脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠canstatin及其N端片段基因,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将小鼠canstatin及其N端片段基因定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,分别构建表达质粒pET/...

            【关键词】 canstatin血管生成抑制素RT-PCR

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            【中文期刊】 丰岩清  国宁  等 《中山大学学报(医学科学版)》 2003年24卷6期 585-588页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]克隆 Wilson病( WD)基因的全长 cDNA,制备 WD的突变体,为进一步研究突变蛋白的功能奠定基础.[方法]采用 RT-PCR和 TOPO-TA克隆技术,克隆了全长 WD cDNA,并以此为膜板应用 USE定点诱变技术(特异...

            【关键词】 肝豆状核变性/遗传学定点诱变

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            【中文期刊】 袁静  张振中  等 《生物工程学报》 2003年19卷2期 185-189页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以本实验室构建的含nisZ基因的质粒pHJ201为模板,采用定点突变技术将乳链菌肽Z分子中B环第8位Thr突变为Ser(T8S)、将第2位Dhb突变为Dha和第31位His突变为Lys(T2S/H31K)以及将第27位Asn突变为Lys和第...

            【关键词】 NisinZ定点突变稳定性

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            【中文期刊】 卢晓梅  张利华  等 《中国寄生虫病防治杂志》 2003年16卷3期 159-161页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的获得重组细粒棘球蚴抗原B(EgB)的真核表达蛋白,构建EgB酵母表达重组体,并对构建的重组体进行序列分析.方法以原核重组体JM109-pMal2xEgB作为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增EgB片断.目的基因EgB片断插入酵母表达...

            【关键词】 重组细粒棘球蚴抗原B酵母表达载体pYES2/NT B

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            【中文期刊】 张畅斌  李月琴  等 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2003年24卷1期 68-72页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:为制备重组小鼠Pem(以下简称mPem)-谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白,作为研究mPem蛋白功能的材料.方法:根据携带小鼠Pem基因编码序列的模板质粒pEGFP/mPem设计合成特异性引物,PCR扩增小鼠Pem基因编码序列,并...

            【关键词】 Pem基因表达大肠杆菌小鼠

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            【中文期刊】 姜国忠  牛向丽  等 《遗传》 2003年25卷5期 573-576页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 根据衣藻、矮牵牛花、Pisumsativum等真核生物hsp70a氨基酸高度保守序列设计两对简并引物,以热休克盐藻cDNA为模板进行巢式PCR扩增,产物经T-A克隆转化至JM109大肠杆菌中,经筛选后测序,将测序结果推导成氨基酸序列进行同源...

            【关键词】 杜氏盐藻hsp70acDNA

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            【中文期刊】 陈婷  陆军  等 《遗传》 2003年25卷5期 567-572页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以酵母基因组DNA为模板,通过PCR方法分别扩增出在5′端带有6xHis标签的gcn5和rpd3基因,将其克隆到pBV220质粒中,分别构建成表达质粒pBVgcn5和pBVrpd3,转化大肠杆菌(Escherichia coli)并进行诱导...

            【关键词】 组蛋白乙酰基转移酶组蛋白去乙酰化酶GCN5

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            【中文期刊】 刘雪梅  刘建宇  等 《中国微生态学杂志》 2003年15卷2期 91-92页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:原核表达人类肥胖基因瘦素蛋白.方法:以携人类肥胖基因的pUC119-ob为模板,PCR扩增瘦素蛋白基因片段,并克隆到pET-32a构建重组表达质粒pET-32a-ob,经酶切和测序鉴定后,转化至大肠埃希菌DH5α中表达,SDS-PAG...

            【关键词】 肥胖基因基因表达瘦素蛋白

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            【中文期刊】 付畅  杨传平  等 《植物研究》 2003年23卷4期 433-436页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 HAL1基因是酵母中重要的耐盐基因.以酿酒酵母 AS2.375菌株的DNA为模板,根据已发表的序列设计引物,经PCR扩增得到约900bp的HAL1基因片段,连接到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌JM109,筛选重组质粒进行酶切分析和序列测...

            【关键词】 酵母HAL1基因克隆

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            【中文期刊】 罗立新  黄志立  等 《微生物学通报》 2002年29卷3期 62-66页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用PCR技术以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到温度诱导型表达载体pBV220上,转化E.coli HB101,获得转纳豆激酶基因重组菌.在确定了其最佳培养时间与诱导时间后,SDS-PAGE分析结果表明基因表达产物...

            【关键词】 纳豆激酶基因克隆表达

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            【中文期刊】 丁焕文  张丽君  等 《实用医学杂志》 2002年18卷9期 919-921页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:优化采用PCR技术从PBR322-bFGF质粒扩增bFGF 基因片段的条件并构bFGF真核表达载体,为研究bFGF基因转移在骨组织工程学中的应用提供研究基础.方法:(1)在不同的模板量、Mg2+浓度、退火温度下经PCR扩增bFGF基因...

            【关键词】 成纤维细胞生长因子,碱性基因表达遗传载体

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            【中文期刊】 王雪  桂淑玉  等 《安徽医科大学学报》 2002年37卷6期 419-422页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的构建人骨桥蛋白(hOPN)表达载体,体外表达及表达产物的纯化.方法培养人脐静脉内皮细胞,提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,以此cDNA为模板经PCR合成插入片段,连接至载体pGEX-6P-1,转化到XL1-blue中进行诱导表达....

            【关键词】 聚合酶链反应基因表达

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            【中文期刊】 魏来  陈红松  等 《病毒学报》 2002年18卷1期 29-33页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 构建含有感染性克隆HCV非结构基因5b区序列的酵母表达质粒,转化毕加酵母,获得持续、可溶性HCV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)的表达,纯化蛋白在SDS-PAGE及Western blot中显示出特异性的64.2kD HCV RdRp...

            【关键词】 丙型肝炎病毒RNA依赖的RNA聚合酶互补引物/模板

            浏览:224 被引:4 下载:4
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