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【中文期刊】 梁建宏 程湧 《中华眼科杂志》 2019年55卷4期 246-249页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 随着我国新生儿医学的发展,早产儿、低体重儿的存活率明显提高,早产儿视网膜病变(ROP)的发病率出现逐年上升的趋势.ROP严重时可导致失明,是我国目前儿童盲的首位原因,对家庭和社会造成沉重负担.近年来随着对ROP发病机制的深入了解,ROP治疗...
【中文期刊】 彭路芸 杨鑫 等 《中华血液学杂志》 2015年36卷5期 383-388页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立敲除RNA腺苷脱氨酶1(ADAR1)的小鼠MLL-AF9融合基因急性髓系白血病(AML)模型,初步探讨ADAR1对AML发病的影响.方法 采用免疫磁珠法富集介导雌激素受体-重组酶Cre(ER-Cre)的ADAR1lox/lox及其...
【中文期刊】 许静 任百光 等 《中国防痨杂志》 2015年37卷5期 478-486页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 为了改变结核分枝杆菌蛋白质的结构与功能研究由于受结核分枝杆菌蛋白难以可溶性表达和纯化的影响而进展缓慢的问题.方法 将多个能促进可溶性表达的蛋白标签与高通量的Gateway克隆技术相结合,构建结核分枝杆菌蛋白可溶性表达快速通量的筛选平台...
【中文期刊】 刘忠华 杨华 等 《中华检验医学杂志》 2012年35卷4期 345-348页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌CFP10、MPT48和TB8.4融合蛋白,评价其用于结核病血清学检测的价值.方法 选取2008年上海市肺科医院肺结核患者150例,非结核肺部疾病患者70例,健康体检者103名,采集血清标本共323份.构建结核分枝杆菌...
【中文期刊】 朱靖 周颖 等 《安徽医科大学学报》 2011年46卷5期 493-496页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白.方法 用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,...
【中文期刊】 徐小寅 严杰 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷5期 501-507页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含胰蛋白酶酶切位点的Alloferon-1抗生肽重复串联DNA片段及其原核表达系统,了解有赖氨酸尾重组Alloferon-1( rAlloferon-1)体外抗肿瘤活性.方法:根据Alloferon-1序列不合精氨酸和赖氨酸的特点...
【中文期刊】 李丹 周斌 等 《中华医学杂志》 2011年91卷47期 3363-3366页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和人转铁蛋白受体(TfR)双融合报告基因表达载体,并进行功能鉴定,为活体光学/磁共振双模式成像提供实验基础.方法 将TfR基因克隆到pEGFP-C1载体,构建重组pEGFP-C1 -TfR质粒.p...
【中文期刊】 孙文霞 谭云洪 等 《中国防痨杂志》 2010年32卷6期 306-309页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 重组表达结核分枝杆菌CFP10和ESAT 6的融合蛋白及卡介苗(BCG)CFP32,分析其抗原性.方法 用重组PCR从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA中扩增获得融合基因cfp10-esat6;从BCG基因组DNA中扩增cfp3...
【中文期刊】 周舟 丁元生 等 《中国防痨杂志》 2010年32卷4期 211-216页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,...
【中文期刊】 张光满 秦宜德 等 《安徽医科大学学报》 2010年45卷4期 567-569页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 建立大肠杆菌高密度表达的重组葡激酶-水蛭素融合蛋白(STH)分离纯化工艺.方法 高密度培养重组大肠杆菌并诱导表达STH,离心收集菌体,反复冻融后收集上清液经超滤、两步阴离子交换层析,分离纯化STH目的 蛋白.结果 纯化后的STH纯度为...
【关键词】 重组融合蛋白质类/分离和提纯； 色谱法,离子交换；
【中文期刊】 沈其 陈枢青 《浙江大学学报（医学版）》 2009年38卷3期 260-264页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测.方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用.结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%...
【关键词】 受体,白细胞介素1/拮抗剂和抑制剂； 血清白蛋白； 重组融合蛋白质类/分离和提纯；
【中文期刊】 李邦印 李大伟 等 《实用医学杂志》 2007年23卷11期 1605-1607页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:从结核分枝杆菌基因组克隆Rv3881c基因并重组入pET24b载体,在大肠杆菌中进行融合表达,重组蛋白经纯化后通过Western blot分析初步鉴定其抗原性和特异性.方法:提取H37Rv标准株的基因组DNA,以基因组DNA为模板PC...
【中文期刊】 吴正林 杨来智 等 《中华检验医学杂志》 2007年30卷5期 572-574页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用谷胱甘肽S转移酶(GST)融合基因表达系统表达、纯化及鉴定HEV pb166-GST融合蛋白,为研制戊型肝炎诊断抗原探索新的途径.方法 由本室制备的重组大肠杆菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)...
【中文期刊】 金蕾 张慧珍 等 《第二军医大学学报》 2007年28卷11期 1180-1183页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建FTL的原核表达载体,获得FTL纯化蛋白,制备抗体,为研究其生物学作用奠定基础.方法:采用基因重组技术将PCR扩增的FTL基因产物与原核表达载体pET30a(+)连接,转化入大肠杆菌BL21(DE3),通过PCR、单双酶切及测序鉴...
【中文期刊】 刘俊茹 郑朝旭 等 《中华肿瘤防治杂志》 2006年13卷15期 1143-1146页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:克隆可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble vascular endothelial growth factor receptor 1, sVEGFR1或sFLT-1)基因的第1～3个Ig样区域,并在原核表达系统中表达.方法:采...
【中文期刊】 李霞 张健 等 《解放军医学杂志》 2006年31卷2期 128-131页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建CblN/Grb2嵌合分子,表达和纯化GST-CblN/Grb2融合蛋白,并考察嵌合分子CblN/Grb2在体外是否具有泛素连接酶活性.方法提取SKBR-3细胞的总RNA并反转录为cDNA,作为模板用PCR扩增Grb2基因的SH2片...
【中文期刊】 游力 赵跃然 等 《山东大学学报（医学版）》 2005年43卷7期 570-573页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌的融合表达载体,制备MBP/Ag85B融合蛋白并将其纯化.方法:常规方法构建重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B,内切酶EcoR Ⅰ/HindⅢ酶切鉴定;重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B...
【中文期刊】 唐艳 李慧 等 《吉林大学学报（医学版）》 2005年31卷1期 21-24页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建蛋白质转导结构域8个精氨酸聚合体(8R)与MUC1核心肽融合蛋白的原核表达载体,并表达、纯化出具有生物学活性的8R-MUC1核心肽融合蛋白.方法:以PCR法从HSP65-MUC1-pET28a质粒中钓取MUC1核心肽2个重复序列片...
【中文期刊】 蒋卫民 卢洪洲 等 《中华传染病杂志》 2005年23卷3期 170-173页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的用基因重组技术将HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原线性中和表位的部分重组连接,构建重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达融合蛋白.方法设计带有酶切位点的引物,分别PCR扩增p24和gp41两个基因,将它们分别连接到pMD18-T...
【关键词】 HIV核心蛋白质p24； HIV包膜蛋白质gp41； 基因表达；
【中文期刊】 杜剑平 张青 等 《安徽医科大学学报》 2004年39卷2期 87-89页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的构建人CEA信号肽-EK激酶-HBD2抗菌肽融合基因.方法 PCR方法将CEA信号肽、EK激酶识别位点序列、上下游酶切位点及保护性碱基克隆在一个片段上,酶切后,T4 DNA连接酶将此片段定向连接在含HBD2基因片段的pBluescrip...
【关键词】 信号肽类； 重组融合蛋白质类/遗传学； 基因表达；
【中文期刊】 杨旭 袁鹏群 《第二军医大学学报》 2001年22卷9期 830-832页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:优化重组人单核细胞趋化蛋白-1(rhuMCP-1)在大肠杆菌DE3中的表达,生产rhuMCP-1.方法:应用NBS 15 L T.DR发酵罐,研究了诱导时不同的pH值、温度、搅拌速率、通气量和异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度对表达的...
【关键词】 单核细胞趋化蛋白-1； 重组融合蛋白质类； 大肠杆菌；
【中文期刊】 林筱洁 罗建红 等 《中国病理生理杂志》 2000年16卷1期 3-7页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:获得纯化抗原用于制备CYP2B6多克隆抗体.方法:PCR扩增目的基因片段,亚克隆入融合蛋白表达载体pGEX-3b,构建了重组质粒pGEX/2B6.然后将该重组质粒转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分离,获纯化融合...
【中文期刊】 田文 宋少柏 等 《解放军医学杂志》 2000年25卷3期 204-206页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 <篇首> IFN-αA是治疗乙型病毒性肝炎有效药物,但由于其临床应用的副作用及持久应答率不超过50%,限制了其疗效的发挥[1].作者通过DNA重组技术和PCR技术将抗乙型肝炎表面抗原抗体片段Fab与IFN-αA在分子水平上进行重组,构建了人抗乙...
【关键词】 重组融合蛋白质类； 免疫球蛋白类,Fab； 肝炎病毒,乙型；
【中文期刊】 胡梦雪 许斌 等 《国际肿瘤学杂志》 2019年46卷5期 281-284页 ISTICCA
【摘要】 随着程序性死亡蛋白-1(PD-1)及程序性死亡蛋白配体-l(PD-L1)抑制剂的发展,第二代联合免疫抑制剂应运而生.作为一种PD-L1/转化生长凶子-β(TGF-β)双功能融合蛋白,M7824可在拮抗PD-L1通路的同时捕获TGF-β,有效...
【中文期刊】 苏晨 史祥 等 《军事医学》 2018年42卷1期 34-37页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建YTH结构域m6A结合蛋白2(YTHDF2)重组表达载体,获得具有结合m6A修饰RNA活性的YTHDF2重组蛋白.方法 以 mRNA 为模板采用 RT-PCR 方法扩增 YTHDF2基因编码区序列,构建 pET-28a-YTHDF...
【中文期刊】 罗玲慧 段国平 等 《中国医师杂志》 2018年20卷5期 742-744页 ISTICCA
【摘要】 目的 对比观察康柏西普联合玻璃体切除术与单纯行玻璃体切除术对增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)患者的疗效及预后的影响.方法 选取2015年5月至2017年1月本院眼科确诊的增殖性糖尿病视网膜病变患者35例(35眼),采用随机数字表法将患者分为...
【关键词】 糖尿病视网膜病变/治疗； 重组融合蛋白质类/治疗应用； 玻璃体内注射；
【中文期刊】 黄源 《医学临床研究》 2017年34卷8期 1480-1482页 ISTICCA
【摘要】 [目的]探讨益赛普联合甲氨蝶呤治疗中重度活动性类风湿关节炎(RA)患者的疗效及安全性.[方法]84例中重度RA患者,随机分为试验组(益赛普+甲氨蝶呤)和对照组(激素+甲氨蝶呤),各42例;比较连续治疗24周后两组患者的临床疗效及不良反应.[...
【关键词】 受体,肿瘤坏死因子； 重组融合蛋白质类/治疗应用； 甲氨蝶呤/治疗应用；
【中文期刊】 杜延顺 李颖 等 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2015年11期 578-580页 ISTICCSCD
【摘要】 目的：表达并纯化融合蛋白GST-反式转录激活因子蛋白-增强型绿色荧光蛋白（GST-transactivator of transcription- enhanced green fluorescence protein，GST-TAT-EG...
【中文期刊】 朱大强 陈淑珍 《中国医药生物技术》 2014年2期 103-109页 ISTIC
【摘要】
目的对以包涵体形式表达的 TRAIL 和 EGFR 配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL 的制备过程进行优化。
方法对大肠杆菌原核表达 Ec-LDP-TRAIL 目的蛋白的温度、诱导物浓度、起始菌体密度及时...
【中文期刊】 蔡俊玮 黄成虎 等 《国际检验医学杂志》 2013年34卷19期 2500-2501,2504页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨骨骼肌局部肾素血管紧张素系统(RAS)在高糖状态的变化及对线粒体融合蛋白2(mfn2)基因表达的影响.方法 体外培养人骨骼肌细胞(HSkMC),分为不同浓度葡萄糖组进行培养:5.55 mmol/L组,11.1 mmol/L组,22...
【关键词】 肾素-血管紧张素系统； 胰岛素抗药性； 重组融合蛋白质类；
【中文期刊】 张砚君 李真真 等 《白血病·淋巴瘤》 2013年22卷3期 136-138页 ISTICCA
【摘要】 目的 研究白细胞介素-3-力达霉素(IL-3-LDM)融合蛋白靶向杀伤CD123+肿瘤细胞的作用机制.方法 用CCK-8检测IL-3-LDM融合蛋白靶向杀伤人类原巨核细胞白血病MO7e细胞的作用,用IC20浓度的IL-3-LDM及LDM分别...
【中文期刊】 陈书琴 陈玲玲 等 《重庆医学》 2012年41卷21期 2188-2189页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR-Fc)治疗幼年特发性关节炎(JIA)的临床疗效与安全性.方法 选取该院JIA患者18例,随机分为治疗组8例和对照组10例,治疗组采用rhTNFR-Fc治疗,对照组采用常规治疗...
【关键词】 重组融合蛋白质类； 受体,肿瘤坏死因子,Ⅱ型； 幼年特发性关节炎；
【中文期刊】 王丽非 朱元军 等 《中国医药生物技术》 2011年06卷1期 12-17页 ISTIC
【摘要】 目的 在大肠杆菌中高效表达组氨酸标签与人β干扰素融合蛋白,并进行蛋白纯化和生物活性测定.方法 提取人Bel-7402细胞总DNA为模板,经PCR获得人β干扰素编码基因片段.将此基因插入表达载体pET-16b,重组克隆,经酶切与测序确认后转化...
【中文期刊】 朱梦瑜 高星杰 等 《天津医药》 2011年39卷11期 990-992页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain (1～5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光...
【中文期刊】 蔺丽慧 崔玉宝 等 《国际检验医学杂志》 2010年31卷1期 1-3页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建人IgG Fcγ1片段Fcγ与粉尘螨Ⅱ类抗原Der f2嵌合基因真核表达载体pDisplay-Fcγ-Der f2,并转染入HEK293T细胞系瞬时表达,获得Fcγ-Der f2融合蛋白.方法 以pMD19-T-Der f2载体为...
【中文期刊】 张欢 蔡小波 等 《温州医学院学报》 2010年40卷4期 322-325页 ISTICCA
【摘要】 目的:在甲醇营养型毕赤酵母表达系统中分泌表达人表皮生长因子受体干扰基序和白细胞介素 -18(EGF-IL-18)融合蛋白.方法:PCR扩增EGF-IL-18基因,克隆到表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后用电转化导入毕赤酵母GS115,...
【中文期刊】 韦永芳 李冰 等 《中华生物医学工程杂志》 2009年15卷3期 184-188页 ISTICCA
【摘要】 并提高其纯度.GST-MT在短期内可增强实验兔体内抗氧化酶活性.
【中文期刊】 龙民慧 王园园 等 《军事医学科学院院刊》 2008年32卷6期 511-514,518页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:获得P11-A1融合蛋白并对融合蛋白的生物活性进行分析.方法:将人类栽脂蛋白A1和P11基因进行拼接.然后连接在表达载体pBV220上,将表达载体转化到大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析其表达情况.通过离子交换层析对融合蛋...
【中文期刊】 李保卫 胡云峰 等 《中国医药生物技术》 2007年2卷5期 346-350页 ISTIC
【摘要】 目的 构建可表达力达霉素(LDM)辅基蛋白基因与抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(scFv)融合蛋白的重组菌株,获得既具有靶向性、又具有抗肿瘤活性的scFV-LDM.方法 以大肠埃希菌-链霉菌穿梭质粒pBS03 为基础构建同源双交换质粒pBS-scFv...
【中文期刊】 王海珍 许予明 等 《第四军医大学学报》 2007年28卷10期 865-867页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建pET28a-TAT-EGFP重组子,观察表达的融合蛋白TAT-EGFP在细胞内的转导活性.方法:人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a后再连接EGFP基因,组成pET28a-TAT-EGFP重组表达子.转...
【中文期刊】 齐小强 姜蓉 等 《中国医药生物技术》 2007年2卷3期 183-188页 ISTIC
【摘要】 目的 通过基因工程途径获得胰高血糖素衍生物.方法 根据胰高血糖素基因及凝血酶酶切位点序列,分段合成引物行:PCR扩增,以PCR扩增得到的胰高血糖素-甘氨酸基因序列和pET-30a质粒转化E.coli DH5α,获得重组质粒pET-G.将重组...
【中文期刊】 韦娇 张海泉 等 《中国医药生物技术》 2007年2卷6期 428-434页 ISTIC
【摘要】 目的 探讨可溶性 HLA-G1(sHLA-G1)对人 NK-92细胞杀伤活性的抑制与细胞表面免疫球蛋白样转录分子2(ILT2)和杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4(KIR2DL4)受体的关系.方法 ①通过原核表达技术获得 sHLA-G1重组蛋...
【中文期刊】 罗卉 左晓霞 等 《中国医师杂志》 2007年9卷10期 1425-1426页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体C抗体融合蛋白(益赛普)治疗幼年型类风湿关节炎的临床疗效以及对血清肿瘤坏死因子α(TNFα)及白介素1β(IL-1β)的影响.方法 幼年型类风湿关节炎患者12例,女性11例,男性1例,使用益赛普治疗,12...
【关键词】 重组融合蛋白质类/药理学； 受体,肿瘤坏死因子,Ⅱ型； 关节炎,幼年型类风湿；
【中文期刊】 张家永 李和军 等 《福建医科大学学报》 2007年41卷2期 105-108页 ISTIC
【摘要】 目的 构建人CD40-IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)表达.方法 应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD40膜外段和IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体...
【中文期刊】 谢云青 郑天荣 等 《福建医科大学学报》 2006年40卷2期 111-113页 ISTIC
【摘要】 目的构建原核表达质粒pPROEXTMHTb-GM-CSF/IL-15并在大肠杆菌DH5α中表达,以期获得具有GM-CSF/IL-15双重活性的融合蛋白.方法利用分子生物工程技术,构建重组原核表达载体pPROEXTMHTb-GM-15,并转化...
【中文期刊】 邓颖 杨致邦 《国外医学（流行病学传染病学分册）》 2005年32卷6期 371-373页 ISTICCA
【摘要】 融合蛋白质是利用重组DNA技术将两个或两个以上不同基因的编码序列克隆在一起,表达出一个单一的多肽.这种新型的融合蛋白质在蛋白质工程中,特别是在疫苗的研究和开发上发挥了重要的作用.本文就融合蛋白质在微生物疫苗制备中的研究进展进行综述.
【中文期刊】 马楠 张英起 等 《第四军医大学学报》 2005年26卷14期 1279-1281页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建人肿瘤抑素(tumstatin)活性片段Tum-5的融合重组表达载体并对其进行诱导表达和蛋白纯化以获得大量重组融合蛋白.方法:人工合成Tum-5基因,进行测序分析,将该基因克隆入原核表达载体pQE-30中,转化感受态细胞DHSα,...
【关键词】 Tumstatin； Tum-5； 重组融合蛋白质类/分离和提纯；
【中文期刊】 李岩 黄勇 等 《第四军医大学学报》 2005年26卷10期 888-891页 ISTICCA
【摘要】 目的: 用基因工程手段去获取有活性的重组人血小板因子4(rhPF4),为下一步的基础理论研究和临床应用奠定基础.方法: 用PCR手段获得人PF4的编码序列,克隆入质粒pRSET,构建融合表达载体pRSET-PF4,转化大肠杆菌,以IPTG诱...
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