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【中文期刊】 谭丽 邹志鹏 等 《中华肿瘤防治杂志》 2007年14卷10期 724-727页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:通过RNA干扰技术客观地研究PLC-γ1与大肠癌细胞多种生物学行为的关系.制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制PLC-γ1的重组病毒,以建立PLC-γ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用.方法:制备产生PLC-γ1 siRNA分...
【关键词】 结直肠肿瘤/病理学； 抗体,单克隆/免疫学； RNA,小分子干扰/遗传学；
【中文期刊】 潘丽红 朱绍春 等 《安徽医科大学学报》 2007年42卷3期 262-264页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 为了寻找血吸虫病新的免疫学诊断候选分子,在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫Sj-Ts4样融合蛋白.方法 提取日本血吸虫成虫RNA,设计引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因编码序列,T载体连接,将其亚克隆入PGEX-...
【关键词】 血吸虫,日本/免疫学； 克隆,分子； 质粒/遗传学；
【中文期刊】 罗冬娇 胡野 等 《浙江大学学报（医学版）》 2007年36卷5期 458-464页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:改建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL21基因核苷酸序列以提高表达产量并了解基因改建前后表达产物免疫原性变化,确定外膜脂蛋白LipL21在钩体表面的定位.方法:参照大肠杆菌偏爱密码子设计,合成lipL21基因核苷酸序列并构建其原核表达...
【关键词】 钩端螺旋体,问号/免疫学； 钩端螺旋体,问号/遗传学； 克隆,分子；
【中文期刊】 罗冬娇 严杰 等 《浙江大学学报(医学版)》 2005年34卷1期 27-32页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/1融合基因及其原核表达系统,了解钩体野生株lipL32和lipL41基因携带和表达情况及钩体患者的血清抗体水平.方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/...
【中文期刊】 严杰 钊守凤 等 《浙江大学学报(医学版)》 2005年34卷1期 33-37,42页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)的融合基因lipL32/1-ompL1/1真核表达系统并鉴定表达产物的免疫反应性.方法:采用连接引物PCR构建融合基因lipL32/1-ompL1/1,克隆测序后构建lipL32/1-ompL1/1的毕赤...
【关键词】 钩端螺旋体,问号； lipL32/1基因； ompL1/1基因；
【中文期刊】 王媛 罗依惠 等 《浙江大学学报（医学版）》 2005年34卷3期 223-229页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)cagA基因片段的原核表达系统,建立ELISA检测CagA及其抗体,了解表达CagA的Hp菌株(CagA+Hp)感染与所致疾病种类的关系.方法:从快速尿素酶试验阳性的156...
【中文期刊】 阮萍 严杰 等 《浙江大学学报(医学版)》 2005年34卷1期 21-26页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建ltB/ctB-ompL1/1融合基因及其原核表达系统,鉴定表达产物的免疫和佐剂活性,检测问号钩端螺旋体(简称钩体)野生株ompL1基因的携带和表达情况及钩体患者血清特异性抗体水平.方法:采用连接引物PCR构建ltB-ompL1/...
【中文期刊】 李锴男 刘彦仿 等 《肿瘤防治杂志》 2004年11卷4期 337-340页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建抗肝癌单链抗体融合CD3ζ真核表达载体.方法 :应用PCR法将二硫键稳定的人源化的单链抗体scFv的基因克隆入真核细胞表达载体pcDNA3,在5′端及3′端分别引入相应酶切位点;用RT-PCR法从正常外周血人T细胞扩增出CD3ζ的...
【中文期刊】 庄春燕 陈莉丽 等 《浙江大学学报(医学版)》 2004年33卷1期 41-45页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)pgmA基因,构建pgmA基因表达载体,鉴定其表达产物的免疫性.方法:采用高保真PCR分别从牙龈卟啉菌ATCC 33277和47A-1菌株中扩增pgmA基因,...
【中文期刊】 夏肖萍 严杰 等 《浙江大学学报(医学版)》 2003年32卷1期 17-20页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)及霍乱弧菌肠毒素B亚单位(CTB)基因,构建其表达载体.方法:采用高保真PCR分别从E.coli 44815株与V.cholerae东74株基因组DNA中扩增LTB与CTB基因,T-A克隆后测...
【中文期刊】 毛亚飞 严杰 等 《浙江大学学报(医学版)》 2003年32卷1期 9-12页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)hpaA基因,构建hpaA基因表达载体,鉴定其表达的融合蛋白免疫性.方法:采用高保真PCR从幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中扩增hpaA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的hpaA表达载体,在E.c...
【中文期刊】 梁韶晖 毛亚飞 等 《浙江大学学报(医学版)》 2003年32卷1期 13-16页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)鞭毛素B基因(flaB),构建其原核表达系统,鉴定融合蛋白免疫性.方法:采用高保真PCR从幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中扩增flaB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的flaB表达载体,在E.co...
【关键词】 螺杆菌,幽门； flaB基因,碱基序列； 克隆,分子；
【中文期刊】 付慧 楚雍烈 等 《陕西医学杂志》 2007年36卷3期 259-261页 ISTICCA
【摘要】 目的:克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因,为进一步研究和应用该基因及其表达产物奠定基础.方法:采用基因重组技术完成实验.设计特异的引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增...
【中文期刊】 姜南艳 于文彬 等 《陕西医学杂志》 2007年36卷3期 272-273,299页 ISTICCA
【摘要】 目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1 A盒(HMGB1 A box)cDNA,并在大肠杆菌中表达GST-A盒融合蛋白.方法:从鼠肺提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1 A盒基因.将该基因插入pGEX-4T-2载体的BamHI和EcoRI位点...
【关键词】 HMGB1 A盒/免疫学； 大肠杆菌/免疫学； 聚合酶链反应；
【中文期刊】 付慧 楚雍烈 等 《陕西医学杂志》 2006年35卷11期 1405-1406页 ISTICCA
【摘要】 目的:研究HCV NS5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以NS5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试.方法:以含HCV1b全长cDNA的质粒HCV17为模板,...
【中文期刊】 王莉 郭爱林 等 《实用肿瘤杂志》 2005年20卷2期 140-143页 ISTICCA
【摘要】 目的克隆人睾丸肿瘤抗原MAGE-C2基因的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达与纯化,以便为研究其生物学功能及制备肿瘤疫苗奠定基础.方法从人胶质瘤细胞系BT-325中提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-C2的cDNA片段,将MAGE...
【中文期刊】 高玉录 马筱玲 等 《安徽医科大学学报》 2008年43卷5期 493-496页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建Panton-Valentine杀白细胞毒素(PVL) lukS-PV基因表达载体,并在大肠杆菌中表达相应蛋白.方法 提取PVL阳性金黄色葡萄球菌的基因,PCR方法扩增lukS-PV,A-T克隆至pGEM-T载体上,经PCR、双酶...
【关键词】 杀白细胞素类/遗传学； 基因表达； 克隆,分子；
【中文期刊】 杨家启 祁岩超 等 《中华肿瘤防治杂志》 2007年14卷14期 1054-1058页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨携带CEA重组基因痘苗病毒(CEA-rV)抗原的树突状细胞(DC)诱导的杀伤细胞(CIK)对CEA阳性原代肿瘤细胞的特异性杀伤作用.方法:用脐血制备脐血单个核细胞(UBMC)、DC、CIK、DC+CIK、CEA-rV+DC+CIK...
【中文期刊】 张文敏 张萌 等 《中华肿瘤防治杂志》 2006年13卷15期 1154-1157页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人肿瘤-睾丸抗原LAGE-1的原核表达质粒,表达、纯化LAGE-1融合蛋白并制备GST-LAGE-1多克隆抗体.方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人肝癌组织LAGE-1基因3′端片段,连入原核表达载体pGEX-4T-...
【关键词】 肝肿瘤/遗传学； 抗原,肿瘤/生物合成； 睾丸/免疫学；
【中文期刊】 尹洪云 肖和平 等 《中国防痨杂志》 2006年28卷6期 401-403页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 回顾性分析结核性胸膜炎时胸膜腔局部的免疫反应和炎症状态.方法 利用单克隆抗体、采用流式细胞仪测定35例结核性胸膜炎患者外周血和胸液中表面标记CD3、CD4、CD8、ICAM-1、2、3、VCAM-1的淋巴细胞、进行比较.结果 胸液中C...
【中文期刊】 刘淼 杨致邦 等 《安徽医科大学学报》 2005年40卷6期 495-498页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的采用基因工程技术获得具有良好免疫反应性的重组细胞空泡毒素的毒性亚单位蛋白.方法利用PCR技术从Hp基因组中扩增VacA基因毒性片段,插入原核表达载体pQE30上,测序后,转化表达宿主菌DH5α,SDS-PAGE分析表达情况,Wester...
【中文期刊】 赖娟 李小平 等 《北京大学学报(医学版)》 2002年34卷4期 358-361页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建和表达一种可与卵巢癌细胞和淋巴细胞结合的双特异抗体.方法:利用PCR分别扩增抗人CD3单链抗体(single chain variable fragment, ScFv)重链可变区(variable region of the h...
【关键词】 卵巢癌； 抗原CD3； 抗体,抗双特异/生物合成；
【中文期刊】 沈际佳 蒋作君 等 《安徽医科大学学报》 1998年33卷1期 4-5页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的为制备分泌抗日本血吸虫感染保护性单克隆抗体细胞株.方法应用杂交瘤技术,将照射致弱尾蚴免疫BALB/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤的细胞融合.结果经两次以上有限稀释克隆化后,抗日本血吸虫童虫表膜抗原阳性率为100%,建立了5株稳定分泌抗童虫表...
【关键词】 血吸虫,日本/免疫学； 抗体,单克隆/分离和提纯； 疫苗；
【中文期刊】 李敏杰 何杨 等 《中国误诊学杂志》 2007年7卷20期 4709-4711页 ISTICCA
【摘要】 目的:制备抗人胰腺癌单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定.方法:以人分化胰腺癌细胞株8988为抗原,免疫BALB/c小鼠,常规融合,运用ELISA方法筛选;流式细胞仪及免疫组化鉴定其组织特异性,West blot检测其特异性结合抗原的相对分子量...
【中文期刊】 吕凡 秦兆寅 等 《陕西医学杂志》 2004年33卷12期 1073-1075,1079页 ISTICCA
【摘要】 目的:克隆并构建小鼠Flk1胞外1-3区核酸疫苗,并检验疫苗引起特异性免疫反应的能力.方法:RT-PCR克隆Flk1胞外1-3区,构建核酸疫苗pcDNA3.1(+)-Flk1Domain1-3,脂质体转染COS7细胞,western-bol...
【中文期刊】 储大同 赵龙妹 等 《实用肿瘤杂志》 2002年17卷2期 84-87页 ISTICCA
【摘要】 <篇首> 1 概述一个世纪以前,美国学者Coley观察到病人在急性感染后肿瘤自发消退的现象.其后,企图利用各种细菌提取物和BCG的尝试几十年来均未得到实质性进展.肿瘤的主要治疗手段仍然是手术、放疗和(或)化疗.随着对免疫学和分子生物学的深入认识...
【关键词】 生物反应调节剂/副作用； 抗体,单克隆； 干扰素；
【中文期刊】 邱小萍 伍欣星 等 《武汉大学学报(医学版)》 2001年22卷2期 101-103页 ISTICCABP
【摘要】 目的：研究人乳头瘤病毒16型E7(HPV16 E7)基因蛋白的生物学和免疫学活性。方法：用聚合酶链反应(PCR)技术扩增并分离出HPV16 E7 359 bp的基因片段，经XhoⅠ和BglⅡ双酶切后，定向插入到表达质粒PJ120的晚期启动子...
【关键词】 乳头状瘤病毒,人/致病力； 病毒蛋白类/分析； 聚合酶链反应；
【中文期刊】 游晶 庄林 等 《世界华人消化杂志》 1999年7卷12期 1083页 ISTICCA
【摘要】 <篇首> 我国是病毒性肝炎高发区,随着病毒性肝炎病原学研究的进展及分子克隆技术的应用,各种肝炎病毒的检测方法相继建立.为了解昆明市小儿戊型病毒性肝炎的血清病原学特征,对我院收治的104例小儿戊型病毒性肝炎病例进行血清学研究,现将结果报告如下.
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