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【中文期刊】 孙强正 李振军 等 《中华流行病学杂志》 2009年30卷12期 1288-1291页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)食品级分泌性表达系统L.lactis MBP71/pSQZ和L.lactis MBP71/pSQ中克隆表达霍乱毒素B亚单位(CTB),实现CTB的分泌性表达.方法 采用PCR扩增霍乱...
- 概要：
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【中文期刊】 余果宇 张红芸 等 《动物学研究》 2010年31卷6期 565-569页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性.该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOXl启动了和α-因子信号肽序列的表达载体pP...
- 概要：
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【中文期刊】 黄芬 安小平 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷9期 8-13页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中过表达热休克蛋白70以提高其表达抗体的能力.首先从中国仓鼠基因组DNA中扩取HSP70基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1-HSP70,再将重组质粒稳定转染到CHO/dhfr-细胞中,筛选获得稳定的细胞系...
- 概要：
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【中文期刊】 王晓霞 赵玫 等 《中国肿瘤》 2010年19卷7期 477-482页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]探讨骨唾液酸蛋白(BSP)与人乳腺癌细胞黏附性的相关性.[方法]构建pCDNA3.1-myc-hisA(+)-BSP真核表达载体,在COS7细胞中表达并纯化BSP全长蛋白.以纤黏连蛋白、胶原和重组BSP蛋白包被96酶标板,细胞黏附实...
- 概要：
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【中文期刊】 王珍祥 陶熹 等 《中华烧伤杂志》 2009年25卷2期 126-128页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 验证分泌性卷曲相关蛋白2(SFRP2)与骨母细胞特异性因子2(OSF-2)的相互作用.方法 构建能在哺乳动物细胞中表达带人膜联蛋白(HA)标签的OSF-2融合蛋白重组载体pCMV-HA-OSF-2,经酶切鉴定确认后,与Myc-SFRP...
【关键词】 瘢痕疙瘩；载体蛋白质类；蛋白质相互作用域和基序；
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【中文期刊】 赵战勤 徐引弟 等 《生物工程学报》 2009年25卷1期 29-36页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了评价猪霍乱沙门氏菌ΔasdC500株作为沙门氏菌Asd+平衡表达系统的可行性,对ΔasdC500株和其亲本菌株C500的生物表型,生长特性、毒力、生物安全性、表达特性等进行比较研究.结果表明:AasdC500缺失株的生化特性和血清型与亲...
【关键词】 沙门氏茵；活疫苗载体；Asd+平衡表达系统；
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【中文期刊】 王微 李秀锦 等 《微生物学报》 2009年49卷5期 648-652页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]利用真核细胞分泌表达犬细小病毒VP2蛋白和研究其特性.[方法]为构建犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)VP2基因的真核分泌型表达载体,首先通过酶切从含有人CD5信号肽序列的质粒中将CD5信号肽基因片段切出,将其连...
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【中文期刊】 徐学武 裴树俊 等 《第二军医大学学报》 2009年30卷4期 378-382页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:考察人源神经生长因子信号肽序列是否具有介导β-内啡肽分泌性表达的作用,以及人源与鼠源神经生长因子信号肽的作用效率是否存在差异.方法:构建2个分别利用人或鼠的信号序列介导β-内啡肽分泌表达的真核表达载体pcDNA3.1-hEP和 pcD...
- 概要：
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【中文期刊】 王炜煜 易继林 等 《中华检验医学杂志》 2006年29卷4期 335-338页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的评价捕获噬菌体酶免疫吸附试验法(ELISA)在筛选抗去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)单链抗体(scFv)中的价值.方法以含ASGPR基因的质粒(CRDH1/pET3b)为模板,通过聚合酶链反应扩增获得ASGPR H1亚单位糖识别区基因(...
- 概要：
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【中文期刊】 胡萍 季煜华 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2006年26卷11期 1009-1012页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建分泌型PD-L1真核表达载体,并对其生物学活性进行初步研究.方法 以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)配体PD-L1的胞外段基因片段,定向连接于pcDNA3.1上构...
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【中文期刊】 谈春荣 徐国宾 等 《中华检验医学杂志》 2006年29卷8期 736-739页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 获得可溶、稳定、高纯度的α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG),为临床检测标准品、质控品制备奠定基础.方法 制备构建重组人毕赤酵母真核分泌表达质粒,并对重组α1-MG进行诱导表达、纯化和鉴定.应用PCR方法扩增...
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【中文期刊】 曹利民 司进 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2005年25卷9期 756-761页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H1亚单位的重组、表达、纯化及其单链抗体的筛选与鉴定.方法将ASGPR H1亚单位糖识别区基因(CRDH1)定向克隆至原核表达载体pET-32c经IPTG诱导表达,表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,免疫印...
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【中文期刊】 李子健 金宁一 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2003年23卷5期 371-374页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的实现HIV-2ROD gp105-gag截短体重组蛋白tgp105-gag的高效分泌表达,对其表达条件进行研究. 方法用PCR方法获得HIV-2ROD tgp105截短基因,将其与HIV-2ROD gag构建HIV-2ROD tgp10...
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【中文期刊】 彭天庆 杨英珍 等 《病毒学报》 1999年15卷4期 323-329页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将编码柯萨奇B3病毒(CVB3)衣壳蛋白VP1和VP2的基因,分别克隆到具有7.5k启动子的痘苗病毒表达载体pGJP5上;将CVB3衣壳蛋白全基因克隆到具有T7启动子的痘苗表达载体pTM1上,并筛选到相应的重组痘苗病毒VVP1、VVP2和V...
【关键词】 柯萨奇B3病毒(CVB3)；衣壳蛋白；重组痘苗病毒；
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【中文期刊】 李向茸 李倩 等 《中国生物制品学杂志》 2019年32卷6期 629-633页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 构建脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)GS01株衣壳蛋白VP1的真核表达载体,并利用酵母真核表达系统获得具有抗原性的分泌性VP1成熟多肽.方法 扩增EMCV GS01株VP1基因,与酵母表达...
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【中文期刊】 王弘珺 李质馨 等 《中国妇幼保健》 2010年25卷29期 4282-4283页ISTICCA
【摘要】 目的:构建人透明带蛋白3的186位氨基酸突变体重组质粒并鉴定.方法:通过PCR点突变改造人透明带蛋白3的Kex2位点,构建pPICZα-hZP3186S突变载体.结果:经DNA测序表明,ZP3基因的556～558 bp处碱基由AGG突变为T...
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【中文期刊】 赵志强 方悦群 等 《微生物学免疫学进展》 2006年34卷1期 22-26页ISTICCA
【摘要】 利用PCR技术从铜绿假单胞菌PA103株DNA中扩增到铜绿假单胞菌外毒素A(EPA)全基因,选择合适位点插入pBV221 PLPR启动子下游,构建分泌性表达载体;转化宿主E.coli DH5α、JM109后,热诱导表达;SDS-PAGE分析...
【关键词】 铜绿假单胞菌外毒素A；分泌性表达；Vero细胞毒性；
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【中文期刊】 夏术阶 刘海涛 等 《中华实验外科杂志》 2005年22卷4期 467-468页ISTICCA
【摘要】 目的构建分泌性表达肿瘤坏死因子(TNF)-α的重组卡介苗.方法分别以卡介苗(BCG)和TNF-α cDNA为模板,通过PCR扩增得到117bp的BCG-Ag85B信号肽序列和702 bp的TNF-α基因序列.将BCG-Ag85B信号肽序列插...
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【中文期刊】 姚李四 王涛 等 《中华实验和临床病毒学杂志》 2003年17卷3期 240-243页MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的运用噬菌体表面表达技术,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG.方法从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA,逆转录cDNA,聚合酶链反应扩增人IgG Fab轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库...
【关键词】 依赖病毒；免疫球蛋白类,Fab；RNA噬菌体；
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【中文期刊】 朱斌 杨甲梅 等 《中华实验外科杂志》 2003年20卷1期 46-48页ISTICCA
【摘要】 目的为进行基因转移阻断T细胞共刺激通路诱导移植免疫耐受的研究,构建携带融合基因CTLA4-Ig的重组腺病毒载体.方法构建含人CTLA4-Ig的重组腺病毒载体质粒pShuttle-Tracker-CMV-CTLA4-Ig,与腺病毒骨架质粒pA...
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【中文期刊】 李启明 沈心亮 等 《微生物学免疫学进展》 2002年30卷3期 6-10页ISTICCA
【摘要】 通过聚合酶链式反应(PCR)技术,以戊肝病毒cDNA为模板将开读框架3的基因片段扩增并克隆入载体pUC18中.再对扩增片段进行酶切鉴定及测序,结果表明此片段与膜板序列的同源性达到99%以上.将此片段克隆后通过一系列分子生物学技术装入真核胞内...
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【中文期刊】 杨贵宾 韩峰 等 《中华实验和临床病毒学杂志》 2001年15卷2期 182-185页MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的获得基因工程抗流感病毒抗体，为检测其粘膜用药在动物模型中的抗病毒效果奠定基础。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞，提取总RNA，Oligo\|Dt逆转录Cdna，聚合酶链反应扩增人IgG轻、重链基因，利用pComb3载...
【关键词】 正粘病毒科；免疫球蛋白类,Fab；抗体,单克隆；
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【中文期刊】 张用书 赵志虎 等 《生物技术通讯》 1999年10卷4期 305页ISTICCA
【摘要】 <篇首> 外源基因在原核细胞中的表达,是基因工程和分子生物学许多研究领域中应用最为广泛的技术,大肠杆菌已成为蛋白质表达的首选宿主和生产基因工程多肽药物的主要表达系统.发展通用的高表达、可溶性以及分泌性表达策略,是目前该领域研究中的重点发展方向....
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【中文期刊】 薛庆节 陈延 《国际生物制品学杂志》 2010年33卷5期 230-234页CA
【摘要】 目的 构建能分泌性表达EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)融合基因Z2A的BCG重组质粒并导入BCG.方法 分别以BCG和EBV融合基因cDNA为模板,通过PCR扩增得到139 bp的BCG-Ag85B信号肽序列和229...
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