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          【中文期刊】 王龙兴  贾红华  等 《生物加工过程》 2021年19卷5期 505-513页ISTICCABP

          【摘要】 卤醇脱卤酶(halohydrin dehalogenases,HHDHs)是微生物代谢卤代醇的重要酶类,它既能催化邻卤代醇脱卤成环又能催化逆反应环氧化物开环.近年来,通过基于数据库的基因挖掘,HHDHs酶家族扩增至70多种,亚类也由A类发展...

          【关键词】 环氧化物稳定性

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          【中文期刊】 徐秦  田嘉伟  等 《合成化学》 2020年28卷9期 786-790页

          【摘要】 以2-异丙基环氧乙烷为底物,氰酸钠为亲核试剂,筛选获得两种卤醇脱卤酶HheA10和HheG,分别催化合成了(S)-5-异丙基-2-噁唑烷酮和(R)-5-异丙基-2-噁唑烷酮.结构经1 H NMR和13 C NMR表征,通过对其反应条件进一步...

          【关键词】 生物催化立体选择性

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          【中文期刊】 童琦  吴少玉  等 《化学与生物工程》 2019年36卷12期 33-37,55页

          【摘要】 以新型卤醇脱卤酶Ab HHDH为催化剂,催化拆分外消旋2-溴-1-苯基乙醇生成光学纯的(S)-2-溴-1-苯基乙醇,通过单因素实验探究了缓冲液pH值、缓冲液浓度、催化剂用量、底物浓度以及温度对催化合成反应的影响.结果表明,在NaH 2 PO...

          【关键词】 2-溴-1-苯基乙生物催化

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          【中文期刊】 聂洪丽  汤丽霞  等 《生物技术通讯》 2010年21卷6期 846-850,886页ISTICCA

          【摘要】 目的:宏基因组技术作为一种不依赖于微生物纯培养的新方法,在挖掘新基因方面具有极大的潜力.本研究旨在建立一种从土壤中高效获取卤醇脱卤酶新基因的策略.方法:通过对现有DNA提取方法进行改进,同时结合富集培养途径以提高土壤宏基因组DNA质量和特异...

          【关键词】 土壤宏基因组DNA富集培养

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          【中文期刊】 郑楷  汤丽霞  《生物技术通讯》 2010年21卷1期 121-125页ISTICCA

          【摘要】 卤醇脱卤酶是细菌降解环境中重要污染物有机卤化物的关键酶之一,具有与其他已知脱卤酶不同的脱卤机制.它是一类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物的脱卤酶,可以高效催化有机邻卤醇进行脱卤反应,在治理环境污染方面具有十分重要作用.此外,在...

          【关键词】 有机化物生物降解途径

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          【中文期刊】 张晓健  郑裕国  《生物产业技术》 2017年6期 65-72页

          【摘要】 手性环氧氯丙烷是一种重要的三碳手性合成子,在医药、农药、化工、材料等领域有着广泛的应用.开发以甘油替代石油基原料合成手性环氧氯丙烷的绿色合成工艺具有重要的开发价值.生物催化技术可有效提高过程安全性与原子经济性,降低"三废"排放,提升产品质量...

          【关键词】 甘油手性环氧氯丙烷1,3-二氯-2-丙

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          【中文期刊】 冯峰  胡蝶  等 《食品与生物技术学报》 2015年34卷5期 494-500页

          【摘要】 卤代醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等高价值手性药物中间体.作者所在实验室利用宏基因组技术从无锡新区工业集中地污染土壤中筛选了一段编码基因y,经测序知其片段包含有765 bp的核苷酸,编码254个氨基酸.经Blast软件...

          【关键词】 宏基因组技术序列分析

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          【中文期刊】 潘冬瑞  李啸  等 《天津农业科学》 2013年19卷8期 5-9页

          【摘要】 主要研究Zn2+对基因工程大肠杆菌发酵生产卤醇脱卤酶的影响.以卤醇脱卤酶活力为响应值,通过单因素试验筛选出显著影响因子Zn2+,并确定其最优浓度为0.000 7 g·L-1;在50 L罐中进行分批发酵试验,比较分析卤醇脱卤酶活力、OD600...

          【关键词】 锌离子大肠杆菌

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          【中文期刊】 潘冬瑞  李啸  等 《天津农业科学》 2013年19卷7期 6-9页

          【摘要】 用基因工程大肠杆菌E.coliP84A/MC1061生产卤醇脱卤酶,此后,进一步进行了酵母浸出物FM888与酵母蛋白胨FP101的联合调控作用研究.结果表明,用高溶解度酵母浸出物FM888替代原配方中的牛骨蛋白胨,可使E.coliP84A/...

          【关键词】 发酵控制酵母浸出物

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          【中文期刊】 李建华  李啸  等 《中国酿造》 2012年31卷3期 127-131页

          【摘要】 在以基因工程大肠杆菌为生产菌发酵生产卤醇脱卤酶过程中,某些金属离子对卤醇脱卤的生产有较大的影响.首先,通过单因子实验确定几种典型微量元素的最佳产酶浓度,其次,通过2水平析因实验和最陡爬坡实验确定了显著影响因子及其浓度拐点,其分别是ZnSO4...

          【关键词】 大肠杆菌金属离子

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          【中文期刊】 李建华  李啸  等 《中国酿造》 2012年31卷2期 128-131页

          【摘要】 考察重组工程菌E.coli P84A/MC1061的生长特性,并优化其在卤醇脱卤酶表达过程中的诱导条件和培养条件.在摇瓶发酵中,以阿拉伯糖诱导重组大肠杆菌P84A/MC1061表达卤醇脱卤酶.重点研究培养温度、装液量、摇床转速、培养基初始p...

          【关键词】 大肠杆菌发酵条件

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          【中文期刊】 李阳  汤丽霞  等 《化工学报》 2010年61卷12期 3213-3219页

          【摘要】 卤醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等一类高价值手性药物中间体.卤醇脱卤酶的高效重组表达及纯化可以更好地促进该酶的应用.通过PCR扩增,将编码卤醇脱卤酶的基因克隆至pBAD表达载体叶,经测序鉴定后,将其转入大肠杆菌TOP1...

          【关键词】 高效表达T7表达体系

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          【中文期刊】 曹京雯  郑国钧  《化学与生物工程》 2010年27卷9期 61-65页

          【摘要】 以氯乙酸作为唯一碳源,从土壤样本中筛选获得了高产脱卤酶菌株17#,具有将β-溴对硝基苯乙醇转化为对硝基环氧苯乙烯的活性,优化了发酵培养基和转化条件.确定最适培养基组成(g·L-1)为:乳糖8,胰蛋白6,氯乙酸4,Na2HPO4 3.2,KH...

          【关键词】 β-溴对硝基苯乙对硝基环氧苯乙烯

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          【中文期刊】 聂洪丽  汤丽霞  《生物产业技术》 2009年z1期 158-161页

          【摘要】 环境中的多数有机卤化物具有高毒性和低可降解性,卤醇脱卤酶可以催化邻卤醇进行分子内亲和取代生成相应的环氧化物,在消除有机卤化物的污染方面具有十分重要的作用.此外,在催化环氧化物和邻卤醇之间的转化反应中卤醇脱卤酶具有很高的立体选择性,因而在手性...

          【关键词】 有机化物宏基因组

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          【中文期刊】 郑楷  汤丽霞  《化工学报》 2008年59卷12期 2971-2977页

          【摘要】 光学纯的环氧化物及β-取代醇是一类高价值中间体,在手性药物及精细化工合成领域具有十分重要的应用前景.卤醇脱卤酶是一类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物的脱卤酶,可以高效高选择地催化环氧化物和邻卤醇之间的转化,因而可以用来合成具有...

          【关键词】 生物催化亲核试剂

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          【中文期刊】 徐纹静  陈志  等 《生物工程学报》 2021年37卷4期 1298-1311页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 作为一类多功能生物催化剂,卤醇脱卤酶在手性β-取代醇和环氧化合物合成应用方面备受关注.目前催化功能较为清楚的卤醇脱卤酶不足40种,且绝大部分催化性能并不能满足科学研究和实际应用的要求,因此挖掘并鉴定更多的卤醇脱卤酶具有重要意义.本文克隆表达...

          【关键词】 β-取代1,3-二氯-2-丙

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          【中文期刊】 王雷  袁京  等 《生物工程学报》 2015年31卷5期 659-669页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 卤醇脱卤酶(Halohydrin dehalogenase)不仅对于含氯污染物的生物降解、净化环境具有重要意义,而且在手性医药中间体合成中也是一种重要的生物催化剂,但其数量较少.采用基因挖掘在基因组数据库中获得一种来自运动替斯崔纳菌Tist...

          【关键词】 运动替斯崔纳菌(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯

          OA
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          【学位论文】 作者:周颖 导师:戚穗坚   冼艳萍   华南理工大学   药学 生物与医药(硕士) 2024年

          【摘要】 1, 3-二氯-2-丙醇(1, 3-DCP,1, 3-dichloro-2-propanol)是食品在加工、烹饪和贮藏过程中发生反应而形成,是最常见食品氯丙醇类污染物之一,毒性较大危害性强。常用处理1, 3-二氯-2-丙醇的方法包括物理吸附...

          【关键词】 环氧化物水解

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          【学位论文】 作者:沃鹏 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物学(硕士) 2024年

          【摘要】 卤醇脱卤酶是一种用于降解邻卤代醇的生物酶。其中来自放射农杆菌AD1的卤醇脱卤酶HheC因其独特的底物对映体选择性和优秀的催化特性,是当前研究较为深入的卤醇脱卤酶。然而,HheC的工业应用性能仍需要进一步研究。由于目前对该酶行使催化功能,尤其...

          【关键词】 分子动力学模拟

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          【学位论文】 作者:张敏 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物学(硕士) 2022年

          【摘要】 卤醇脱卤酶(HHDHs)可以高效催化邻卤醇分子内亲核取代脱卤反应形成相应的环氧化物,也可在亲核试剂作用下催化环氧化物开环反应。因此,该酶在制备光学纯β-取代醇等一系列手性药物中间体以及有机卤代污染物治理等方面都有着不可替代的作用。
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          【关键词】 饱和突变

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          【学位论文】 作者:吴菁斐 导师:陈永正   遵义医科大学   药学 药物化学(硕士) 2020年

          【摘要】 目的:本次实验以苯乙烯单加氧酶和卤醇脱卤酶为催化剂,构建生物级联催化反应体系。以廉价苯乙烯类化合物为底物,叠氮化钠为亲核试剂,通过生物级联催化反应实现烯烃的不对称叠氮羟基化,合成一系列具有较高立体选择性的β-叠氮醇化合物。
            方法:...

          【关键词】 生物级联催化反应苯乙烯不对称叠氮羟基化

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          【学位论文】 作者:赵智鹏 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2019年

          【摘要】 卤醇脱卤酶(HHDHs)通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇水解转化为环氧化物,也可以接受不同的亲核试剂如CN-、N3-、NO2-等催化环氧化物的开环反应,在处理有机卤化物污染物和合成手性药物中间体方面有着极高的研究价值。其中卤醇脱卤酶HheC...

          【关键词】 HheC催化过程

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          【学位论文】 作者:潘彦园 导师:高辉   电子科技大学   计算机科学与技术 计算机技术(硕士) 2019年

          【摘要】 卤醇脱卤酶是一类重要的蛋白质,它不仅能通过开环反应催化有毒污染物的降解,还能作为亲核试剂促进高价值药物中间体的生成。卤醇脱卤酶在自然界中的分布极为稀少,目前仅在少数菌株中发现过卤醇脱卤酶酶活性的表达。已有的生成卤醇脱卤酶的生物实验虽然可行,...

          【关键词】 数据挖掘

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          【学位论文】 作者:堵瑄 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2019年

          【摘要】 卤醇脱卤酶不仅能够降解环境中存在的有机卤化物,还能合成具有手性的环氧化物和β-取代醇,其催化机理和广泛的应用前景近年来备受关注。卤醇脱卤酶的动态结构变化与其生物功能紧密相连,是卤醇脱卤酶发挥功能的重要结构基础,对其结构动力学的研究有助于揭示...

          【关键词】 荧光探针

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          【学位论文】 作者:田嘉伟 导师:陈永正   遵义医科大学   药学 药物化学(硕士) 2019年

          【摘要】 目的:通过卤醇脱卤酶的筛选、生物转化条件优化和底物拓展,建立卤醇脱卤酶催化环氧化物合成手性噁唑烷酮的生物催化路线.
            方法:
            (1)以实验室保藏的卤醇脱卤酶基因工程菌为酶库,分别以环氧苯乙烷(芳香族环氧化物)和1,2-环氧...

          【关键词】 生物催化

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          【学位论文】 作者:仝亚沛 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2018年

          【摘要】 卤醇脱卤酶又称卤代醇脱卤素酶(HHDHs),催化邻卤醇的碳-卤键裂解进而生成相应的环氧化物。它们也可以在亲核试剂如氰化物,叠氮化物和亚硝酸根离子存在的情况下催化其逆反应,生成β-取代醇。HHDHs已被公认为降解环境污染物有机卤化物的理想工具...

          【关键词】 氨基酸

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          【学位论文】 作者:王露 导师:吴坚平   浙江大学   化学工程与技术 生物化工(硕士) 2018年

          【摘要】 (3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题...

          【关键词】 分子改造

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          【学位论文】 作者:邓文凤 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2017年

          【摘要】 1,2,3-三氯丙烷(TCP)作为表氯醇工业生产中的主要副产物,已经成为一种持久性的地下水污染物,对人体具有潜在致癌性,急需建立一种廉价高效的技术将TCP从污染源中清除。相比传统的手段,生物降解环境污染物的方法更加环保高效,同时也能节约成本...

          【关键词】 手性

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          【学位论文】 作者:武志赟 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2015年

          【摘要】 卤醇脱卤酶可以通过分子内亲核取代机制来催化邻卤醇和环氧化物之间的相互转化,而且它的催化反应是非常高效高选择性的。正因为具有这些特点,使得卤醇脱卤酶可以广泛应用在手性药物及精细化工合成领域中,用来合成具有光学纯的高价值化学中间体。然而,由于工...

          【关键词】 定向进化

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          【学位论文】 作者:郑华钰 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2015年

          【摘要】 卤醇脱卤酶能够催化邻卤醇脱卤,将环境中的有机卤化物转化为工业中有价值的环氧化物。并且也可催化其逆反应,亲核试剂介导的环氧化物开环反应。HheC的活性中心由四个柔性Loop区域组成,其中P175-P188的Loop3区域为卤离子结合位点(Lo...

          【关键词】 丙氨酸扫描

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          【学位论文】 作者:王雄 导师:杨足君   电子科技大学   生物医学工程 生物医学工程(博士) 2015年

          【摘要】 卤醇脱卤酶,是一类存在于微生物降解有机卤化合物代谢途径中的关键酶之一,它不仅可以通过分子内亲核取代机制,催化邻卤醇转化生成环氧化物和卤化氢,还能在一系列亲核试剂N3-、CN-和NO2-等介导下,高效高选择地催化其逆反应-环氧化物的开环反应,...

          【关键词】 碳末端

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          【会议论文】王雷 中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会 2014年

          【摘要】 作为新一代的他汀类药物,瑞舒伐他汀在药效和安全性方面均达到令人满意的效果,并已被批准用于血脂异常症、高胆固醇血症以及高甘油三酯血症的治疗中.光学纯的(R)-3-羟基戊二酸乙酯是合成瑞舒伐他汀手性侧链的重要前体.生物催化的高效、绿色等特点,使...

          【关键词】 生物制药(R)-3-羟基戊二酸乙酯

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          【学位论文】 作者:潘冬瑞 导师:李啸   三峡大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2014年

          【摘要】 本文主要针对锌离子在基因工程大肠杆菌表达卤醇脱卤酶过程中的重要影响进行了系统研究。
            首先,通过摇瓶实验显著筛选出影响卤醇脱卤酶表达的金属离子——Zn2+,并确定其最优浓度为0.7mg/L;
            其次,在50L罐中进行了上述摇...

          【关键词】 锌离子

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          【学位论文】 作者:郭超 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2014年

          【摘要】 卤醇脱卤酶可以催化环境污染物中邻卤醇的碳-卤键断裂生成光学纯的环氧化物,并且卤醇脱卤酶HheC对芳香族邻卤醇具有较高的对映体选择性,也能接受不同的亲核试剂进行环氧化物开环反应形成高价值光学纯的β-取代醇。因此,卤醇脱卤酶既可以降解环境的含卤...

          【关键词】 HheC半理性设计

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          【学位论文】 作者:孙恒飞 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2014年

          【摘要】 工业酶在工业生产中扮演着重要角色。卤醇脱卤酶HheC是一种从农杆菌Agrobacterium radiobacter AD1中提取的新型工业酶,已有的研究表明该酶具有巨大的工业和医药学应用前景,它既可以催化有毒害的有机卤化物如1,3-二氯-...

          【关键词】 HheC固定化

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          【学位论文】 作者:刘羽 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2013年

          【摘要】 卤醇脱卤酶可催化邻卤醇脱卤,生成相应的环氧化物及卤离子、氢离子,在自然界中参与许多环境污染物的生物降解。分说析序列与三级结构发现,卤醇脱卤酶与短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族蛋白质具有一定相似性。根据序列相似度,目前已知的六种卤醇脱卤酶分为...

          【关键词】 C分子定向进化

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          【会议论文】李啸 纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会 2012年

          【摘要】 本研究中用基因工程大肠杆菌E.coli P84A/MC1061生产卤醇脱卤酶,在发酵过程中通过高溶解度酵母浸出物FM888与酵母蛋白胨FP101的联合调控作用,使菌体浓度保持在较高水平(0D600≥120),酶活提高约50%,大大提高了单罐...

          【关键词】 发酵工艺大肠杆菌

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          【学位论文】 作者:朱学琛 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2012年

          【摘要】 卤醇脱卤酶可以催化邻卤醇脱卤及非自然亲和试剂介导的环氧化物 Cβ开环反应,因此可用于降解环境污染物和合成手性β-取代醇,具有很高的工业应用前景。尽管野生型HheC对短链底物具有很高的催化活性的对R型底物的立体偏好性,对其改造得到的优秀突变体...

          【关键词】 立体选择性

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          【学位论文】 作者:江荣香 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2012年

          【摘要】 在目前已知序列的六种卤醇脱卤酶中,根据它们的氨基酸序列相似性把它们分为A,B和C三种。其中来源于放射性土壤杆菌的卤醇脱卤酶HheC已被深入研究,而对于A类和B类的了解甚少。鉴于HheA和HheC底物特异性和立体选择性上的不同,对HheA的改...

          【关键词】 定向进化

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          【会议论文】李啸 中国微生物学会第十三届微生物学教学和科研及成果产业化研讨会 2011年

          【摘要】 本研究中用基因工程大肠杆菌E.coliP84~MC1061生产卤醇脱卤酶,通过用试剂级酵母浸出物FM818替代原配方中的蛋白胨,使E.coliP84~MC1061生长速率增大,菌体浓度保持在较高水平,最大酶活由75680U/ml增加到180...

          【关键词】 大肠杆菌酵母浸出物

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          【学位论文】 作者:聂洪丽 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2011年

          【摘要】 卤醇脱卤酶不仅可以催化污染环境的有机卤化物的分解,从而降低其污染性,而且可以催化合成许多药物的中间体,在手性药物合成方面有广阔的应用前景,不过目前数据库中只有6种此类酶,为更好的利用这种酶,一方面可以运用突变等手段在催化活性、稳定性等方面改...

          【关键词】 定点突变

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          【会议论文】聂洪丽 2009年生物产业技术研讨会 2009年

          【摘要】 本文介绍了卤醇脱卤酶的特性,对比了两种利用宏基因组学筛选卤醇脱卤酶方法的优势,为环境中有机卤化物的降解提供依据.

          【关键词】 有机化物降解机制

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          【成果】 1100240442 湖北 TQ460.31 应用技术 调味品、发酵制品制造 2010年

          【成果简介】 1、简要技术说明:卤醇脱卤酶(halohydrindehalogenase)是一类从细菌中分离出来的具有催化活性的水解酶。该类酶能够可逆性作用于邻羟基卤化物(邻卤醇)形成环氧化物及环氧化物的开环。环氧化物被公认为有机合成中最重要、应用最广泛...

          【关键词】 阿托伐他汀药物工艺水解

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          【成果】 1600600709 湖北 TQ03 应用技术 工程和技术研究与试验发展 2016年

          【成果简介】 环氧化物的合成和开环反应可以通过化学和生物两种方法实现,化学反应在手性识别方面特别差,生成的环氧化物大多数为混旋产品,虽然现在发展了一些手性化学合成的方法,但都避免不了昂贵的催化剂费用、重金属对环境的污染和苛刻的反应条件。在生物合成方面,环...

          【关键词】 突变体菌株突变体制备方法

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          【中文期刊】 俞恩光  郑仁朝  等 《微生物学杂志》 2014年34卷3期 86-90页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 立体选择性调控是手性生物催化的重要内容.反应温度调节作为一种简单、便捷的立体选择性调控方式已在生物催化制备手性化学品中发挥了重要作用.分析了温度引起酶立体选择性变化的机理,并综述了该方法在脂肪酶、酯酶、醇脱氢酶、青霉素G酰化酶和脱卤酶等酶催...

          【关键词】 生物催化温度立体选择性

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          【中文期刊】 吴小飞  刘均洪  《安徽化工》 2006年32卷6期 7-10页

          【摘要】 目前,在生物转化中出现了越来越多与传统工艺大不相同的新工艺,特别是生物酶在生物转化中的应用.硫酸酯酶可以立体选择性和对映体选择性地催化水解仲烷基硫酸酯,并通过改变其构象从而产生纯手性的化合物;卤代醇脱卤酶可以催化多种非天然亲核性底物;在水介...

          【关键词】 生物转化对映体选择性

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