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【中文期刊】 秦万昌 黄书奇 等 《天津医科大学学报》 2022年28卷6期 598-601,608页 ISTIC
【摘要】 目的:建立稳定的实验室多克隆抗体制备流程,选择Smarcad1作为目的基因进行重组蛋白表达纯化与多克隆抗体制备,并对其进行特异性验证.方法:以本实验室的pcDNA3.1-Flag-Smarcad1质粒作为模板,构建pET-16b-Smarc...
【中文期刊】 蔡亮 张红 等 《中国人兽共患病学报》 2016年32卷8期 711-716页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建汉坦病毒Hunan03株核蛋白基因原核重组表达载体,在大肠杆菌中进行核蛋白表达,研究核蛋白的免疫性及免疫反应性.方法 设计特异性扩增汉坦病毒Hunan03株S基因完整开放阅读框(ORF)的引物,RT-PCR扩增,产物克隆到pGM ...
【中文期刊】 胡小宁 黄学勇 等 《郑州大学学报（医学版）》 2014年5期 636-640页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：构建发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒（ SFTSV）核蛋白（ NP）基因的原核表达载体，获得纯化并具有抗原性的重组表达蛋白。方法：提取病毒RNA，逆转录为cDNA后 PCR 扩增得到目的片段；通过连接pMD18-T构建克隆载体，测序正...
【关键词】 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒； 核蛋白； 原核表达；
【中文期刊】 付晓霞 叶萍 等 《中国病理生理杂志》 2013年29卷5期 883-888页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:用不同方法制备组蛋白并观察组蛋白在体外对巨噬细胞活力及细胞因子释放的影响.方法:用基因克隆的方法构建组蛋白H3和H4的原核表达质粒,分别表达和纯化带谷胱甘肽S-转移酶(GST)和组氨酸(His)标签的组蛋白(GST-H3、GST-H4...
【中文期刊】 张晓松 康晓平 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2013年8期 595-599页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的分段表达并纯化肾综合征出血热病毒核蛋白，应用array-ELISA技术评价重组表达的核蛋白片段的诊断价值。方法构建肾综合征出血热病毒核蛋白表达质粒pET-32a（＋）/Pn、pET-32a（＋）/Pc，在大肠杆菌中诱导表达并用亲和层析法...
【关键词】 Array-ELISA； 肾综合征出血热病毒； 核蛋白；
【中文期刊】 刘晓娟 张力青 等 《首都医科大学学报》 2011年32卷2期 254-258页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 对γ-突触核蛋白(synuclein)基因进行克隆,并对其表达及纯化条件进行优化.方法 根据GenBank中γ-突触核蛋白的基因序列,设计PCR引物,从人脑cDNA文库中扩增γ-突触核蛋白的编码DNA序列,将其克隆至pGEX-6p-1...
【中文期刊】 罗孟成 陶攀 等 《中国人兽共患病学报》 2008年24卷3期 202-204,209页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 制备H5N1亚型禽流感病毒NP重组蛋白和抗体,为研制含NP组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法提供检测抗原和抗体.方法 以H5N1亚型禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NP基因cDNA克隆质粒pM...
【关键词】 H5N1 A型流感病毒； 核蛋白NP； 原核表达；
【中文期刊】 简中友 贾赟 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷7期 53-57页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用RT-PCR技术扩增出犬瘟热病毒(CDV)核衣壳(N)蛋白基因抗原性好的高保守基因片段,将其TA克隆至pMD18-T载体中,再利用酶切、连接的方法将测序正确的N基因目的片段亚克隆到原核表达载体pET24b中6×His Tag编码基因的上...
【中文期刊】 董娜 张增艳 等 《植物遗传资源学报》 2008年9卷3期 283-287页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了得到纯化的TaERF1b活性蛋白,将TaERF1b基因含有AP2/ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERF1b融合蛋白表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.0.1mmol/L ...
【关键词】 ERF(ethylene-responsive factor)； TaERF1b； 原核蛋白表达；
【中文期刊】 谢荣辉 朱函坪 等 《中国人兽共患病学报》 2007年23卷1期 56-58页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 获得狂犬病毒CVS株核蛋白(N)基因并在大肠杆菌中表达,为进一步研发狂犬血清学检测试剂盒提供抗原.方法 RT-PCR扩增狂犬病毒CVS株核蛋白测序、并定向克隆入原核表达载体pET-28a,构建原核重组表达质粒pET-28a-N,转化大...
【中文期刊】 吴守丽 严延生 等 《中国人兽共患病学报》 2007年23卷1期 66-70页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建汉坦病毒S基因不同截短片段的重组表达质粒,并选择表达高活性的重组抗原应用于血清学诊断.方法 从HTN型A537株基因组中扩增出S全长基因,构建TA-A537S克隆;以此为模板扩增出不同长度的截短的S片段,定向插入表达载体pET-3...
【中文期刊】 高明华 夏咸柱 等 《中国人兽共患病学报》 2007年23卷1期 31-34页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 用表达的狂犬病核蛋白建立检测狂犬病抗体的间接ELISA方法.方法 根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)ERA株N基因序列设计引物,利用PCR的方法从重组质粒pMD-N中扩增RV N基因,将该基因片段定向...
【中文期刊】 黄银霞 韩俊 等 《中国老年学杂志》 2006年26卷2期 201-204页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的利用分子克隆技术在原核细胞中表达α-共核蛋白(SNCP),并制备兔多克隆抗体.方法从人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA.利用PCR技术扩增获得SNCP的cDNA序列,测序正确后克隆至pQE-30-GST表达...
【中文期刊】 肖昌 徐兴然 等 《病毒学报》 2006年22卷6期 466-470页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用改造的昆虫杆状病毒表达系统转移载体,成功地对尼帕病毒(NiV)和亨得拉病毒(HeV)的核蛋白基因进行了分泌表达.重组蛋白表达的时效性分析结果显示,Sf9细胞感染重组病毒72～96h后,蛋白的表达量达到高峰,大规模表达可分别获得2.3～2...
【中文期刊】 余鹏博 王敬军 等 《中国公共卫生》 2005年21卷12期 1445-1447页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的制备稳定、特异的汉坦病毒核蛋白重组抗原和单克隆抗体.方法构建汉坦病毒(HTNV)-76118株核蛋白原核表达载体(pBV)220-S1.3和(pET)28a-S1.3,大肠埃希菌诱导表达.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAG...
【中文期刊】 曹守春 钱渊 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2005年25卷12期 1027-1030页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的用大肠杆菌表达获得人偏肺病毒主要结构蛋白N蛋白,为下一步的深入研究奠定基础.方法从重组质粒pUCm-N1816中PCR扩增获得N基因,用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET30a(+)中,得到重组表达质粒pET30a-...
【中文期刊】 张芳琳 徐志凯 等 《中国人兽共患病杂志》 2003年19卷1期 34-36页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的将汉滩病毒核蛋白(NP)主要抗原位点活性片段与囊膜糖蛋白G2进行融合原核表达及鉴定,为该融合蛋白的真核表达及汉滩病毒基因工程疫苗研究打基础.方法构建了汉滩病毒76-118株M基因G2片段与S基因5'端700bp片段的嵌合片段原核表达载体...
【中文期刊】 倪斌 张玲 等 《北京生物医学工程》 2015年5期 458-461,508页 ISTIC
【摘要】 目的：对猫突触核蛋白（α?synuclein ）进行克隆、表达及纯化，并探讨其生物信息学特征。方法在Genebank中α?synuclein基因的保守区域内设计引物，从猫脑cDNA文库中PCR扩增得到猫的α?synuclein基因，再将此基...
【中文期刊】 方诺 左建娇 《河北中医》 2010年32卷6期 912-914,后插2页 ISTIC
【摘要】 目的 观察益气活血清热利湿方对大鼠前列腺增生(BPH)模型增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡抑制基因Bcl-2及凋亡促进基因Bax的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、保列治组和实验组,每组10只.除对照组游离但不切除睾丸...
【中文期刊】 刘倩 金晶 等 《生物技术通讯》 2009年20卷4期 470-474页 ISTICCA
【摘要】 目的:采用原核表达系统表达和纯化重组谷氨酰胺:6-磷酸果糖酰胺基转移酶(GFAT),制备GFAT多克隆抗体,并用以研究在糖尿病发生发展过程中GFAT的表达情况.方法:通过生物信息学分析其抗原性和属间同源性,选择需要的基因区域;利用RT-PC...
【关键词】 谷氨酰胺； 6-磷酸果糖酰胺基转移酶； 原核蛋白表达；
【中文期刊】 柳斌 杨志新 等 《生物技术通讯》 2007年18卷3期 419-422页 ISTICCA
【摘要】 目的:获得H3N2亚型禽流感病毒核蛋白(NP)全长基因,并在大肠杆菌中表达,以用于对NP功能的研究.方法:从感染了H3N2亚型禽流感病毒的MDCK细胞培养液中收获病毒,提取病毒RNA,用RT-PCR扩增出NP基因的编码区序列,将其定向克隆到...
【中文期刊】 蒋雪 曾昭淳 《重庆医学》 2007年36卷12期 1155-1156,1160页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 建立分型检测方法,探讨了汉城病毒(SEOV)核蛋白羧基端多肽的抗原性.方法 首先,分别构建编码SEOV核蛋白及其羧基端多肽的原核表达载体pRSET A-S、pRSET A-S-C;然后,将其转化入表达菌BL21(DE3)pLySs诱导...
【中文期刊】 朱函坪 卢亦愚 等 《浙江预防医学》 2004年16卷3期 9-10页 ISTIC
【摘要】 目的应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达SARS核蛋白基因,产生无感染性的核蛋白抗原,利用此蛋白制备抗原片,用于检测血清中SARS特异性抗体.方法从非典型性肺炎病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增出SARS核蛋白基因片段,将核蛋...
【中文期刊】 李燕婷 周欣 等 《检验医学》 2004年19卷3期 177-180页 ISTICCA
【摘要】 目的探索应用重组汉坦病毒核蛋白(rNP)的免疫滴金法(CGIDA)对肾综合征出血热(hemorrhagic fever renal syndrome,HFRS)的诊断价值.方法制备纯化汉坦病毒核蛋白抗原,构建了HTN型汉坦病毒的核心区域(3...
【中文期刊】 王振国 金宁一 等 《中国生物制品学杂志》 2004年17卷5期 264-266,273页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的以1株H5N1亚型禽流感病毒RNA为模板扩增NP全基因cDNA,并在大肠杆菌中进行表达.方法提取禽流感病毒RNA,以RT-PCR法扩增编码NP基因cDNA并测序,将其克隆到pET-28a原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)ply...
【中文期刊】 刘勇 徐志凯 等 《第四军医大学学报》 2002年23卷5期 419-422页 ISTICCA
【摘要】 目的进一步了解汉滩病毒核蛋白氨基端的抗原特性. 方法构建汉滩病毒S基因5端311 bp片段的原核表达载体,并诱导表达和纯化了Mr 3.6×104的融合蛋白(汉滩病毒核蛋白氨基端Mr 1.0×104与Mr 2.6×104 GST融合);用m...
【中文期刊】 张文帅 张黎 等 《江苏预防医学》 2014年25卷1期 16-18页 CA
【摘要】 目的 构建甲型H7N9禽流感病毒NP基因的原核表达载体,并表达其编码重组蛋白.方法 RT-PCR法扩增H7N9病毒NP基因,克隆至原核表达载体PET28a(+)中,构建表达载体PET28a(+)-NP质粒;经PCR、双酶切、测序鉴定后,将P...
【关键词】 H7N9亚型禽流感病毒； 核蛋白NP； 原核表达；
【中文期刊】 张良 黄永亮 等 《华南农业大学学报》 2012年33卷1期 102-105页
【摘要】 为了高效表达狂犬病病毒HEP-Flury的核蛋白,选取抗原决定簇富集区,利用生物信息学技术分析了狂犬病病毒HEP-Flury N蛋白的核苷酸序列.根据大肠埃希菌Escherichia coli对密码子的偏嗜性,首先对所选取的核苷酸序列进行修...
【中文期刊】 孙晓璐 张平静 等 《南昌大学学报（理科版）》 2011年35卷3期 272-278页
【摘要】 利用毕赤酵母研究真核细胞对不同的原核细菌可溶性蛋白抗原的差异性表达.用PCR技术扩增3种不同的结核杆菌抗原基因Ag85a、ESAT6、以及rdESAT6和1种肺炎链球菌抗原基因PsaA.将它们分别连接到pPic9k载体中,在毕赤酵母中进行表...
【中文期刊】 魏晓锋 胡建华 等 《中国动物传染病学报》 2010年18卷4期 32-36页
【摘要】 本研究从一株鼠仙台病毒(Sendai virus,SeV)中扩增获得核蛋白(nucleocapsid protein,NP)基因,将其克隆入pET32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.将原核表达产物作为免疫原,免疫BAL...
【中文期刊】 于翔翔 谭有将 等 《西南师范大学学报（自然科学版）》 2009年34卷5期 107-110页
【摘要】 目的在昆虫细胞中表达出狂犬病毒核蛋白(NP),并探讨重组NP的免疫原性.方法采用杆状病毒表达系统在Sf9昆虫细胞中表达狂犬病毒核蛋白,用直接免疫荧光(DFA)、SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行检测和分析,以感染重组杆...
【中文期刊】 焦文强 胡永浩 等 《贵州农业科学》 2009年37卷12期 136-139页
【摘要】 采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因,并将目的基因亚克隆入原表达载体pET-28 a(+)中,经PCR、双酶切以及序列分析,结果表明:已成功构建了重组质粒.将重组质粒转化至大肠埃希氏菌Rossetta(DE3...
【中文期刊】 《中国预防兽医学报》 2009年31卷10期 800-803,832页
【摘要】 为了构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)核蛋白(N)单链抗体(scFv),本研究通过提取杂交瘤细胞株6H3的总mRNA,采用RT-PCR法扩增出抗IBV N蛋白抗体的重链和轻链可变区基因,利用重叠延伸PCR将其重链和轻链通过一条寡核苷酸链连接...
【关键词】 鸡传染性支气管炎病毒； 核蛋白； 单链抗体；
【中文期刊】 袁慧君 扈荣良 等 《中国预防兽医学报》 2003年25卷1期 5-8页
【摘要】 根据已发表的狂犬病病毒核蛋白基因序列,设计并合成了一对引物.从SAD株驯化的SRV9.蚀斑株中提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增出核蛋白的全长cDNA序列.测序结果显示,其序列与国外报道的SAD母源株序列一致.将核蛋白的cDNA克隆至原核...
【中文期刊】 李伟 张曼夫 等 《农业生物技术学报》 2000年8卷1期 29-32页
【摘要】 将狂犬病毒核蛋白结构基因重组到原核表达质粒pMAL-C2X中,经IPTG诱导表达出的MBP-NP融合蛋白分子量约98 kD,用支链淀粉琼脂糖凝胶亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白,融合蛋白用因子Xa裂解后,经Q-Sepharose离子交换层...
【中文期刊】 杨志辉 安欢欢 等 《中国生物制品学杂志》 2024年37卷9期 1025-1029,1036页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性.方法 以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGE...
【中文期刊】 尹明华 郭依瑶 等 《中国农学通报》 2024年40卷21期 106-113页
【摘要】 本研究对信前胡烟草花叶病毒进行鉴定、原核蛋白表达和序列分析,为信前胡脱毒苗的培育和鉴定提供理论依据.通过lncRNA测序和RT-PCR鉴定信前胡烟草花叶病毒蛋白基因,利用大肠杆菌重 组技术表达信前胡烟草花叶病毒蛋白,并采用生物信息学方法进行...
【关键词】 信前胡； 烟草花叶病毒； lncRNA测序鉴定；
【中文期刊】 尹明华 张艳红 等 《中草药》 2023年54卷11期 3666-3675页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对广丰千金薯Dioscorea polystachya Turczaninow.cv.Guangfeng Qianjin烟草花叶病毒进行鉴定、原核蛋白表达和序列分析,为广丰千金薯脱毒苗的培育和鉴定提供理论依据.方法 通过lncRNA测...
【关键词】 广丰千金薯； 烟草花叶病毒； lncRNA测序鉴定；
【中文期刊】 任元雪 高鑫 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2021年41卷5期 333-337页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的:获取具有生物活性的狂犬病病毒核蛋白在大肠埃希菌表达系统中高效表达。方法:实验使用密码子优化技术重新编码狂犬病病毒CTN-1株核蛋白基因，人工合成全长基因并克隆至pET-43.1a表达载体，在大肠埃希菌BL21(DE3)株中诱导表达，并...
【中文期刊】 蔡玥 马仕昆 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2020年36卷9期 826-832页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 原核表达小鼠视黄酸刺激基因8(Stra8)蛋白并制备兔抗小鼠Stra8多克隆抗体.方法 应用分子克隆法构建pET28a-Stra8原核表达重组质粒,将该重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)...
【关键词】 小鼠； 视黄酸刺激基因8(Stra8)； 原核蛋白表达；
【中文期刊】 李中华 肖运才 等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷4期 65-70页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)是禽类一种变异性很强的冠状病毒,为获得高度纯化的IBV核蛋白,建立监测IBV抗体的方法,通过RT-PCR从IBV中扩增IBV-N基因,定向连接到表达载体p...
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