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            【中文期刊】 梅建凤  赵文渊  等 《微生物学通报》 2019年46卷3期 541-547页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]血红素加氧酶-1 (HO-1)具有抗氧化应激、抗凋亡和抗纤维化等多种生理效应,有望成为一种新型药物应用于临床疾病的治疗.[目的]构建表达HO-1的基因重组大肠杆菌(Escherichia coli),并优化其表达培养条件,实现HO-...

            【关键词】 血红素加氧酶原核表达大肠杆菌

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            【中文期刊】 田兆菊  江新泉  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷12期 1284-1287页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:克隆人白细胞介素32(hIL-32)基因,构建高效稳定的hIL-32大肠杆菌表达菌株,并对纯化的目的蛋白进行生物学活性的初步测定.方法:将人外周血单个核细胞( PBMC)经刀豆素A( Con A)刺激60 h后提取细胞的总RNA,通过...

            【关键词】 白细胞介素-32基因克隆与表达大肠杆菌

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            【中文期刊】 孙成金  王健  等 《微生物学免疫学进展》 2009年37卷3期 29-33页ISTICCA

            【摘要】 通过以培养基配方、IPTG浓度、金属离子复合液浓度、镁离子浓度、表达时间、接种量、诱导时间点等发酵的重要条件对重组蛋白表达量影响的研究,确定多表位恶性疟疾疫苗M.RCAg-1蛋白最佳表达条件为以改良TB培养基培养、最优Mg2+,诱导剂IPT...

            【关键词】 恶性疟疾大肠杆菌表达优化

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            【中文期刊】 吴蓉  曹佳睿  等 《生物技术通报》 2021年37卷2期 138-148页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在利用大肠杆菌实现南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因的高效可溶性表达,并降低生产成本.构建带有不同信号肽的CALB基因表达质粒,转化至不同大肠杆菌宿主中,在摇瓶中进行基础培养基、诱导条件、培养基组成成分和进程曲线的优化.结果显示,带有P...

            【关键词】 南极假丝酵母脂肪酶B大肠杆菌可溶性表达

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            【中文期刊】 黄玉欣  李鹏昊  等 《微生物学通报》 2021年48卷2期 686-696页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]大肠杆菌作为原核表达系统常用宿主菌株,具有培养成本低、周期短和操作性强等优势,但同时也存在着一些不足.[目的]降低大肠杆菌内毒素合成水平及毒力,同时提高其可溶性表达外源蛋白的能力.[方法]利用CRISPR-Cas技术敲除大肠杆菌BL...

            【关键词】 大肠杆菌脂多糖内毒素

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            【中文期刊】 张秀  谭正怀  等 《中草药》 2021年52卷2期 367-377页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过基因工程技术生产的豆豉血栓溶解酶,研究其安全性及溶栓功效.方法 采用酪蛋白平板从豆豉中分离获得具有纤溶活性的候选菌株,利用基因工程技术将其AprE9912D基因在大肠杆菌BL21(DE3)-pDEl中过表达AprE9912D重组蛋...

            【关键词】 贝莱斯芽孢杆菌表达安全性

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            【中文期刊】 方嘉煜  朱泰承  等 《生物工程学报》 2021年37卷2期 604-614页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 质子泵型视紫红质是一种在自然界广泛存在的简单光合系统,它可以结合视黄醛,在光照下将质子由胞内泵向胞外,形成质子梯度势,在一定程度上促进ATP的合成.在非光合工程菌中引入视紫红质将光能转化为化学能有助于促进微生物生长、生产以及提高细胞耐受性....

            【关键词】 视紫红质质子泵ATP

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            【中文期刊】 孙菁兰  朱玉章  等 《微生物学通报》 2021年48卷1期 1-13页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]Indigoidine是一种来源于微生物的无毒天然蓝色素.[目的]比较Indigoidine和靛蓝的色素稳定性,进而评价Indigoidine的色素稳定性.[方法]构建重组菌株Escherichia coli DH5α/p28s异源...

            【关键词】 indigoidine大肠杆菌异源表达

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            【中文期刊】 李瑛琦  垄劲松  等 《微生物学通报》 2020年47卷12期 4164-4171页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]胶原蛋白广泛应用于日用化工及生物医药中,相比传统方法,基因工程方法制备胶原蛋白具有避免病毒隐患、产量高等优点,逐步受到广泛关注.[目的]获得Ⅲ型类人胶原蛋白基因,实现大肠杆菌中的异源表达.[方法]以人Ⅲ胶原蛋白al链为模板,(Gly...

            【关键词】 大肠杆菌Ⅲ型类人胶原蛋白克隆表达

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            【中文期刊】 李晓涵  郝建华  等 《微生物学通报》 2020年47卷2期 615-622页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase,CGTase)酶法合成环糊精是目前生产环糊精的主要方法.本文介绍了用于生产环糊精葡萄糖基转移酶的几种工程菌株:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌以及毕赤酵母,其中大...

            【关键词】 环糊精葡萄糖基转移酶大肠杆菌枯草芽孢杆菌

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            【中文期刊】 张春晨  胡双艳  等 《生物技术通报》 2020年36卷3期 153-161页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 人源溶菌酶(Human lysozyme,HLZ)是一种糖苷水解酶,具有抗菌消炎的作用,其作为抗生素的替代品,已经被广泛应用于食品业、畜牧业和医疗等领域.如何获得高产量、高活性、高纯度的人源溶菌酶一直是亟待解决的技术问题.优化人源溶菌酶编码...

            【关键词】 人源溶菌酶大肠杆菌表达系统包涵体

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            【中文期刊】 童梅  程永庆  等 《中国生物工程杂志》 2020年40卷5期 48-56页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建一株表达TNF-α Fab'抗体的大肠杆菌工程菌,并设计一种高效实用的策略以促进大肠杆菌周质空间的可溶性Fab'抗体表达.方法:首先,通过更换不同表达载体,改变轻链和重链顺序,更换信号肽,共表达分子伴侣(Skp)、二硫键合成酶(D...

            【关键词】 FabTNF-α抗肿瘤坏死因子

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            【中文期刊】 吴昊  黄嘉苇  等 《微生物学通报》 2020年47卷7期 2151-2160页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]D-甘露糖的酶促转化方法已受到相当大的关注.[目的]研究D-葡萄糖异构酶(D-glucose isomerase,D-GIase)和D-来苏糖异构酶(D-lyxose isomerase,D-LIase)共表达于大肠杆菌细胞生产D-...

            【关键词】 一锅法异构酶D-葡萄糖

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            【中文期刊】 《浙江大学学报(英文版)(B辑:生物医学和生物技术)》 2016年2期 83-99页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 概该综述较为全面地概述了当前针对大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌基因组遗传改造的各个方法的具体流程、应用范围、注意事项以及其新颖之处,比较了针对基因定点突变、基因失活和基因过表达的各个方法所存在的优缺点,同时简单地介绍了利用质粒介导基因过表达所存在的...

            【关键词】 大肠杆菌谷氨酸棒杆菌DNA操作方法

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            【中文期刊】 陈云雨  牛夏忆  等 《生物工程学报》 2019年35卷6期 1117-1125页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为制备特异性抗大肠杆菌丝状热敏蛋白Z (Escherichia coli filamentous thermosensitive protein Z,Ec-FtsZ)多克隆抗体,将Ec-FtsZ基因进行化学合成后连接pET-22b(+)表达...

            【关键词】 大肠杆菌FtsZ蛋白原核表达孔雀绿法

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            【中文期刊】 麦婉莹  洪葵  《微生物学通报》 2019年46卷5期 1092-1099页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]真菌细胞色素P450蛋白在大肠杆菌中表达水平低甚至不表达,近期研究发现通过对该类蛋白氨基端(N端)氨基酸序列的修饰可优化其表达水平.[目的]在大肠杆菌系统中表达预测功能为P450酶的焦曲霉094102菌株的Au8002蛋白,为真菌P...

            【关键词】 真菌细胞色素P450大肠杆菌表达系统异源表达

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            【中文期刊】 魏佳  王壮壮  等 《微生物学通报》 2019年46卷4期 695-706页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]大肠杆菌由于生长性能优良、遗传背景清晰,常被用作苏氨酸生产菌.[目的]敲除大肠杆菌Escherichia coli THR苏氨酸合成途径的非必需基因,并异源表达苏氨酸合成必需的关键酶,构建一株苏氨酸高产菌株.[方法]利用FLP/FR...

            【关键词】 L-苏氨酸大肠杆菌基因敲除

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            【中文期刊】 黄颖  凌晨  等 《生物化学与生物物理学报》 2003年35卷3期 225-229页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)是第1类氨基酰-tRNA合成酶, 由860个氨基酸残基组成, 催化亮氨酸tRNA的亮氨酰化.研究发现, 在它的CP1结构域内368和369间的肽键间插入253~368的肽段, 该插入变种的酶仍具有...

            【关键词】 大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶插入变种

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            【中文期刊】 黄广华  杨冠珍  等 《生物化学与生物物理学报》 2003年35卷10期 960-963页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 人源的核糖核酸酶抑制蛋白(ribonuclease inhibitor, RI) 是一种富含亮氨酸和半胱氨酸残基的酸性蛋白质, 分子量为50 kD. 从人胚胎肝cDNA文库中克隆到一个核糖核酸酶抑制蛋白RI基因的变体(ribonucleas...

            【关键词】 核糖核酸酶抑制蛋白大肠杆菌表达家蚕细胞表达

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            【中文期刊】 王恩多  郑勇刚  等 《生物化学与生物物理学报》 2002年34卷4期 526-531页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 假单孢菌sp.130头孢菌素酰化酶催化戊二酰-7-氨基头孢烷酸的水解反应, 生成7-氨基头孢烷酸.7-氨基头孢烷酸是医药工业合成大多数头孢菌素衍生物的起始原料.在6种大肠杆菌表达质粒上构建了表达该酶的不同载体, 得到了不同表达结果的大肠杆菌...

            【关键词】 GL-7ACA酰化酶重组质粒表达和纯化

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            【中文期刊】 丁蓓蓓  沈卫英  等 《生物化学与生物物理学报》 2001年33卷3期 303-308页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 从人睾丸中抽提mRNA,合成双链cDNA,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf279)。序列分析表明,该区编码93个氨基酸,与文献报道完全相同。将hf279插入质粒pGEX-4T-2,构建p...

            【关键词】 人受精蛋白β整联蛋白配体区基因克隆基因表达

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            【中文期刊】 杨巍  张 岚  等 《生物化学与生物物理学报》 2001年33卷2期 238-242页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 DNA断裂因子(DNAfragmentation factor,DFF)是细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白质之一,它由分子量为45 kD和40 kD的两个亚基构成,分别称为DFF45和DFF40。利用RT-PCR技术从人宫颈癌细胞系HeLa的...

            【关键词】 DNA断裂因子(DFF)45DNA断裂因子(DFF)40表达

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            【中文期刊】 赵惠仁  胡书群  等 《生物化学与生物物理学报(英文版)》 2000年32卷1期 21-25页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 β-晶体蛋白是含量最高的一组晶状体结构蛋白.它的正常结构对维持晶状体的高折射系数和透明至关重要,而其结构的改变与白内障的形成密切相关.为了获得大量纯的βB2-晶体蛋白并用定点突变的方法研究其聚合的机制,建立了大鼠βB2-晶体蛋白的细菌表达系...

            【关键词】 βB2-晶体蛋白表达纯化

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            【中文期刊】 何志勇  陈哲宇  等 《生物化学与生物物理学报(英文版)》 2000年32卷4期 333-336页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 内皮生长抑制素(endostatin)是最近报道具有抑制肿瘤生长和转移的蛋白质, 为此, 从正常人肝细胞株L02中抽提总RNA, 以RT-PCR法获得了人内皮生长抑制素编码序列. 序列分析表明, 内皮生长抑制素 cDNA开放阅读框架全长55...

            【关键词】 内皮生长抑制素大肠杆菌克隆

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            【中文期刊】 施惠娟  范立强  等 《生物化学与生物物理学报》 1999年31卷1期 16-18页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以人胎肝组织总RNA为模板,扩增了人铜锌超氧化物歧化酶(hCu,Zn-SOD)的cDNA,并进行序列分析,将该hCu,Zn-SODcDNA重组到T7启动子控制下的分泌型表达载体pET-22b(+)中,...

            【关键词】 铜锌超氧化物歧化酶表达栽体基因克隆

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            【中文期刊】 张浩  王全立  等 《生物化学与生物物理学报》 1999年3期 289-292页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 从人外周血细胞中提取出RNA, 通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到人血红蛋白的α和β基因片段, 与pT7Blue质粒连接, 然后将α、β基因克隆进pBV220原核表达载体中, 采用Sanger双脱氧终止法测序的结果与文献报道一致. ...

            【关键词】 血红蛋白大肠杆菌基因表达

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            【中文期刊】 刘文  王恩多  等 《生物化学与生物物理学报(英文版)》 1999年31卷5期 498页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 编码大肠杆菌精氨酰-tRNA合成酶(ArgRS)的基因argS被克隆到pMFT7-5载体上.将此质粒转化的大肠杆菌JM109(DE3)中, 该转化子粗抽液的比活是宿主菌的2 500倍.通过DEAE-Sepharose CL-6B Fast ...

            【关键词】 大肠杆菌精氨酰-tRNA合成酶表达

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            【中文期刊】 潘华  周元聪  等 《生物化学与生物物理学报》 1999年31卷1期 79-82页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 从蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)毒腺中抽提总RNA, 经RT-PCR扩增该基因, 克隆后经全序列测定, 蝮蛇类凝血酶pallase的cDNA长708个核苷酸, 即编码236个氨基酸; 根据同源性, 推测该类凝血酶p...

            【关键词】 蝮蛇类凝血酶基因克隆

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            【中文期刊】 施惠娟  贺华君  等 《生物化学与生物物理学报(英文版)》 1999年31卷6期 707-710页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以人肝细胞株(L02)总RNA为模板,扩增了人锰超氧化物歧化酶(hMn-SOD)的cDNA,重组到T7启动子控制下的表达载体pET-24a(+)中,构建表达质粒pET-MnSOD,并转化大肠杆菌BL2...

            【关键词】 锰超氧化物歧化酶表达载体基因克隆

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            【中文期刊】 周韬  荣健  等 《中草药》 2018年49卷19期 4628-4635页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆表达蚬壳花椒种子萌发过程中油脂代谢关键调控基因,研究该基因在蚬壳花椒种子外源激素赤霉素(GA)促萌发下调控蚬壳花椒种子人工萌发分子机制.方法 根据蚬壳花椒转录组测序结果,筛选克隆油脂代谢关键基因,并利用原核表达体系表达纯化目的蛋白...

            【关键词】 蚬壳花椒ZdICL克隆

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            【中文期刊】 陈云雨  牛夏忆  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷10期 942-948页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 制备大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A (Ec-ZipA)第185至328位氨基酸功能蛋白及其特异性大鼠多克隆抗体.方法 以基因合成法合成Ec-ZipA第185至328位氨基酸功能蛋白的基因序列,利用DNA重组技术与pET-30a(...

            【关键词】 大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A (Ec-ZipA)原核表达亲和层析

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            【中文期刊】 孙雪娃  何超  等 《生物工程学报》 2018年34卷7期 1156-1168页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 云芝Trametes versicolor具有很强的环境有机污染物降解能力,其烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-细胞色素P450还原酶(NADPH-cytochrome P450 reductase,CPR)为细胞色素P450酶(Cytochrome ...

            【关键词】 云芝NADPH-细胞色素P450还原酶大肠杆菌

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            【中文期刊】 徐艳红  田美慧  等 《中草药》 2018年49卷9期 2133-2139页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础.方法 通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编...

            【关键词】 白木香MAPK原核表达

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            【中文期刊】 廖文丽  卜晓玲  等 《昆虫学报》 2017年60卷4期 372-378页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]Toll样受体是昆虫Toll信号传导途径的一个重要组成成员,对激活昆虫机体对入侵病原微生物的先天免疫应答起着至关重要的作用.本研究旨在探究脂多糖对家蚕Bombyx mori幼虫中Toll样受体基因BmToll9-2基因表达的影响.[...

            【关键词】 家蚕Toll样受体BmToll9-2

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            【中文期刊】 胡立强  郑文  等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷1期 14-20页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 RC28蛋白是从野生蕈类皱盖罗鳞伞中分离得到的新型抗病毒蛋白.前期通过3'-RACE方法,从皱盖罗鳞伞总RNA中克隆获得包含RC28编码区的cDNA,并通过TA克隆获得质粒pMD18-T-RC28.以该质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增...

            【关键词】 大肠杆菌毕赤酵母表达纯化

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            【中文期刊】 车路阳  郭志兰  等 《生物工程学报》 2017年33卷5期 849-862页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 RANKL/RANK/OPG轴在骨代谢过程中起到中心调节作用,也是近年来骨相关疾病治疗研究的热点之一.RANKL蛋白在RANKL/RANK/OPG轴信号传递过程中起到关键作用,在骨代谢相关实验研究中用途广泛.但是,使用大肠杆菌Escheri...

            【关键词】 RANKL大肠杆菌蛋白表达

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            【中文期刊】 陈春野  刘剑  等 《生物技术通报》 2017年33卷9期 252-258页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法.基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌E.coli ER2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性...

            【关键词】 人鳞状上皮细胞癌抗原大肠杆菌表达系统可溶性表达

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            【中文期刊】 张宇萌  童梅  等 《中国生物工程杂志》 2016年36卷5期 118-124页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 大肠杆菌表达重组蛋白相比真核细胞具有成本低廉、大规模发酵容易、条件易于自动化控制等优点,通过大肠杆菌表达重组蛋白是一种高效、经济的途径,重组蛋白表达量可达到大肠杆菌总蛋白质量的50%.具有正常生化活性的重组蛋白通常为可溶性形式,因而对于以得...

            【关键词】 大肠杆菌可溶性表达高密度发酵

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            【中文期刊】 白羊  章永垒  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 202-207页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在大肠杆菌中可溶表达重组人神经生长因子(Recombinant human β nerve growth factor,rhβNGF),并对表达产物进行分离纯化和生物学活性鉴定。成功扩增 hNGF β亚基基因,将其克隆入 pMAL-c2X...

            【关键词】 人神经生长因子大肠杆菌可溶表达

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            【中文期刊】 王艳霞  王红玲  等 《生物技术通报》 2016年32卷5期 180-186页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以简单节杆菌(Arthrobacter simplex)TCCC 11037基因组为模板,通过PCR方法进行groEL基因克隆,结果表明,该菌株中GroEL的核苷酸和氨基酸序列与Nocardioidessp. JS614来源的GroEL同源...

            【关键词】 简单节杆菌groEL异源表达

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            【中文期刊】 邵敏  王新颖  等 《吉林大学学报(医学版)》 2016年42卷1期 59-63页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建原核表达载体pET-28a(+)-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础.方法:以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770 bp的人异麦芽糖酶(hISO)基因...

            【关键词】 异麦芽糖酶原核表达α-葡萄糖苷酶

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            【中文期刊】 陆利  曹保华  等 《微生物学通报》 2016年43卷9期 2063-2071页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]对大肠杆菌CFT073中Culri系统的重要蛋白CsgF进行高效表达,探索其纯化条件和三维结构,为研究Curli生物合成机制提供理论基础.[方法]以大肠杆菌CFT073基因组为模板扩增csgF基因,构建pET28a-csgF(nsp...

            【关键词】 大肠杆菌CFT073CsgF基因克隆

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            【中文期刊】 全聪  张静  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 255-260页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在重组大肠杆菌中共表达了谷胱甘肽运输蛋白 CydDC 与双功能合成酶 GshF,通过增强对谷胱甘肽的运输作用,提高谷胱甘肽产量。实验结果表明,目的蛋白 CydDC 及 GshF 均成功表达;重组菌 MG1655(pTrc99a-as/pBA...

            【关键词】 谷胱甘肽运输蛋白表达

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            【中文期刊】 戴冠苹  苗良田  等 《生物工程学报》 2015年31卷2期 206-219页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 辅酶Q10(CoQ10)是一种脂溶性抗氧化剂,具有提高人体免疫力、延缓衰老和增强人体活力等功能,广泛应用于制药行业和化妆品行业.微生物发酵法能可持续性生产辅酶Q10,具有越来越多的商业价值.本研究首先将来自类球红细菌的十聚异戊二烯焦磷酸合成...

            【关键词】 辅酶Q10同源重组基因表达调控

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            【中文期刊】 何燕斌  齐亚坤  等 《生物工程学报》 2015年31卷12期 1773-1783页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在现代生物学和生物技术研究中,通过基因重组表达获得目标蛋白已成为常规技术.因其培养简单、操作方便、遗传背景清楚、克隆表达技术成熟,大肠杆菌表达系统通常是人们表达重组蛋白的首选.但是在常规温度下进行基因的重组表达,动、植物和常温微生物的基因产...

            【关键词】 大肠杆菌表达系统低温诱导

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            【中文期刊】 邵敏  王新颖  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2015年31卷12期 1629-1632页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建人蔗糖酶(hSUC)基因原核表达载体,诱导表达获得融合蛋白.方法 采用反转录PCR法扩增得到hSUC基因片段,并将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导在大肠杆菌中表达,采用Ni柱亲和层析纯化...

            【关键词】 蔗糖酶α-葡萄糖苷酶大肠杆菌

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            【中文期刊】 高炳淼  刘云海  等 《基因组学与应用生物学》 2015年34卷2期 326-331页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 人工设计合成芋螺毒素基因MrVIB来构建表达载体pET32a/Trx-EK-MrVIB,将其转化大肠杆菌BL21 (DE3) plysS进行诱导表达.菌体经超声破碎后利用Ni-NTA琼脂糖柱进行亲和层析纯化融合蛋白,SDS-PAGE电泳分析...

            【关键词】 芋螺毒素大肠杆菌基因工程

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            【中文期刊】 胡祖权  李和平  等 《生物技术通报》 2015年9期 238-243页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 通过优化诱导表达条件,实现抗镰刀菌单链抗体在大肠杆菌周质中高效可溶性表达。将抗镰刀菌单链抗体FvSG7转化到大肠杆菌XL1-Blue中,确定诱导表达培养基,诱导温度、诱导剂IPTG的浓度和诱导时间条件下培养重组大肠杆菌,通过Western杂...

            【关键词】 单链抗体可溶性表达大肠杆菌

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            【中文期刊】 刘文  贾义华  等 《生物技术通报》 2015年11期 202-206页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 DNA结合蛋白(DNA- binding proteins from starved cells,DPS)是细菌一类重要的抗逆境保护蛋白。对大肠杆菌DPS蛋白进行原核表达和纯化旨为研究其体外自组装和抗氧化活性。构建表达载体pBVDPSHis...

            【关键词】 大肠杆菌DPS蛋白原核表达

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            【中文期刊】 徐杰  高水平  等 《中草药》 2015年46卷11期 1661-1665页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建芍药Paeonia lactiflora Actin (PlActin)基因原核表达载体,优化PlActin基因在大肠杆菌中的高效表达体系.方法 基于PlActin基因cDNA序列及原核表达载体pET-32a(+)多克隆位点序列,...

            【关键词】 芍药Actin大肠杆菌

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