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          【中文期刊】 黄艳燕  左文朴  等 《工业微生物》 2009年39卷5期 18-24页ISTICCA

          【摘要】 将绿色木霉葡聚糖内切酶EGIII基因亚克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-egl3,转化到大肠杆菌BL21(DE3).利用金属亲和层析对重组EGIII进行纯化,纯化后酶比活力达到6 U/mg蛋白,最适反应温度为60 ℃,...

          【关键词】 绿色木霉葡聚糖内切酶III大肠杆菌

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          【中文期刊】 李亚平  种慧敏  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2019年40卷3期 459-464页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的 比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase,PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案.方法 以大肠杆菌碱性磷酸酶(...

          【关键词】 芳香硫酸酯酶定点饱和突变随机引物

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          【中文期刊】 佘文文  倪静  等 《湖北大学学报(自然科学版)》 2019年41卷1期 1-4,9页

          【摘要】 定点饱和诱变技术一直以来被广泛应用于蛋白的定向进化和代谢途径的研究,然而建立偏爱性低的高质量饱和突变库一直面临着严峻挑战.提出一种改进的建立智能突变体文库的方法,选取柠檬烯环氧水解酶(LEH)为突变对象,摒弃传统的NNK/NNN密码子简并引...

          【关键词】 定点突变饱和突变PCR

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          【中文期刊】 吴芹  臧嘉  等 《食品与生物技术学报》 2019年38卷7期 65-70页

          【摘要】 为改善米曲霉木聚糖酶AoXyn11A的温度特性,基于其三维结构的同源建模和分子动力学模拟,随机替换最高B-factor值位点处的Gly21.以重组表达质粒pET-28a-A oxyn11A为模板,采用全质粒两步PCR技术对AoXyn11A基...

          【关键词】 定点饱和突变木聚糖酶温度特性

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          【中文期刊】 江泽沅  柳羽哲  等 《食品科学》 2023年44卷18期 110-116页

          【摘要】 通过定点突变技术,提高高丝氨酸脱氢酶(homoserine dehydrogenase,HSD)的催化活性,减少通路中代谢产物对其产生的反馈抑制和阻遏作用.对HSD与底物高丝氨酸分子进行对接,通过其空间结构分析,选择Asp61和Gly25两...

          【关键词】 谷氨酸棒状杆菌高丝氨酸脱氢酶酶学性质

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          【学位论文】 作者:黄坚丽 导师:韦宇拓   广西大学   生物学 微生物学(硕士) 2012年

          【摘要】 α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,EC3.2.1.20)是一类从含有α-糖苷键底物的非还原末端催化水解α-葡萄糖基酶的总称。该酶是工业上生产低聚异麦芽糖的关键酶制剂,低聚异麦芽糖是一种功能性低聚糖,具有良好的促进双歧杆菌生长、降低...

          【关键词】 绿色糖单孢菌α-葡萄糖苷酶

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          【学位论文】 作者:聂洪丽 导师:汤丽霞   电子科技大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2011年

          【摘要】 卤醇脱卤酶不仅可以催化污染环境的有机卤化物的分解,从而降低其污染性,而且可以催化合成许多药物的中间体,在手性药物合成方面有广阔的应用前景,不过目前数据库中只有6种此类酶,为更好的利用这种酶,一方面可以运用突变等手段在催化活性、稳定性等方面改...

          【关键词】 卤醇脱卤酶定点突变

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          【学位论文】 作者:王青艳 导师:黄日波   广西大学   生物学 微生物学(硕士) 2006年

          【摘要】 具有较高酶活性和热稳定性的海藻糖合成酶在酶法生产海藻糖中很重要。我们用实验室进化方法获得了酶活力和热稳定性有所提高的突变酶。运用随机突变和定点饱和突变相联合的策略来产生突变库。经过一轮的随机突变,筛选到一个酶活力提高了80%且Km值下降(由...

          【关键词】 海藻糖合成酶随机突变

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          【中文期刊】 李雨薇  袁梅  等 《重庆医科大学学报》 2018年43卷1期 107-112页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的:通过定点突变初步表征绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase,PAAS)序列-活性关系,识别通过迭代饱和突变提高突变体比活性的合适位点.方法:分析PAAS活性中心三维构象初步识别催...

          【关键词】 芳香硫酸酯酶定点突变表征

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          【学位论文】 作者:李奉熙 导师:李正强   吉林大学   生物学 生物物理学(博士) 2023年

          【摘要】 酶作为常用的生物催化剂,因为其高效的催化能力和突出的立体选择性,在日常的生产生活中发挥着重要的作用。然而随着工业化学品的类型增多以及需求日益增大,现有的酶促反应已经不能满足实际的需求。而酶催化非天然反应的提出,逐渐成为生化领域的一大热点,相...

          【关键词】 血红蛋白催化反应

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          【学位论文】 作者:王伟祎 导师:欧阳平凯   蔡亚凡   郑州大学   其他 材料与化工(硕士) 2023年

          【摘要】 6''-唾液酸乳糖属于人乳寡糖,其能够抑制病原体对肠内膜的黏附、对新生儿肠胃成熟及大脑发育和认知发展起着不可替代的作用。因此,6''-唾液酸乳糖在医药和食品行业具有巨大的发展潜能。目前酶法合成因其具有高效、环保及反应条件温和的优点成为生产6...

          【关键词】 α-2,6-唾液酸转移酶底物耐受性

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          【学位论文】 作者:孙鹤铭 导师:王斌   张一鸣   北京化工大学   生物学 生物工程(硕士) 2022年

          【摘要】 本课题组已经在大肠杆菌中异源表达多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK),以多聚磷酸盐(六偏磷酸钠)代替价格高昂的ATP,低价地并且高效地合成6-磷酸甘露糖(M6P)。但PPGMK的热稳定性和酶活都较差,拟对酶进行定向进化。
            本研究合成...

          【关键词】 多聚磷酸盐依赖型激酶热稳定性

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          【学位论文】 作者:王哲人 导师:闵伟红   吉林农业大学   化学工程与技术 发酵工程(硕士) 2021年

          【摘要】 天冬氨酸激酶(AspartateKinase,AK)是天冬氨酸(L-Asp)在合成天冬氨酸族氨基酸途径中的第一关键限速别构酶,其催化活性受到末端产物赖氨酸(Lys)与苏氨酸(Thr)的协同反馈抑制作用,致使不能过量积累和工业化生产目的氨基酸...

          【关键词】 北京棒杆菌天冬氨酸激酶

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          【学位论文】 作者:李亚平 导师:胡小蕾   重庆医科大学   临床医学 临床医学(硕士) 2019年

          【摘要】 铜绿假单胞菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)是生化制药工具酶及潜在免疫分析标记酶,可与碱性磷酸酶配对应用于SDESA-ELISA。然而野生型PAAS催化活性低,对其进行酶分...

          【关键词】 铜绿假单胞菌芳香硫酸酯酶迭代饱和突变

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          【学位论文】 作者:王露 导师:吴坚平   浙江大学   化学工程与技术 生物化工(硕士) 2018年

          【摘要】 (3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题...

          【关键词】 卤醇脱卤酶分子改造

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          【学位论文】 作者:邱雨楼 导师:许杨   南昌大学   食品科学与工程 食品科学与工程(博士) 2015年

          【摘要】 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)主要是由禾谷镰刀菌、粉红镰刀菌等镰刀菌产生的次级代谢产物,广泛存在于大麦、小麦、玉米等谷物及其制品中,严重危害人类及动物的健康。DON具有急性和慢性毒性,可引起厌食、呕吐、腹泻和发烧...

          【关键词】 脱氧雪腐镰刀菌烯醇纳米抗体

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          【学位论文】 作者:胡升 导师:梅乐和   浙江大学   化学工程与技术 生物化工(博士) 2010年

          【摘要】 采用蛋白质工程手段对酶进行改造、使其具备特定的性质,常常是利用酶进行生物催化与生物转化的前提。为了获得催化吲哚羟基化时以靛玉红为主要产物的生物催化剂、满足靛玉红生物制备的需要,本论文采用半理性定向进化手段对细胞色素P450BM-3进行了改造...

          【关键词】 靛玉红半理性定向进化

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