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            【中文期刊】 刘姗姗  岳素文  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2014年43卷1期 53-58页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR无模板测试技术,阐明引物二聚体形成的机制,解决PCR反应中引物二聚体形成的问题,推动SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术的应用.方法采用 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术...

            【关键词】 实时荧光定量PCRSYBR GreenⅠ二聚体

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            【中文期刊】 张驰宇  张高红  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年20卷3期 387-392页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为建立一种新的SYBR greenⅠ实时定量RT-PCR方法,使之能够有效消除引物二聚体(PDs)对实时定量结果的影响.对RT-PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析.依据PDs和扩增产物的熔解温度(Tm)特点,在...

            【关键词】 二聚体,荧光实时定量RT-PCR,SYBR greenI,四步法,RNA定量

            浏览:517 被引:122 下载:77
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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《临床检验杂志》 2017年35卷5期 370-372页ISTICCA

            【摘要】 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)因灵敏度高、操作简便在各个领域得到了广泛的应用.然而,伴随其高灵敏度存在的非特异性问题在一定程度上限制了其应用.不同于普通检测方法,该技术的非特异性问题主要由可以指数...

            【关键词】 实时荧光定量PCR非特异性二聚体

            浏览:172 被引:10 下载:44
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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《临床检验杂志》 2016年34卷4期 244-246页ISTICCA

            【摘要】 目的 在内标双重PCR系统中寻找影响靶模板检测灵敏度的主要因素,并比较不同检测体系的灵敏度.方法 针对HBV基因设计普通引物对和中部同序引物对,比较引物二聚体(PD)含量;控制内标基因的Ct值约为30,调整内标引物浓度为10、8、5、2、1...

            【关键词】 双重PCR二聚体内标系统

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            【中文期刊】 陈琪  刘晓峰  《江西医药》 2018年53卷8期 897-898,900页CA

            【摘要】 目的 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)过程中生成的引物二聚体(Primer Dimer,PD)回收再利用.方法 重组质粒pET28a(+)-ProDer f 1转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,...

            【关键词】 PCR特异性二聚体

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            【中文期刊】 闻新棉  陈英剑  等 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2005年26卷7期 444-446页ISTICCA

            【摘要】 实时定量检测中引物二聚体的存在会严重影响检测结果的准确性,本文提出多方面的优化策略,以减少或消除实时定量检测中引物二聚体的集聚.

            【关键词】 实时定量SYBR Green Ⅰ二聚体

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            【中文期刊】 徐祥  刘昕  等 《临床检验杂志》 2001年19卷3期 135-136页ISTICCA

            【摘要】 目的根据引物二聚体形成原理,建立一种新的克隆目的基因的方法。方法人工合成两条或两条以上3′端互补配对的寡核苷酸链,寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合,PCR扩增延伸,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定,可见一条清晰...

            【关键词】 二聚体基因克隆,聚合酶链反应

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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 107-114页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在 TaqMan 探针法实时荧光定量 PCR 中,排除由引物探针聚合延伸引起的假阳性问题以及由引物二聚体(Primer Dimer,PD)引起的假阴性问题。首先对不同探针进行引物探针聚合实验;然后通过双重 PCR 的干扰实验选择合适的内标基...

            【关键词】 实时荧光定量 PCRTaqMan 探针反义碱基

            OA
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            【中文期刊】 林艳  李照熙  等 《新乡医学院学报》 2012年29卷6期 417-418,421页ISTICCA

            【摘要】 目的 提供一种去除聚合酶链式反应( PCR)引物二聚体的简便方法.方法 根据聚乙二醇(PEG)能够选择性沉淀DNA片段的原理,确定分别去除100 bp、100~200 bp、100~300 bp条带的PEG 6000最终质量分数,因引物二聚...

            【关键词】 聚乙二醇6000二聚体聚合酶链式反应

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            【中文期刊】 许洁  张科平  等 《临床与实验病理学杂志》 2021年37卷3期 354-356页ISTICPKUCA

            【摘要】 二代测序(next generation sequencing,NGS)技术能够同时对上百万乃至数十亿个DNA分子进行测序,相较于传统测序技术,其速度较快、一次可检测大量靶基因,因而广泛应用于染色体非整倍体无创产前筛查、肿瘤靶向治疗基因突变...

            【关键词】 二代测序文库二聚体

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            【中文期刊】 周红梅  《现代检验医学杂志》 2009年24卷6期 27-31页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量PCR方法,测定LIN28基因在胃癌组织中的表达水平,并进行实验室方法学评价.方法 采用RT-PCR扩增LIN28 基因片段 ,将该片段克隆到质粒载体PMD18-T上, 转化入大肠埃希氏菌(...

            【关键词】 SybrGreenI实时荧光定量PCRRNA连接蛋白LIN28逆转录聚合酶链反应

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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《临床检验杂志(电子版)》 2015年4卷1期 797-805页

            【摘要】 TaqMan探针法实时荧光定量PCR因其重复性好、特异性强、线性范围宽等特点在各个领域有着广泛的应用,内标系统的引入进一步提升了该方法的灵敏度,增加了其可靠性和实用性.然而,这一技术也因为假阴性和假阳性问题存在着改进的空间.本文从TaqMa...

            【关键词】 实时荧光定量PCRTaqMan探针二聚体

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            【中文期刊】 刘姗姗  岳素文  等 《临床检验杂志(电子版)》 2014年3卷2期 610-617页

            【摘要】 实时荧光定量PCR亦成为RT-QPCR的出现,确定了PCR(聚合酶链)反应的技术实现由了定性检测到兼定量检测靶标核苷酸序列的华丽变身,是对PCR质变式的优化,但是该技术在现实应用中依然存在着大量的难以克服的障碍:分析溶解曲线的过程耗时很长、...

            【关键词】 PCRARMS扩增

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            【中文期刊】 张婉玉  张冬雅  等 《中华生殖与避孕杂志》 2021年41卷3期 247-251页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨超声引导下穿刺取卵术(transvaginal oocyte retrieval,TVOR)后卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)合并卵巢出血的鉴别诊断、高危因素及治疗...

            【关键词】 卵巢过度刺激综合征卵巢出血超声导下穿刺取卵术

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            【中文期刊】 夏乾峰  覃西  等 《临床检验杂志》 2011年29卷4期 241-243页ISTICCA

            【摘要】 目的 以二聚体突变荧光引物技术为基础建立对沙眼衣原体进行定量检测的新方法.方法 以沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因构建重组质粒作为DNA标准品,设计二聚体突变荧光引物,优化定量PCR体系并进行性能评价;同时对148例临床生殖道标本进行...

            【关键词】 沙眼衣原体实时定量PCR二聚体突变荧光

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            【学位论文】 作者:王浩宇 导师:黄琳   安徽医科大学   生物学 细胞生物学(硕士) 2024年

            【摘要】 由致病菌引起的食物中毒或血液感染性疾病,严重威胁着社会和人类的安全。传统的平板培养法是一种准确并可靠的致病菌检测方法,但是操作步骤繁琐,检测周期长;分子生物学方法和免疫学方法检测时间短、灵敏度高,但是需要专业人员的操作与专业的实验环境,且易...

            【关键词】 致病菌检测CRISPR/Cas系统

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            【学位论文】 作者:沈泽嘉 导师:肖君华   东华大学   生物医学工程 生物医学工程(硕士) 2023年

            【摘要】 本文主要介绍有关新型基因分型方法的设计方案与其应用,分为三个部分:第一部分为基于高保真酶的等位基因特异性PCR的SNP分型方法的开发与应用;第二部分为荧光探针熔解曲线分型方法设计方案与应用;第三部分为采用UNG酶解决引物二聚体的方法探索。<...

            【关键词】 基因分型等位基因特异性PCR

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            【学位论文】 作者:姜文灿 导师:王成彬   温州医科大学   临床医学 临床检验诊断学(硕士) 2017年

            【摘要】 目的:
              1.在TaqMan探针法实时荧光定量PCR中,以乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)为研究对象,排除由引物探针聚合延伸引起的假阳性问题,减轻气溶胶的污染程度和引物二聚体(Primer Dimer,PD)的干扰...

            【关键词】 实时荧光定量PCRTaqMan探针

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            【中文期刊】 叶玲  刘建伟  等 《生物化学与生物物理进展》 2003年30卷6期 956-959页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 异源蛋白在酵母中的表达涉及到大量重组子的筛选鉴定.以直接煮沸2~5 min后的酵母菌落水悬浮液为模板,建立了酵母克隆的PCR快速筛选方法.介绍了PCR反应中减少引物二聚体、提高反应特异性及-80℃低温保存酿酒酵母感受态细胞等技巧.

            【关键词】 酵母PCR筛选转化

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            【中文期刊】 陶明丽  李莹雪  等 《国际检验医学杂志》 2022年43卷22期 2689-2694页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立有错配的加尾双引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(T-ARMS PCR)多重检测的方法 ,实现针对肝细胞癌常见基因突变位点TP53 R249S、TP53 R273H、CTNNB1 S45F的多重检测.方法 针对3个基因突变位点进行引...

            【关键词】 有错配的加尾双扩增受阻突变体系聚合酶链反应多重检测熔解曲线分析

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            【中文期刊】 范晓旭  肖冲  等 《中国比较医学杂志》 2012年22卷6期 57-61页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 建立土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)核酸的荧光定量PCR( Real-time PCR)检测方法,应用于土拨鼠肝炎病毒模型的研究.方法 分别根据土拨鼠肝炎病毒核心抗原(WHcAg)和表面抗原...

            【关键词】 土拨鼠肝炎病毒DNA检测实时荧光定量PCR

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            【中文期刊】 王耀  郑秋月  等 《中国食品卫生杂志》 2006年18卷4期 314-317页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为应用SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR技术建立沙门菌的快速检测方法,根据沙门菌invA基因序列的特点设计特异性引物,进行SYB(R) Green Ⅰ实时PCR检测.以沙门菌及非同源性参考菌株做特异性检测;沙门菌不同群菌株做重现性检测...

            【关键词】 聚合酶链反应沙门氏菌属基因

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            【中文期刊】 徐祥  吕凤林  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷1期 53-59页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 采用引物二聚体配对搭桥法成功扩增了人过敏毒素C5a全长的反义cNDA,将扩增的反义cNDA克隆到原核表达载体pPROEXTM HTc上,与6×His头形成融合基因,转化E.coli DH5α,30℃下经IPTG诱导,该融合蛋白在大肠杆菌中以...

            【关键词】 C5a反义肽过敏毒素C5a融合表达

            浏览:163 被引:4 下载:9
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            【中文期刊】 徐祥  梁华平  等 《第三军医大学学报》 2003年25卷2期 123-126页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的获得NF-κB p65亚基DNA结合域cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因,并检测靶基因的表达和自身激活活性.方法利用引物二聚体搭桥技术,扩增p65亚基DNA结合域基因片段,并将其克隆入酵母双杂交载体pGBKT7 DNA-BD.应用醋...

            【关键词】 核因子-κBp65酵母双杂交

            浏览:240 被引:5 下载:4
            • 概要:
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            【中文期刊】 冯忠军  冯彦蕊  等 《河北医科大学学报》 2016年37卷3期 296-300页ISTICCA

            【摘要】 目的 通过检测miR-16在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血浆和关节滑液中的表达,探讨其在RA鉴别诊断以及病情评估中的应用价值.方法 应用茎环逆转录引物的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法检测R...

            【关键词】 关节炎,类风湿滑液微RNAs

            浏览:185 被引:6 下载:85
            • 概要:
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            【中文期刊】 李静  谭彩虹  《国际检验医学杂志》 2015年1期 57-59页ISTICCA

            【摘要】 目的:建立特异、稳定且可靠的血浆 microRNA(miRNAs)实时荧光定量 PCR 技术。方法收集10例健康人血浆标本,采用 mirVanaTM PARIS kit 试剂盒法提取血浆 miRNAs,以 miRNA 特异的茎环引物引导逆转...

            【关键词】 实时荧光定量血浆 microRNAs外参照

            浏览:277 被引:6 下载:154
            • 概要:
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            【中文期刊】 李亚文  徐世元  等 《重庆医学》 2014年15期 1904-1906页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的:探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体,运用基因工程技术,获取目的基因片段并构建重组质粒,然后制备感受态细胞并转化,将重组质粒导入感受态细胞;用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒...

            【关键词】 Grp78基因慢病毒载体基因工程

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            • 概要:
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            【中文期刊】 许春伟  葛畅  等 《诊断病理学杂志》 2014年21卷4期 242-245页ISTIC

            【摘要】 目的 应用两种方法检测锯齿状腺瘤中CDX2基因甲基化状态,比较这两种检测方法的差异.方法 采用Taqman探针qPCR (MethyLight)和SYBR Green qPCR方法检测129例锯齿状腺瘤(包括61例SSA/P、68例TSA)...

            【关键词】 甲基化qPCRMethyLight

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            • 概要:
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            【中文期刊】 代莉  李会芳  等 《昆明医学院学报》 2011年32卷5期 27-30,46页ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测PARL基因Leu262Val多态性的最适实验条件.方法 在PCR实验中,运用降落PCR(touchdown PCR,TD-PCR)方法优化PCR条件;对引物终浓度设定...

            【关键词】 聚合酶链反应限制性片段长度多态性PARL基因

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            • 概要:
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            【中文期刊】 周贵良  洪来法  等 《生物信息学》 2010年08卷2期 139-141页ISTIC

            【摘要】 利用NCBI提供的RefSeq序列,通过BLAT、Sim4和自主开发的剪接比对程序Ealter1.0对人类RefSeq转录本进行外显子预测,根据预测的外显子信息,采用自主开发SYBR Green I Real Time PCR引物设计程序E...

            【关键词】 RefSeq转录本数据库实时定量PCR

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            • 概要:
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            【中文期刊】 李红钢  廖爱华  等 《中华男科学杂志》 2007年13卷11期 969-974页MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 目的:建立并优化SYBR GreenⅠ实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA.方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR Green Ⅰ实时PCR定量检测CatSper...

            【关键词】 CatSper1精子mRNA

            浏览:225 被引:4 下载:5
            • 概要:
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            【中文期刊】 李柏生  李芳  等 《广东医学》 2006年27卷1期 35-36页ISTICCA

            【摘要】 目的探讨Aptamer应用于普通Taq酶扩增的实时定量(Real-time)PCR反应体系能否提高反应的特异性,减少引物二聚体的产生.方法在使用SYBR GreenI作荧光染料,普通Taq酶扩增的Real-time PCR反应体系中添加一定...

            【关键词】 聚合酶链式反应二聚体特异性

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            • 概要:
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            【中文期刊】 陈茂伟  曹骥  等 《广西医科大学学报》 2006年23卷2期 274-276页ISTICCA

            【摘要】 目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法.方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基...

            【关键词】 多重逆转录PCR分裂原激活的激酶信号转导通路基因

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            • 概要:
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            【中文期刊】 朱云娟  黄丽娟  等 《天津医科大学学报》 2005年11卷4期 509-511,514页ISTIC

            【摘要】 目的:建立外标准法SYBR GREEN I实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHR mRNA的表达的影响.方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行P...

            【关键词】 外标准法实时定量RT-PCRTSHR mRNASYBR GREEN I

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            • 概要:
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            【中文期刊】 张优  吕刚  等 《泰山医学院学报》 2017年38卷9期 961-964页

            【摘要】 目的 建立一种温州病毒(Wenzhou virus,WENV)的SYBR GreenI实时荧光PCR检测方法.方法 分析WENV保守区域并设计特异引物,以特异扩增产物构建的阳性重组质粒为标准品,建立SYBR Green I实时荧光定量PCR...

            【关键词】 WENV实时荧光PCR检测

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            【中文期刊】 武娟  曹斌斌  等 《中国食品学报》 2016年16卷4期 212-217页

            【摘要】 实时荧光定量PCR(qPCR)是检测食源性病毒的常用方法,其高度的灵敏性导致检测过程中容易产生假阳性结果.基因序列比对法是比利时根特大学食品微生物与食品保藏实验室新近建立的验证qPCR阳性结果真伪的一种方法.本研究以检测贝类诺如病毒GⅡ.4...

            【关键词】 实时荧光定量PCR假阳性诺如病毒GⅡ.4

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            【中文期刊】 赵孟孟  冯松林  等 《中国畜牧兽医》 2016年43卷10期 2534-2540页

            【摘要】 试验旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) Nsp 9基因的实时荧光定量 PCR 检测方法,并探究其在感染细胞过程中表达量的变化。...

            【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR

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            【中文期刊】 王德国  王永真  等 《许昌学院学报》 2015年34卷5期 81-83页

            【摘要】 将环介导等温扩增技术最初报道中的M13噬菌体引物排列成四种组合FIP+ BIP+F3+B3、FIP+ BIP+ F3、FIP+ BIP+ B3、FIP+ BIP,分别在不加M13噬菌体模板的情况下以相同的反应体系及反应条件进行等温扩增,琼脂...

            【关键词】 脱氧核糖核酸环介导等温扩增假阳性

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            【中文期刊】 余波  周思旋  等 《湖北农业科学》 2015年54卷1期 126-129,133页

            【摘要】 根据GenBank中猪细小病毒VP2基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得猪细小病毒VP2基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品.通过对SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪细小病毒的SYBR Gre...

            【关键词】 猪细小病毒VP2基因SYBR Green Ⅰ荧光定量

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            【中文期刊】 陈辉麟  李唯  等 《甘肃农业大学学报》 2014年6期 82-86页

            【摘要】 根据 GenBank 发表的大蒜普通潜隐病毒(GCLV)的外壳蛋白基因的保守序列设计了一对引物,以全基因序列合成的方法获得质粒标准品,以此质粒标准品为模板建立 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测 GCLV的方法.该方法在4.2×1...

            【关键词】 实时荧光定量PCR大蒜普通潜隐病毒SYBR GreenⅠ

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            【中文期刊】 余波  罗永成  等 《广东农业科学》 2014年41卷21期 144-148页

            【摘要】 根据GenBank中柱状黄杆菌16S rRNA序列,设计1对特异性引物,PCR扩增获得16S rRNA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品.通过对SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了黄杆菌的SYBR ...

            【关键词】 大鲵柱状黄杆菌荧光定量PCR

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            【中文期刊】 余波  周思旋  等 《河南农业科学》 2014年6期 128-131,144页

            【摘要】 根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV )gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRV gE基因片段,构建重组质粒pMD18 T gE ,作为阳性标准品。对SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRV S...

            【关键词】 猪伪狂犬病毒野毒株gE基因

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            【中文期刊】 国玉芝  荆洪英  等 《黑龙江医药科学》 2013年36卷6期 65,67页

            【摘要】 引物是所有聚合酶链式反应(Polymerase chain reaetion,PCR)中必须使用的主要材料之一,引物的稳定性对PCR的结果有着重要影响,可以说是决定PCR成败的关键因素,而不同的引物溶解溶液对引物的稳定性有着重要影响,我们在...

            【关键词】 溶解液PCR稳定性

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            【中文期刊】 赵一萍  白东义  等 《畜牧兽医学报》 2013年44卷2期 220-227页

            【摘要】 旨在建立一种检测马Toll样受体(TLRs) mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR(Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)方法.参照GenBank中马TLRs...

            【关键词】 Toll样受体骨髓

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            【中文期刊】 周辰瑜  谢芝勋  等 《畜牧与兽医》 2012年44卷11期 12-16页

            【摘要】 本研究旨在建立一种快速、特异、敏感的H6亚型禽流感病毒(AIV)实时荧光定量RT-PCR检测方法.针对H6亚型AIV的血凝素(HA)基因序列保守区设计1对引物,并优化反应条件.结果表明,该方法的最低检测限为1.07×101拷贝质粒DNA,与...

            【关键词】 禽流感病毒H6亚型荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 唐佳佳  岳华  等 《中国畜牧兽医》 2011年38卷7期 127-130页

            【摘要】 本研究旨在建立定量检测小鼠β-actin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法.根据GenBank中登录的小鼠β-actin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR Gre...

            【关键词】 小鼠β3-actin基因实时荧光定量PCR

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            【中文期刊】 石晓磊  胡凤蓉  等 《科学技术与工程》 2011年11卷13期 2888-2892页

            【摘要】 构建人mir-218-2,pre-miRNA慢病毒表达载体,为研究miR-218在人体的功能及作用机制打下基础.以人hsa-mir-218-2前体序列,设计部分互补的正反向引物,进行引物退火,形成引物二聚体.PCR扩增引物二聚体,酶切后插入...

            【关键词】 microRNAmiR-218慢病毒表达载体

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            【中文期刊】 周晓薇  朱雪蛟  等 《浙江农业学报》 2011年23卷3期 500-505页

            【摘要】 酸酐能与聚合酶上的赖氨酸结合形成聚合物,试验通过选用合适的酸酐,修饰Taq DNA聚合酶.在常温下,酶活性被封闭,升温过程中不表现酶活,从而减少非特异性扩增和引物二聚体的形成;而在较高的温度下一段时间后,一般为94℃、15 min,酸酐脱落...

            【关键词】 热启动PCRTaqDNA聚合酶

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            【中文期刊】 张昊  《亚太传统医药》 2010年06卷6期 6-7页

            【摘要】 目的:建立验证293A细胞UCP2基因表达情况的SYBR Green荧光定量PCR方法.方法:2μg 293A细胞总RNA用于逆转录,所需的反应体系为20L,其中包含2μg RNA,1mM dNTP,1U/L RNA酶抑制剂,2.5pmol...

            【关键词】 293AUCP2SYBR

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            【中文期刊】 万春和  林甦  等 《福建农业学报》 2010年25卷4期 387-391页

            【摘要】 针对H9亚型禽流感HA基因保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR,RRT-PCR),最低检测限为8.33×102拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍....

            【关键词】 H9亚型禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(RRT-PCR)

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