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【中文期刊】 康赟 林福玉 等 《实验动物科学》 2010年27卷4期 15-20页ISTIC
【摘要】 目的 构建小鼠Bpi条件基因打靶载体,为建立Bpi条件基因打靶小鼠模型和深入研究Bpi基因功能奠定基础.方法 采用Cre/LoxP系统,选择小鼠Bpi基因第2、3外显子作为条件性敲除的目的 片段,并在其两侧插入LoxP位点;运用LA-PCR...
【关键词】 杀菌/渗透性增强蛋白(Bpi)；条件基因打靶载体；同源重组；
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【中文期刊】 段素素 张云 等 《基础医学与临床》 2006年26卷6期 593-596页ISTICCA
【摘要】 目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择.方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载...
【关键词】 Cre重组酶；Cre-loxP条件性基因打靶；腺病毒载体；
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【学位论文】 作者：林炤华 导师：王义权 周常文 厦门大学 生物学 细胞生物学（硕士） 2009年
【摘要】 目的： 构建ADAM10条件性基因打靶载体，为制备ADAM10条件性基因敲除的小鼠模型和研究ADAM10基因的功能奠定基础。 方法： 运用长片段PCR技术，从129/SVJ小鼠基因组中分步扩增ADAM10基因第...
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【中文期刊】 许媛 魏伟 等 《安徽医科大学学报》 2023年58卷7期 1082-1086页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建小鼠TDO2 基因条件性敲除打靶载体,为建立 TDO2 基因条件性敲除小鼠奠定基础.方法 根据CRISPR/Cas9 技术原理,设计并构建单链向导RNA(sgRNA)和Donor 载体,以 TDO2-201(ENSMUST0000...
【关键词】 TDO2；基因敲除；CRISPR/Cas9；
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【中文期刊】 毛春明 杨晓 等 《遗传学报》 2003年30卷5期 407-413页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 构建了含有角质细胞特异性角质素5启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pK5-Cre-hGH.以显微注射的方法将4.2 kb的转基因片段K5-Cre-hGH引入小鼠基因组,共注射720枚受精卵,其中695枚移植至29...
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【中文期刊】 郝振明 杨晓 等 《遗传学报》 2002年29卷5期 424-429页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 构建了含有软骨组织特异性Ⅱ型胶原A1启动子和Cre重组酶基因的转基因载体pcol2A1-Cre.323枚小鼠受精卵经显微注射引入转基因片段后,分别移植至14只假孕母鼠的输卵管使其发育.共得到仔鼠52只,PCR鉴定结果显示其中10只小鼠基因组...
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【中文期刊】 王各各 李娇娜 等 《中国医科大学学报》 2012年41卷12期 1068-1072页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体.方法 以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MuhiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性...
- 概要：
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【中文期刊】 张传山 李峰 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷9期 68-76页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用EL350基因工程菌进行同源重组,成功进行基因敲除已有报道,但利用该系统进行兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase,HPRT)基因突变和基因打靶方...
【关键词】 Red重组；次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因；基因敲除；
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【中文期刊】 余飞 钱丽萍 等 《实验动物与比较医学》 2016年36卷2期 87-92页ISTICCA
【摘要】 目的 制备微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠.方法 构建miR-302s打靶载体,通过电穿孔的方法转染胚胎干细胞(ES细胞),用正负筛选法筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定和Southern分析.利用显微注射技术将正确同源重组的E...
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【中文期刊】 孙筱品 董玉梅 等 《动物医学进展》 2019年40卷4期 16-21页
【摘要】 Neuritin(Nrn1)是神经营养因子家族的成员,能够维持神经元的存活和突起的生长,在神经系统发育和再生中起重要作用.为了解Neuritin基因在整体动物水平的系统生物学功能,通过PCR扩增Neuritin基因片段,将该片段用In-fu...
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【中文期刊】 刘晙玭 汪智琼 等 《中国男科学杂志》 2015年9期 7-13页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的：体外实验已证实S-SOX5蛋白转录调节运动纤毛基因Spag6，为进一步探索其在体内的作用，拟构建S-Sox5基因的敲除载体。方法利用新型DNDF-7和携带LoxP位点的LPL4载体，选择S-Sox5基因第1外显子作为条件性敲除目的片段...
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【中文期刊】 刘英 刘运强 等 《福建医科大学学报》 2007年41卷2期 97-100页ISTIC
【摘要】 目的 构建用于小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶的载体,为产生Znf230基因敲除的小鼠模型准备条件.方法 设计和合成引物,经PCR从小鼠的基因组中扩增出5'同源臂、3'同源臂及锚定序列,长度分别为4,4,1 kb的片段,反向插入pB...
【关键词】 DNA结合基因蛋白质类；基因；聚合酶链反应；
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【中文期刊】 杨蕾蕾 吴壮 等 《军事医学科学院院刊》 2005年29卷3期 219-222页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:建立平滑肌细胞特异表达Cre重组酶的转因小鼠.方法:用分子克隆的方法构建含有α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)启动子、Cre重组酶基因和polyA的转基因载体α-SMA-Cre.以显微注射的方法将5.3 kb的转基因片段引入小鼠基因组.通...
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【中文期刊】 王剑 张莉 等 《军事医学科学院院刊》 2005年29卷1期 38-40,44页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法:构建了心肌细胞特异性表达Cre重组酶的转基因载体.该载体通过显微注射被导入小鼠受精卵中,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠.利用PCR检测子代小鼠Cre重组酶整合情况.通过...
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【中文期刊】 周江 杨晓 等 《生物技术通讯》 2002年13卷6期 415-419页ISTICCA
【摘要】 组织特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠是进行组织特异性条件敲除研究的关键.采用PCR扩增大鼠胰岛素基因705 bp启动子指导Cre在胰岛细胞中特异表达;同时采用改构的Cre重组酶基因,在其5'端添加有真核核糖体结合序列和核定位序列使Cre重...
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【中文期刊】 赵永刚 唐小千 等 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2011年29卷1期 10-15页
【摘要】 副溶血弧菌(Ⅵbrio parahaemolyticuss,VP)是我国海水养殖鱼、虾、贝类的重要病原,其主要致病因子热不稳定性溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)的功能和致病性仍不十分清楚.本研究利用PCR技术从...
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【中文期刊】 彭礼繁 《广东畜牧兽医科技》 2009年34卷4期 3-7页
【摘要】 基因打靶是通过外源DNA与染色体DNA同源序列之间的重组来改造基因组特定位点,从而改变生物遗传特性的方法.它可以纠正染色体特定位点上的自发突变,恢复细胞正常的生理功能;也可以把理想突变引入到基因组的某一位点,使之稳定地遗传下去.本文从基因打...
【关键词】 基因打靶；
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【中文期刊】 张蕾 杨兴元 等 《吉林大学学报（理学版）》 2009年47卷6期 1328-1333页
【摘要】 通过建立高效率"双无"(无启动子、无polyA)打靶载体MSTN-GFP和MSTN-neo及新生绵羊和胎儿成肌细胞的培养和鉴定, 优化了培养条件, 改善了细胞状态, 为提高打靶效率及体细胞克隆提供了稳定的核移植供体;同时无启动子打靶载体的构...
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【中文期刊】 周江 程萱 等 《中国科学C辑》 2001年31卷4期 335-342页
【摘要】 Smads家族是转化生长因子TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,SMAD2属于受体激活的SMADs.Smad2基因在多种肿瘤中发生突变,是一种可能的肿瘤抑制基因.Smad2基因完全剔除导致小鼠在胚胎期6.5d死亡.为了研究Smad...
【关键词】 Smad2 ES细胞 Cre重组酶 条件基因打靶；
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【中文期刊】 王友亮 程萱 等 《中华肝脏病杂志》 2004年12卷3期 163-166页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法利用聚合酶链反应(PCR)获得小鼠肝细胞特异性启动子--白蛋白启动子,指导Cre重组酶在肝细胞中特异表达.通过受精卵显微注射的方法,将转基因载体导入小鼠受精卵中,获得转基因小鼠.利...
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【中文期刊】 郁胜强 胡以平 等 《第二军医大学学报》 1999年20卷6期 346-349页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆小鼠的多囊肾病1(PKD1)基因,构建PKD1基因的Knockout载体,为产生PKD1基因缺陷小鼠品系准备条件.方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,扩增小鼠PKD1基因部分序列为探针,应用噬斑原位杂交技术筛选129SvTer小鼠...
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【中文期刊】 林炤华 杨丽华 等 《中国优生与遗传杂志》 2009年17卷12期 17-19页ISTIC
【摘要】 目的 构建小鼠ADAM10条件性基因打靶载体,为建立ADAM10条件性敲除小鼠模型奠定基础.方法 以正常小鼠(129/Svj)基因组DNA为模板,采用长片段PCR方法,扩增小鼠ADAM10基因第2外显子及其侧翼序列.通过引入LoxP位点和T...
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