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【中文期刊】 易明梅 冯华 等 《中国奶牛》 2007年10期 45-47页
【摘要】 奶牛乳房炎是奶牛最常见、防治最难、花费最多的疾病之一,给奶牛业生产造成了巨大的经济损失.本文就细胞因子、溶菌酶和疫苗等生物制剂在奶牛乳房炎防治中的作用逐一进行了分析,可为奶牛乳房炎的防治提供理论依据.
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：陈茜 导师：高荣 四川大学 基础医学 遗传学（硕士） 2007年
【摘要】 溶菌酶(lysozyme，LYZ)是一种专门作用于微生物细胞壁的水解细菌细胞壁中粘多糖β-1，4-糖苷键的胞壁质酶，是一种碱性蛋白质，存在于许多动物、植物和微生物中。研究发现，溶菌酶对革兰氏阳性细菌具有直接的溶解作用，催化革兰氏阳性菌细胞壁...
- 概要：
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【中文期刊】 谢三群 丛丽娜 等 《生物技术通报》 2011年4期 127-132页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在双壳类软体动物牡蛎体内,溶菌酶(Lysozyme)在实现宿主免疫防御,破坏和消除侵入体内的病原中发挥着重要的作用.根据GenBank已有的太平洋牡蛎溶菌酶的全长cDNA序列(GenBank:AB179775),通过RT-PCR技术,从太平...
- 概要：
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【中文期刊】 王明 刘宇婷 等 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2009年30卷6期 595-600页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化.方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列.以嵌合基...
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【中文期刊】 王新卫 何宏轩 等 《生物技术通报》 2008年5期 158-162页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用PCR技术,扩增禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段,将其克隆至pR质粒的T4噬菌体SOC基因C末端获得重组质粒pK-np,以此重组载体转化大肠杆菌Escherichia coli 2(E2),用溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1感染重组E2菌,...
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- 结论：
【中文期刊】 张泉 朱鸿飞 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 76-79页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了降低质粒DNA的生产成本,对经典碱裂解法中的溶液Ⅲ进行了改进,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为指示菌,用标准碱裂解和改进碱裂解法提取质粒pcDNKLYZ,以提取的质粒产量和质量为指标,判断优化碱性裂解法...
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【中文期刊】 周翔 莫宏波 等 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 2006年27卷6期 784-790页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨溶菌酶N端多肽片段基因的重组并在原核中表达,研究该片段与晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的结合作用.方法:从SD大鼠外周血白细胞中抽提总RNA,经逆转录并扩增大鼠溶菌酶N...
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- 结论：
【中文期刊】 王海丽 王长军 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2006年22卷2期 178-180页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 克隆及表达猪链球菌2型(S.suis 2)人源分离株Habb截短溶菌酶释放蛋白(MRP)基因.方法: 根据S.suis 2 mrp基因的序列设计引物, 克隆和分析江苏海安患者分离株Habb截短mrp基因(tmrp), 构建原核表达质...
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【中文期刊】 范红结 陆承平 等 《微生物学报》 2004年44卷1期 54-57页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 根据猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)国外分离株的溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein,MRP)的基因序列,设计并合成一对引物,利用PCR技术扩增了江苏分离株的开放阅读框29...
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【中文期刊】 吕爽 雷连成 等 《中国实验诊断学》 2010年14卷3期 372-375页ISTIC
【摘要】 目的 用PCR技术特异扩增人溶菌酶基因hLYZ cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-hLYZ.方法 采用EcoR Ⅰ/Not Ⅰ双酶切及PCR确认正确后,将人溶菌酶基因cDNA目的片段亚克隆到毕赤酵母表达载...
- 概要：
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【中文期刊】 李国才 居杏珠 等 《实用临床医药杂志》 2005年9卷7期 33-34,45页ISTICCA
【摘要】 目的制备人溶菌酶(hLYZ)基因免疫抗体.方法用多聚乙酰亚胺包裹重组质粒pcDNA3LYZ,经肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,以间接ELISA检测免疫血清中hLYZ抗体的效价,所得抗体用Western-blotting法检测转基因小鼠乳汁...
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【中文期刊】 冯瑄 杨晓燕 等 《生物技术》 2004年14卷6期 3-5页ISTICCA
【摘要】 目的是构建抗菌肽B(Cecropin B)和人溶菌酶(hLyso)的融合蛋白表达载体.从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因,并将其融合到人溶菌酶基因的5'端.将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确...
【关键词】 抗菌肽Cecropin B；人溶菌酶；融合蛋白；
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【中文期刊】 贾向志 袁汉英 等 《第四军医大学学报》 2001年22卷22期 2068-2072页ISTICCA
【摘要】 目的利用巴斯德毕赤(Pichia pastoris)酵母真核表达系统,构建真核表达载体pPIC9K与人溶菌酶基因(human lysozyme, hLY)的重组质粒pPIC9K-hLY,表达出具有活性的人溶菌酶. 方法此项研究在本实验室构建...
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【中文期刊】 江伟华 朱莲莲 等 《中国畜牧兽医》 2015年42卷1期 44-52页
【摘要】 试验旨在研究藏绵羊溶菌酶(lysozyme,LZM)1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏各组织中的表达情况、进化关系及抑菌活性.采用RT-PCR技术克隆藏绵羊LZM1基因,定量PCR检测LZM1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏...
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【中文期刊】 李萌 龙雨清 等 《畜牧与兽医》 2015年47卷11期 1-5页
【摘要】 为研究内溶素SAL-2和人溶菌酶hLYZ的联合抑菌作用,本研究通过PCR方法分别从携带SAL-2和hLYZ基因的质粒中扩增目的片段,连接至腺病毒穿梭载体的多克隆位点上,构建重组穿梭载体pShuttle-SAL和pShuttle-LYZ.成功...
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【中文期刊】 王永娟 朱善元 等 《畜牧与兽医》 2014年46卷2期 65-67页
【摘要】 在前期研究基础上,将经转座获得的杆状病毒重组穿梭质粒rBacmid-Rep、rBacmid-VP和rBacmid-LYZ共转染Sf9昆虫细胞,产生了表达人溶菌酶(hLYZ)的重组禽腺联病毒(rAAAV) (rAAAV-hLYZ):然后用纯化...
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【中文期刊】 王梅梅 万玲 等 《中国兽药杂志》 2014年3期 10-14页
【摘要】 采用cDNA末端快速扩增技术（ RACE），对鸡致病性大肠杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库（ SSH）中筛选得到家蝇溶菌酶1基因（（ Musca domestica lysozyme-1，MdL-1）进行扩增，测序分析得到一个全长为537 b...
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【中文期刊】 胡宇飞 江明锋 等 《中国畜牧兽医》 2013年40卷9期 46-51页
【摘要】 本研究对乐至黑山羊肾溶菌酶(LZLyK)基因进行了克隆、表达,并对其活性进行了测定.采用比较基因组技术,成功克隆了LZLyK基因,其cDNA长444 bp,编码147个氨基酸.同源性分析结果表明,氨基酸同源性与绵羊溶菌酶2(M32498.1...
- 概要：
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【中文期刊】 王安平 朱善元 等 《江苏农业学报》 2013年29卷3期 574-577页
【摘要】 为在毕赤酵母中表达人溶菌酶基因,根据已发表的人溶菌酶基因序列设计引物,扩增人溶菌酶全基因片段,将其克隆进巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-LYZ,经SacⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母GS115,经G418...
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【中文期刊】 沈诚 林源 等 《中国奶牛》 2011年4期 4-6页
【摘要】 通过比较注射人溶菌酶重组质粒pcDNAKLYZ的隐性乳房炎奶牛注射前后的奶样中细菌计数结果,对重组溶菌酶基因工程质粒治疗奶牛乳房炎的效果进行分析.对乳房炎患牛的156个乳区治疗前后312份奶样进行细菌培养,其中在注射前的乳样的培养结果中,阴...
- 概要：
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【中文期刊】 曹俊伟 马利兵 等 《浙江理工大学学报》 2010年27卷4期 649-653页
【摘要】 研究检测人溶菌酶/乳铁蛋白双基因重组质粒pEBH-IL在牛乳腺上皮细胞中的表达.采用脂质体转染技术,将pEBH-IL质粒DNA导入体外培养的牛乳腺上皮细胞中.加入G418对转染的细胞加压筛选,获得稳定转染的细胞.采用绿色荧光蛋白(EGFP)...
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【中文期刊】 王利娟 刘誉 《中国医学创新》 2010年07卷19期 5-8页CA
【摘要】 目的 应用基因重组技术,构建pET30a(+)与LY70的原核表达重组质粒.方法 采用PCR方法扩增LY70基因,经Nde I和Not I双酶切后插入相同酶切pET30a(+)载体,转化DH5α感受态细胞并进行阳性克隆筛选,用限制性内切酶酶...
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【中文期刊】 王宝松 单虎 等 《中国动物检疫》 2009年26卷4期 37-39页
【摘要】 根据猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)的基因序列,选取可能舍有抗原决定簇的两片段,各设计合成一对引物,使之含有共同的酶切位点.通过T4DNA连接酶串联两片段,构建原核表达载体pET32a-mrp-...
- 概要：
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【中文期刊】 戴晏 朱建国 等 《中国兽药杂志》 2009年43卷11期 39-41页
【摘要】 对上海市光明荷斯坦金山种奶牛场采集的临床型和隐性乳房炎患牛的94份奶样进行细菌培养,在注射抗生素的30份奶牛乳样的培养结果中,阴性率为16.67%(5/30),阳性率为83.33%(25/30) ,菌落计数结果均值为874.93;在注射人溶...
【关键词】 奶牛乳房炎；重组质粒pcDNAKLYZ；抗生素；
- 概要：
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【中文期刊】 尹召华 成大荣 等 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 2009年30卷3期 54-56页
【摘要】 为评价基因治疗奶牛乳腺炎的生物安全性,以3头患隐性乳腺炎的奶牛作为试验对象,通过乳房基部穿刺注射接种携带人溶菌酶基因的乳腺特异性表达重组质粒p215C3LYZ(1 600μg·头~(-1)),24 h后以相同剂量重复注射1次.定期采集试验奶...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 吉玉辉 孙怀昌 等 《中国兽医科学》 2008年38卷11期 919-924页
【摘要】 将大肠杆菌DH5α在含胸腺嘧啶核苷和三甲氧苄二氨嘧啶的琼脂平板上培养,获得了遗传稳定的ThyA-大肠杆菌DH5α21株.用PCR扩增野生菌和ThyA-大肠杆菌的thyA基因,将测定的序列与野生型thyA基因相比,6号突变株的thyA基因第9...
【关键词】 ThyA-大肠杆菌；染色体-质粒平衡致死系统；构建；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 郑继平 郭桂英 等 《中国兽医学报》 2008年28卷11期 1273-1276页
【摘要】 从猪链球菌2型(SS2)四川分离株分离溶菌酶释放因子基因mrp,将其克隆至T载体上,再将asd基因插入到重组质粒的抗生素抗性基因中,电击转入asd缺陷型沙门菌X4072中表达,形成依赖asd基因的质粒-宿主平衡致死系统.经酶切、PCR及蛋白...
【关键词】 猪链球菌2型；溶菌酶释放因子MRP；沙门菌；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 薛方明 孙怀昌 等 《中国兽医学报》 2007年27卷1期 98-102页
【摘要】 将人溶菌酶(human lysozyme,hL YZ)cDNA插入由pcDNA3改造而成的pcDNAK表达载体,用获得的重组载体pcDNAKLYZ转染COS-1细胞,经免疫荧光试验证明能进行正确表达.将重组载体注射于哺乳母鼠,取其乳汁进行溶...
- 概要：
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【中文期刊】 易明梅 朱建国 等 《中国奶牛》 2007年8期 10-13页
【摘要】 用人溶菌酶cDNA重组质粒治疗奶牛乳房炎的初步试验结果显示,该基因药物对奶牛乳房炎具有良好的预防和治疗效果.为验证该基因药物在大规模推广使用前对环境的安全性,按照农业部颁布的《农业转基因生物安全评价管理办法》要求,选择地处相对偏僻的某奶牛场...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张泉 于可响 等 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 2007年28卷1期 17-20页
【摘要】 在初步筛选获得性价比较好的大肠杆菌高密度发酵培养基的基础上,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为模型,用150 L发酵罐进行工艺放大研究,通过对细菌生长密度(D600 nm值)、质粒产量的比较和分析,探讨用于重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 薛方明 房浩霞 等 《食品科技》 2004年z1期 331-334页
【摘要】 用乳腺特异表达人溶菌酶(hLYZ)基因的重组质粒作为防治奶牛乳房炎的基因药物,初步试验结果表明具有良好的治疗效果.为了证明该基因药物临床使用的安全性,本研究用纯化的重组质粒注射小鼠、奶牛犊和奶牛,对质粒注射动物的临床表现、质粒在牛乳中的残留...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蒋春茂 孙怀昌 等 《中国畜牧兽医》 2004年31卷12期 20-21页
【摘要】 为了提高牛奶品质,降低牛奶细菌含量,使其性质更接近于人奶,将表达人溶菌酶基因的动物乳腺特异表达载体注射到奶牛的乳区,然后根据基因注射前、后奶样的C.M.T试验结果和溶菌酶的表达量判定效果.试验结果表明,重组质粒在奶牛乳腺中能表达有活性的人溶...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙怀昌 于锋 等 《畜牧兽医学报》 2004年35卷2期 227-232页
【摘要】 将两种自行构建的表达人溶菌酶基因的重组质粒注射到患病奶牛的乳腺,经CMT试验证明对临床型和隐性乳房炎具有治疗作用.将其中的p205C3LYZ注射入奶牛乳腺,经微球菌溶解试验证明溶菌酶的表达量达到1.18 μg/ml以上,表达至少维持8 d....
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 欧瑜 陆承平 《农业生物技术学报》 2002年10卷1期 72-75页
【摘要】 根据猪链球菌2型(Streptococcussuistype 2)溶菌酶释放蛋白(muramidase-released protem,MRP)基因序列,设计和合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株HA9801的基因组DNA为模板,通过PC...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李丹 李成 等 《生物技术通报》 2014年4期 139-146页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用枯草芽孢杆菌WB600（Bacillus subtilis WB600）在体外表达海刺参溶菌酶（Stichopus japonicus lysozyme，SjLys）蛋白。通过构建克隆质粒pMD18-P43-SjLys，将B. subt...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙璐 刘志文 等 《生物技术通报》 2014年6期 150-154页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过基因重组等技术构建重组海参溶菌酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌，并对此基因工程菌进行生长曲线的测定和稳定性分析。结果表明，海参溶菌酶基因特异引物在400 bp处扩增出特异性条带，与预期的海参溶菌酶基因大小一致；重组表达质粒pHT43-SjLy...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马千里 张巧 等 《第三军医大学学报》 2009年31卷10期 922-925页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式.方法 分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素(Ply)基因序列,构建重组质粒pcDNA3.1-PspA'和pcDNA3.1-PBD(PBD为Ply 点...
【关键词】 肺炎链球菌；肺炎链球菌表面黏附素A；肺炎链球菌表面蛋白A；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王秀霞 丛丽娜 等 《生物工程学报》 2009年25卷2期 189-194页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将本实验室已分离到的海刺参(Stichopusjaponicus)i型溶菌酶的基因(GenBank Accession No.EF036468)亚克隆进原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET32a(+)一SjLys,转化至大肠杆...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 韦敬土 刘晓彤 等 《中国生物制品学杂志》 2012年25卷6期 689-692页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达人溶菌酶( Human lysozyme,hLY)-人碱性成纤维细胞生长因子(Human basic fibroblast growth factor,hbFGF)融合基因,并分析融合蛋白的hLY活性.方法 从人全血中...
【关键词】 溶菌酶；碱性成纤维细胞生长因子；融合基因；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 高金湖 唐存多 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷3期 297-301页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLY)-木聚糖酶(Xylanases,Xyn Ⅱ)融合基因.方法 通过PCR技术将hLY基因与Xyn Ⅱ基因连接,中间插人肠激酶识别位点序列;将其克隆至载体pPIC9K上,构建...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 付世新 齐长学 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷7期 724-726页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 原核表达并初步纯化牛乳溶菌酶(Bos taurus lysozymel,LYZ1).方法 人工设计并合成LYZ1基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET-32a,构建重组表达质粒pET-32a-LYZ1,转化大肠杆菌BL21(DE3)...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 欧阳萍 高宇 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷8期 829-833页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 原核表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLYZ)和抗菌肽tachyplesins融合蛋白,并检测其抗菌活性.方法 人工合成抗菌肽tachyplesins基因和linker,与pMD18-T-hLYZ上切下的hLYZ基因融合,...
【关键词】 溶菌酶；抗菌肽；Tachyplesins；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 欧阳萍 雷连成 等 《中国生物制品学杂志》 2009年22卷6期 544-547页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在大肠杆菌中表达人溶菌酶(hLYZ)基因,并检测其生物学活性.方法 将人溶菌酶基因克隆至带有GST融合标签的原核表达载体pGEX-4T-1上,转化大肠杆菌BL21(DE3),终IPTG诱导表达.表达产物经亲和层析纯化后,进行Weste...
- 概要：
- 方法：
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