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            【中文期刊】 王岚  杨世忠  等 《中国老年学杂志》 2006年26卷9期 1217-1219页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 包装乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒并进行滴度测定,为下一步构建乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠奠定基础.方法 将乙型肝炎病毒(adr)全基因组插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了乙型肝炎(adr)重组逆转录病毒载体,鉴...

            【关键词】 乙型肝炎病毒(adr)重组逆转录病毒载体转染

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            【中文期刊】 何小洪  金丽华  等 《中国心血管杂志》 2002年7卷1期 21,24页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的探讨抗DNA酶B检测用于风湿性心脏病诊断的价值.方法检测43例风湿性心脏病伴活动性风湿热,39例风湿性心脏病不伴风湿热活动和40例非风湿性心脏病(对照组)病人血清的抗DNA酶B抗体,并进行对比.结果风湿性心脏病伴活动性风湿热组,风湿性心...

            【关键词】 风湿性心脏病抗DNA酶B滴度测定

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            【中文期刊】 单路娟  刘越坚  等 《大连医科大学学报》 2010年32卷4期 483-485页ISTICCA

            【摘要】 [目的]研究一种简便、快速的能获取较高病毒滴度的体外培养方法.[方法]用质脂体转移法将逆转录病毒载体pLXIn转染到包装细胞PA317中,用G418筛选出抗性克隆,扩大培养,再收集上清,并测定病毒滴度.比较不同方法产生病毒的多少,为提高病毒...

            【关键词】 逆转录病毒滴度测定方法比较

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            【中文期刊】 郭富起  《淮海医药》 2004年22卷5期 394-394页CA

            【摘要】 目的利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg,对弱阳性及可疑结果进行分析探讨.方法按说明书操作测定待测样本HBsAg,对弱阳性及可疑结果加做乙肝五项指标,并进行HBsAg滴度测定.结果在55例弱阳性中检出18例假阳性,误诊率为0.1...

            【关键词】 肝炎表面抗原,乙型酶联免疫吸附测定滴度试验

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            【中文期刊】 杨靖  宋波  等 《中原医刊》 2007年34卷10期 32-33页

            【摘要】 目的 构建可用于神经系统基因功能研究和基因治疗的慢病毒RNAi载体系统,并建立一种方便、快捷的慢病毒滴度测定方法 .方法 三质粒系统:PLK0.1-puro、△8.2、水疱性口炎病毒G糖蛋白(VSV-C)共转染293T细胞,产生慢病毒RNA...

            【关键词】 慢病毒载体RNA干扰滴度测定

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            【中文期刊】 李慧  刘永娣  等 《中国人兽共患病学报》 2015年31卷2期 143-147页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 研究狂犬病病毒CTN-1株在鸡胚细胞驯化过程中的特性.方法 利用RT-PCR反应扩增CTN-1株19个代次的G蛋白基因,获得cDNA进行序列测定;并以免疫荧光法测定各代次毒株在细胞中的滴度.结果 序列测定显示:CTN-1株在鸡胚细胞驯...

            【关键词】 狂犬病病毒CTN-1G蛋白

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            【中文期刊】 孙鹏宇  张艳玲  等 《南方医科大学学报》 2011年31卷2期 234-238页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 将目前测定腺病毒滴度常用的OD260法、荧光定量PCR法、绿色荧光蛋白标记法、壳蛋白免疫法、细胞病变(CPE)法进行比较研究,分析和讨论各种方法的优缺点.方法 4种重组腺病毒(Ad-G-AT2R-EGFP、Ad-CMV-EGFP、Ad...

            【关键词】 腺病毒病毒滴度测定壳蛋白免疫法

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            【中文期刊】 李新友  王金堂  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2008年29卷1期 54-56页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 为了研究人骨形态发生蛋白-7(hBMP7)导入骨缺损模型中的治疗作用,构建重组腺病毒载体.方法 将hBMP7基因全长定向克隆入穿梭质粒pACCMV-plpA,构建pACCMV/rhBMP7穿梭质粒,应用磷酸钙-DNA共沉法将穿梭质粒及...

            【关键词】 骨形态发生蛋白-7腺病毒载体基因转移

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            【中文期刊】 江千里  王健民  等 《第一军医大学学报》 2003年23卷10期 1101-1103页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的以带有绿色荧光蛋白(GFP)标记基因的重组逆转录病毒为例,对经典方法与批量快速病毒滴度法(LaSRT)测定病毒滴度进行比较研究.方法(1)经典方法:于6孔培养板分别接种NIH3T3细胞2×105/孔,培养12 h后分别以0.5 m1、5...

            【关键词】 流式细胞术基因重组逆转录病毒病毒滴度测定

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            【中文期刊】 方成  陈卓  等 《重庆医学》 2015年44卷12期 1662-1663,1666页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的 建立无标准品的酶联免疫吸附测定(ELISA)抗体滴度定量方法.方法 对血清抗体ELISA检测设置非特异、阴性对照、特异和总抗体检测组.显色早期的时间-吸光度数据经线性拟合的斜率即吸光度变化速度 ,分别记为ν0 、νC 、νS 、νT ...

            【关键词】 酶促反应动力学酶联免疫吸附测定抗体滴度

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            【中文期刊】 安群星  穆士杰  等 《生物技术通讯》 2007年18卷6期 891-893页ISTICCA

            【摘要】 目的:包装含人CCR5Delta32基因的重组慢病毒并测定其滴度,用于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的基因治疗研究.方法:从CCR5Delta32突变个体外周血单个核细胞(PBMC)中提取人基因组DNA,利用PCR技术扩增CCR5Delt...

            【关键词】 CCR5Delta32基因慢病毒载体包装

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            【中文期刊】 耿满满  朱文华  等 《中国科技论文在线精品论文》 2016年9卷15期 1577-1586页

            【摘要】 目的:建立安全稳定的第三代慢病毒包装体系并生产出可用于干扰大鼠IRF1基因的干扰病毒颗粒.方法:1)利用带有荧光的高表达质粒对包装的质粒比例、转染试剂进行探索,根据流式细胞仪(fluorescence activated cell sort...

            【关键词】 分子生物学第三代慢病毒载体滴度测定

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            【中文期刊】 贺雯  《现代医药卫生》 2012年28卷7期 1050页

            【摘要】 目的 探讨如何杜绝梅毒患者甲基胺红不加热血清试验(TRUST)滴度检测中的假阴性.方法 利用酶联免疫吸附测定(EHSA法)检测585名梅毒患者,并同时对其血清进行TRUST滴度检测.结果 在585例中,原倍血清TRUST滴度阳性260例,原...

            【关键词】 梅毒TRUST滴度假阴性反应

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            【中文期刊】 王敏  程政  等 《临床医学工程》 2010年17卷10期 12-14页

            【摘要】 目的 建立携骨形态发生蛋白2基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-hBMP2-GFP)感染滴度测定的 方法 ,并制备高滴度的rAAV-hBMP2一GFP病毒液,为进一步实验hBMP2诱导大鼠牙槽骨骨缺损修复的基因治疗提供有利的工具. 方法 通...

            【关键词】 rAAV-hBMP2-GFPAAV-HT1080细胞感染滴度

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            【中文期刊】 楚巧鸿  冯霞  等 《病毒学报》 2024年40卷3期 492-499页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究旨在建立一种快速、通用、高通量的病灶形成测定法(Focus-forming assay,FFA),用于痘苗病毒(Vaccinia virus,VACV)的研究.首先采用经典噬斑染色法与免疫噬斑法对不同VACV代表性毒株(Western...

            【关键词】 痘苗病毒噬斑实验病灶形成实验

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            【中文期刊】 余春梅  陈昕  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷8期 771-774页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 建立用于绿色荧光标记的重组人偏肺病毒(GFP-rhMPV)空斑形成滴度测定方法.方法 基因组中插入绿色荧光蛋白基因的hMPV全序列cDNA质粒和主要蛋白质表达质粒转入细胞293T后获得感染性重组hMPV.GFP-rhMPV在Vero-...

            【关键词】 人偏肺病毒空斑形成实验滴度测定

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            【中文期刊】 庞小娟  赵晓琴  等 《临床检验杂志》 2010年28卷1期 59-62页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建人细胞分化抑制因子3(Id3)重组腺病毒载体,制备并鉴定人Id3重组腺病毒,为研究Id3基因在细胞中的表达及其对细胞功能的影响奠定基础.方法 以pUC57-Id3为模板扩增人Id3基因,克隆到质粒pUC18中,pUC18-Id3经...

            【关键词】 细胞分化抑制因子3重组腺病毒滴度测定

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            【会议论文】黄维金 2011年中国药学大会暨第11届中国药师周 2011年

            【摘要】 目的:研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。
              方法:制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释2个稀释度,每个稀释度平行5孔,对标...

            【关键词】 重组痘苗病毒病毒滴度测定国家标准品

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            【学位论文】 作者:罗翀 导师:张雪洪   李彤   上海交通大学   生物学 生物工程(硕士) 2009年

            【摘要】 在轮状病毒疫苗的开发过程中,建立准确稳定规范的轮状病毒疫苗滴度测定方法至关重要。为此我们针对lgCCID50-ELISA法测定轮状病毒疫苗滴度的误差来源进行了研究,最终确定:采用购自ECACC的MA-104细胞,在本公司传代6~10次后用于...

            【关键词】 轮状病毒疫苗滴度测定

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            【学位论文】 作者:杨靖 导师:许予明   郑州大学   临床医学 神经病学(硕士) 2007年

            【摘要】 脑水肿是缺血性脑血管病的基本病理变化之一,与疾病的预后密切相关,目前对脑水肿的治疗尚不能令人满意.近期研究发现AQP4(aquaporin-4)在脑组织水的运输中起关键性作用,缺血后脑内.AQP4蛋白表达上调可能是缺血后脑水肿的重要诱发因素...

            【关键词】 水通道蛋白4慢病毒载体

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            【学位论文】 作者:徐卫国 导师:陈安民   华中科技大学   临床医学 外科学(骨外)(博士) 2003年

            【摘要】 第一部分含人反义VEGF基因腺相关病毒载体的包装及滴度测定;目的:包装高滴度的含人反义VEGF基因腺相关病毒载体.方法:将已克隆到表达质粒pUF3-anti-hVEGF165基因,通过三种腺相关病毒前体质粒(包装质粒-pXX2,腺病毒辅助质...

            【关键词】 腺相关病毒载体反义VEGF基因

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            【中文期刊】 陈婷婷  曹园芝  等 《中国组织工程研究》 2018年22卷24期 3875-3879页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:趋化素在动脉粥样硬化中的表达水平上调,趋化素可能参与了动脉粥样硬化的病理过程.目的:应用腺病毒介导的RNA干扰技术,构建并有效沉默趋化素基因的表达体,为研究其对动脉粥样硬化机制奠定实验技术基础.方法:以小鼠趋化素基因mRNA序列作为干...

            【关键词】 趋化素腺病毒RNA干扰

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            【中文期刊】 杨简  范致星  等 《中国老年学杂志》 2017年37卷17期 4175-4176页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建含miR-24基因的重组腺病毒,为后期研究miR-24在大鼠颈动脉球囊损伤所致血管再狭窄(RS)中的作用及分子机制奠定基础.方法 PCR钓取目的基因miR-24,连接入穿梭载体GV139.采用AdMax腺病毒包装系统,将构建的mi...

            【关键词】 miR-24腺病毒载体

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            【中文期刊】 王丹丹  陶贵周  《中国循环杂志》 2017年32卷z1期 55-56页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的:构建腺病毒 C/ebp delta 载体,观察其对小鼠心肌细胞的转染效率,研究其对缺血性心脏病的治疗作用.方 法: 以 基 因 合 成 法 获 取 C/ebp delta, 酶 切 后 插 入p-DC316-mCMV-EGFP, 转 ...

            浏览:43 被引:0 下载:8
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            【中文期刊】 毕雪飞  陶贵周  《中国循环杂志》 2017年32卷z1期 56页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的:构建慢病毒 Hoxa3 载体,观察其对人脐静脉血管内皮细胞的转染效率,研究其对血管新生的影响,并探讨 Hoxa3促进血管新生的机制.方法:以基因合成法从 PCR 文库获取人 Hoxa3 基因,酶切后插入慢病毒骨架载体,以三质粒联合转染...

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            【中文期刊】 许常青  陈伟  等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷10期 1417-1420页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV) ORFK15P基因的慢病毒载体,并对其在293T细胞内的表达进行研究.方法 PCR法扩增获得KSHV K15P基因,限制性内切酶Nhe Ⅰ酶切和无缝克隆法构建重组慢病毒载体pCDH-CMV-K1...

            【关键词】 卡波肉瘤相关疱疹病毒K15P基因慢病毒

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            【中文期刊】 刘厚广  刘卓  等 《中国老年学杂志》 2015年35卷22期 6345-6347,6473页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 探讨慢病毒介导的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡的影响.方法 依据CDK2基因序列,设计3条靶向干扰CDK2的序列,构建CDK2-shRNA慢病毒载体,质粒转染人胚肾细胞株(HEK293)细胞...

            【关键词】 黑色素瘤细胞周期蛋白依赖性激酶慢病毒载体

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            【中文期刊】 杨超君  杨俊  等 《中华老年心脑血管病杂志》 2015年17卷8期 855-858页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建和鉴定大鼠RP105重组腺病毒载体,并获得具有一定滴度的重组腺病毒表达载体Ad-RP105-EGFP.方法 PCR钓取目的基因RP105,连接入穿梭载体GV135(CMV-MCS-EGFP),形成连接产物.连接好的重组腺病毒载体C...

            【关键词】 腺病毒科聚合酶链反应质粒

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            【中文期刊】 杨雪  宋涛  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2015年6期 743-748页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建携带 CIP2A shRNA 重组腺相关病毒载体,制备靶向性沉默 CIP2A 表达的高浓度重组腺相关病毒。方法设计合成 CIP2A shRNA,退火形成双链与 pDC316-EGFP-U6质粒 BamHⅠ和 HindⅢ双酶切产物相...

            【关键词】 CIP2ARNA 干扰重组腺相关病毒

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            【中文期刊】 王平  陈祥俊  等 《中国实验血液学杂志》 2015年23卷3期 637-641页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:通过构建SARI慢病毒表达载体,探讨SARI基因过表达对K562细胞生物学功能的影响.方法:采用RT-PCR方法获得目的基因并重组pLOV.CMV.GFP质粒,构建pLOV.CMV.GFP-SARI表达载体.通过测序鉴定、病毒包装和滴...

            【关键词】 SARI病毒感染凋亡

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            【中文期刊】 王露  翟玮玮  等 《南方医科大学学报》 2014年34卷10期 1475-1480页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础.方法 以人Fas基因...

            【关键词】 慢病毒siRNAFas

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            【中文期刊】 范致星  杨简  等 《中华老年心脑血管病杂志》 2014年8期 853-855页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建并鉴定大鼠miR-22腺病毒载体,制备具有一定滴度含miR-22基因的重组腺病毒,为后期研究miR-22在心肌缺血再灌注损伤中的作用及分子机制奠定基础。方法化学合成目的基因序列(含酶切位点),对目的基因进行PCR扩增、酶切,酶切后...

            【关键词】 腺病毒科微RNAs心肌再灌注损伤

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            【中文期刊】 王伟卓  程一钊  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2014年35卷2期 175-181页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨大骨节病差异表达基因PAPSS2在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达及其对碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞矿化的影响.方法培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,观察PAPSS2在成骨细胞分化过程中的基因及蛋白表达情况;用慢...

            【关键词】 大骨节病成骨细胞基因功能

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            【中文期刊】 郑见宝  耿智敏  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2014年3期 415-418页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建含有人神经菌毛素-1(NRP-1)基因和3 Flag标签蛋白基因的腺病毒载体,为研究该基因对肿瘤细胞与其周围间质细胞的相互作用的影响提供实验基础。方法应用AgeⅠ和NheⅠ限制性内切酶酶切含有人 NRP-1基因的质粒,再将其与酶切...

            【关键词】 NRP-1基因重组腺病毒载体肿瘤微环境

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            【中文期刊】 罗剑刚  孙涛  等 《山东大学学报(医学版)》 2014年52卷3期 23-26,32页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建核转录因子κB(NF-κB) p65基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并转染体外培养的大鼠脊髓神经元,观察其沉默效率.方法 针对大鼠NF-κB p65基因特异性序列,设计3条NF-κB p65-siRNA序列及1条阴性对照序列,...

            【关键词】 RNA干扰核转录因子κB p65慢病毒

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            【中文期刊】 勒娟  孙勇  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2014年35卷6期 795-799页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建含有人肠三叶因子基因cDNA的腺病毒载体,并观察其对肠上皮细胞的感染能力.方法 利用PCR技术扩增hITF基因cDNA全长序列,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒,转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1大肠杆菌株BJ5183感受态细胞...

            【关键词】 肠三叶因子腺病毒肠上皮细胞

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            【中文期刊】 潘腾飞  陈先国  等 《安徽医科大学学报》 2013年48卷4期 346-348页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 应用RNA干扰技术降低前列腺癌DU145细胞株Raptor基因表达水平,并建立稳定转染细胞株.方法 针对Raptor基因设计合成siRNA,鉴定、测序正确后转染293T细胞观察基因表达情况;构建Raptor-shRNA慢病毒载体;进行...

            【关键词】 shRNARaptor前列腺癌

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            【中文期刊】 祁馨卉  崔慧霞  等 《中国医科大学学报》 2013年42卷8期 726-729页ISTICPKUCABP

            【摘要】 目的 构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达.方法 应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并应用脂质体法转染293T...

            【关键词】 GPC3RNA干扰慢病毒载体

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            【中文期刊】 刘晓军  王娜  等 《中国癌症杂志》 2013年11期 857-862页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 背景与目的:前列腺癌抗原3(prostate cancer antigen 3,PCA3)作为一种长链非编码RNA(lncRNA)已被证实在前列腺癌中高度特异性表达,暗示其可能在前列腺癌中发挥重要作用,为深入研究,我们将完整的PCA3基因转...

            【关键词】 前列腺癌前列腺癌抗原3真核表达载体

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            【中文期刊】 李松林  朱妍妍  等 《中国老年学杂志》 2013年33卷23期 5906-5908页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建人白细胞介素32γ(IL-32γ)基因重组腺病毒载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 从表达质粒pDONR223中扩增目的片段IL-32γ,定向克隆至穿梭载体pShuttle-GFP-CMV获得pShuttle-(△GF...

            【关键词】 人白细胞介素32γ腺病毒基因治疗

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            【中文期刊】 刁泽正  燕国清  等 《中国组织工程研究》 2012年16卷20期 3759-3762页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:实验为基因治疗退变椎间盘实验的前期部分,旨在构建含免疫荧光的pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒并应用腺相关病毒包装,为后期体内外实验打下基础.目的:构建人SOX9基因过表达腺相关病毒pAAV- hSOX9-IRE...

            【关键词】 腺相关病毒SOX9转染

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            【中文期刊】 付晓瑞  张旭东  等 《中国实验血液学杂志》 2012年20卷4期 900-905页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究目的构建携带人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的慢病毒载体,并研究其对不同细胞系的淋巴瘤细胞的感染效率.采用分子克隆技术,将针对TRAIL基因mRNA的cDNA片段插入到克隆栽体pGM-T,构建pGM-T-TRAIL,然...

            【关键词】 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体慢病毒载体淋巴瘤

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            【中文期刊】 王通  马文心  等 《中国病理生理杂志》 2012年28卷6期 1034-1038页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建携带中国株HIV-1 gp120基因并可感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)的重组腺病毒.方法:利用AdMax腺病毒构建系统,以双质粒共转染人胚肾转化细胞293Ad5+细胞,完成重组腺病毒载体包装,并进一步扩增和纯化.通过ELISA...

            【关键词】 重组腺病毒HIV包膜蛋白质gp120骨髓来源巨噬细胞

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            【中文期刊】 陶宇  杨丽  等 《实用医学杂志》 2011年27卷3期 369-371页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:研制冻干重组人三突变型低氧诱导因子-1α(HIF-1α)腺病毒.方法:将重组人三突变型HIF-1α腺病毒与不同配比的保护剂按适当比例混合,进行冻干,根据冻干后外观、病毒滴度测定、热稳定性试验、PCR、基因测序等结果,筛选冻干保护剂并评...

            【关键词】 缺氧诱导因子1重组腺病毒冷冻干燥

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            【中文期刊】 欧阳晓玲  李爱玲  等 《浙江大学学报(医学版)》 2011年40卷3期 291-296页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建含人过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供一种新的方法.方法:从人血中分离白细胞,提取总RNA,利用RT-PCR法获得人CAT的全长cDNA,克隆到pcDNA3.1+中,构建pcDNA3.1+-...

            【关键词】 过氧化氢酶/遗传学腺病毒科/遗传学基因

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            【中文期刊】 李洋  钱明  等 《中国老年学杂志》 2011年31卷16期 3101-3103页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 建立HSV-TK逆转录病毒包装细胞系并获得高产病毒的细胞株.方法 将TK基因与逆转录表达载体PLEGFP-N1连接后转染到包装细胞PA317中,经G418及荧光蛋白双重筛选得到高产病毒的细胞株.结果 经酶切鉴定成功构建PIEGFP-N...

            【关键词】 HSV-TK逆转录病毒包装细胞PA317

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            【中文期刊】 王琳  杨仕明  等 《中华耳科学杂志》 2010年08卷4期 461-465页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础.方法 根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC31...

            【关键词】 E2F2基因重组腺病毒载体基因治疗

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            【中文期刊】 徐学虎  全天一  等 《南方医科大学学报》 2010年30卷7期 1545-1547,1557页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pMS...

            【关键词】 has-miR-148aDNA甲基转移酶肿瘤

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            【中文期刊】 王鲜  王旭  等 《眼科新进展》 2010年30卷7期 644-648页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建并制备携带目的 基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.方法 首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug...

            【关键词】 Slug基因干扰腺相关病毒

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            【中文期刊】 张慕蕊  王岩  等 《中国老年学杂志》 2010年30卷4期 492-494页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 应用 Slingshot(SSH)-1L重组逆转录病毒载体,建立过表达该基因的稳定转染细胞系.方法 用脂质体法将含SSH-1L的重组逆转录病毒载体pLNCX-SSH-1L转染PA317包装细胞,G418筛选,滴度测定.收集病毒上清感染...

            【关键词】 逆转录病毒稳定转染Retrovirus vector

            浏览:144 被引:2 下载:16
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