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【中文期刊】 郭星 罗曼 等 《太原理工大学学报》 2023年54卷5期 891-897页
【摘要】 [目的]设备制造之间的误差校准已成为各种检测方法实际应用的难题.[方法]提出一种便携式磁弹性(ME)生物检测装置,用于实现免校准检测猪瘟病毒 E2 抗体(anti-CSFV E2),基于磁致伸缩效应,通过监测 anti-CSFV E2 引起...
- 概要:
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【中文期刊】 冯春花 朱艳平 等 《中国畜牧兽医》 2016年43卷3期 608-614页
【摘要】 以原核表达、纯化的猪瘟病毒(CSFV)E2主要抗原区蛋白为目标检测物,通过对各反应条件的筛选和优化,建立了检测CSFV抗体的间接ELISA检测方法.结果表明,本研究的最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度分别为1.0 μg/mL和1:200;最佳...
- 概要:
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【中文期刊】 高洁 袁红 等 《中国预防兽医学报》 2025年47卷2期 172-178页
【摘要】 为研制猪瘟(CSF)与口蹄疫(FMD)二联疫苗并评价其免疫效果,本研究采用真核表达系统瞬时表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白后经AKTA蛋白纯化仪和HiTrap TALON纯化柱纯化,采用SDS-PAGE检测重组E2蛋白(rE2)的表达与纯化...
- 概要:
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【中文期刊】 向蕊 朱利塞 等 《中国动物传染病学报》 2025年33卷1期 134-140页
【摘要】 本研究利用原核系统表达了猪瘟病毒(CSFV)Erns和E2串联蛋白,通过切胶纯化的方法得到高纯度的目的蛋白作为包被抗原,经过各反应条件的优化初步建立ELISA方法,并对方法的特异性、敏感性和重复性进行检验,与商品化试剂盒以及IFA试验进行平...
- 概要:
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【中文期刊】 马中元 郑君佐 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷10期 4579-4589页
【摘要】 本研究旨在建立一种猪瘟病毒E2单抗竞争ELISA检测方法,用于评价猪瘟C株弱毒苗和E2亚单位疫苗的免疫效果.首先,构建猪瘟E2杆状病毒表达载体pFastBAC,通过悬浮培养SF9细胞高效表达E2蛋白;其次,用纯化的E2蛋白免疫BABL/c小...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 潘小慧 《福建畜牧兽医》 2024年46卷3期 8-11页
【摘要】 本研究以猪瘟病毒E2 蛋白主要抗原区E2 A-D为包被抗原,建立一种可特异性检测猪瘟(CSF)抗体的间接ELISA方法.该方法中抗原包被浓度为 0.75 μg/mL,检测血清稀释倍数为 1:150.对 123 份兔体中和试验测定为阴性的样本...
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【中文期刊】 唐国强 江蕾 等 《四川畜牧兽医》 2024年51卷10期 21-24页
【摘要】 为了解西昌市部分中小规模猪场主要病毒性疫病的免疫抗体水平和病原感染状况,采用ELISA方法对采集的135份血清样品进行抗体检测,采用荧光PCR/RT-PCR方法对采集的45份全血样品进行病原检测,然后将检测到的阳性样品进行序列测定并进行生物...
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【中文期刊】 李淼 王宇飞 等 《生物化学与生物物理进展》 2009年36卷7期 916-922页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 含具有哺乳动物细胞活性的肩动子的重组杆状病毒(BacMam病毒)可有效转导多种哺乳动物细胞,并被广泛用于开发新型非复制型载体疫苗.将水泡性口炎病毒G蛋白(VSV-G)基因插入多角体肩动子下游,得到经修饰的杆状病毒转移载体,将对虾白斑综合症病...
- 概要:
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【中文期刊】 苏红辽 宗玉国 《中国猪业》 2022年4期 64-68页
【摘要】 为建立基于猪瘟病毒E2基因主要抗原区表达产物的猪瘟抗体斑点杂交ELISA方法,应用RT-PCR方法扩增了猪瘟病毒E2基因的主要抗原区(dE2),经EcoR Ⅰ、Xho Ⅰ双酶切,与经同样双酶切的原核表达载体pET-28a(+)连接,加入适量...
- 概要:
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【中文期刊】 孙元 祁巧芬 等 《生物工程学报》 2008年24卷10期 1734-1739页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了构建猪瘟重组腺病毒载体疫苗,通过细菌内同源重组法构建了含有猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒rAdV-E2.测定其一步生长曲线,同时用间接免疫荧光试验和Western blotting检测外源基因表达,然后用rAdV-E2免疫家兔,免疫后6周...
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【中文期刊】 熊贝嘉 张会 等 《动物医学进展》 2019年40卷3期 49-53页
【摘要】 研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律.本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/...
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【中文期刊】 华思红 熊贝佳 等 《动物医学进展》 2018年39卷11期 7-13页
【摘要】 为研究共表达猪瘟病毒(CSFV)E2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因的重组腺病毒(rAd-E2-GP5)的免疫保护效果,将rAd-E2-GP5免疫34~38日龄的健康断奶仔猪2次(间隔20 d),同时设商品苗和空白对照组...
【关键词】 猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;E2基因;
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【中文期刊】 李春利 王云龙 等 《生物技术通讯》 2009年20卷1期 55-58页ISTICCA
【摘要】 目的:对猪瘟病毒E2蛋白A3BCD进行原核表达,以期获得具有抗原活性的表达产物.方法:利用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR)技术从河南省近期流行猪瘟病毒野毒株中扩增得到E2基因,并将其克隆至pUCm-T载体,构建克隆载体p...
- 概要:
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【中文期刊】 江馗语 《兽医导刊》 2016年16期 210-211页
【摘要】 本研究通过基因工程技术,在大肠杆菌中高效表达了含猪瘟病毒E2基因中抗原指数较高且含有中和性抗原域的A1/A2区以及B、C区中抗原性较高、命名为tE2的重组蛋白和猪瘟病毒重复中和表位4P1重组蛋白、4P2重组蛋白,将上述3种重组蛋白和猪瘟活疫...
- 概要:
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【中文期刊】 朱艳平 郭东光 等 《动物医学进展》 2014年6期 45-48页
【摘要】 以猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白为研究对象,通过扩增 CSFV C 株 E2基因,亚克隆至原核表达载体 pGEX-6P-1,构建重组原核表达质粒 pGEX-6P-1-E2,转化至宿主菌 Rostta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE ...
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【中文期刊】 聂福平 杨俊 等 《安徽农业科学》 2013年28期 11393-11394,11473页
【摘要】 [目的]制备抗猪瘟病毒(CSFV)的单克隆抗体(MAb).[方法]以纯化的猪瘟病毒免疫4~6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,筛选出抗CSFV单克隆抗体杂交瘤细胞株.[结果]经间接ELISA获得3株能稳定分泌抗...
- 概要:
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【中文期刊】 郭东光 朱艳平 等 《动物医学进展》 2013年34卷3期 15-20页
【摘要】 为获得猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白抗原表位集中区原核重组目的蛋白,建立CSFV抗原和抗体快速检测方法.通过扩增CSFV E2蛋白抗原表位集中区基因,亚克隆至表达载pET-30a(+),构建重组原核表达载体pET-30a-E2-1,转化至宿主...
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【中文期刊】 李文良 毛立 等 《动物医学进展》 2012年33卷5期 8-13页
【摘要】 采用RT-PCR方法扩增猪瘟病毒(CSFV) E2蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠埃希菌BL2l构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白得到成功表达.利用纯化的重组蛋白作为包...
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【中文期刊】 周向阳 万婧 等 《动物医学进展》 2012年33卷1期 28-32页
【摘要】 以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达猪瘟病毒(CSFV)石门株的E2蛋白,将CSFV石门株的E2囊膜糖蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,获得重组转移质粒pFastBacHTA-E2.转化大肠埃希菌DH10Bac...
- 概要:
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【中文期刊】 范学政 徐璐 等 《中国兽医杂志》 2011年47卷5期 3-5页
【摘要】 将猪瘟病毒E2基因密码子改造后,克隆入pFastBac1质粒载体,经转座、转染后构建重组杆状病毒.并对表达产物进行鉴定分析.结果:E2基因改造后与设计序列一致;成功获得了重组杆状病毒(BAC/SE2M),采用猪瘟E2单抗WH303进行Wes...
- 概要:
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【中文期刊】 贺番 王靖飞 等 《中国预防兽医学报》 2010年32卷5期 342-346页
【摘要】 为了将猪瘟病毒(CFSV)的膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列.利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同...
- 概要:
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【中文期刊】 聂明非 李岩 等 《中国预防兽医学报》 2010年32卷7期 570-573页
【摘要】 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的特异性单克隆抗体(MAb),用含有BVDV E2基因的真核表达质粒pcDNA-E2免疫4周龄~6周龄BALB/c鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,以BVDV作为抗原建立间接ELISA筛选及4次...
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【中文期刊】 温国元 李坤 等 《湖北农业科学》 2009年48卷11期 2632-2635页
【摘要】 以猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)标准强毒石门株为模板,RT-PCR扩增CSFV E2基因N端的主要抗原区(△E2).PCR产物定向克隆至原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-A...
- 概要:
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【中文期刊】 陈景艳 李文雯 等 《动物医学进展》 2009年30卷9期 7-10页
【摘要】 为拯救囊膜表面携带有猪瘟病毒E2蛋白的复制型水疱性口炎假病毒,共转染分别表达水疱性口炎病毒核衣壳蛋白、磷蛋白、聚合酶蛋白以及携带有猪瘟病毒E2基因的复制型水疱性口炎病毒载体于BHK-21细胞中.采用Western blot、间接ELISA以...
- 概要:
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【中文期刊】 李谱华 张淼涛 等 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2009年27卷2期 96-100,128页
【摘要】 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E2.用...
- 概要:
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【中文期刊】 杨柳絮 侯磊 等 《动物医学进展》 2009年30卷6期 4-9页
【摘要】 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)已知序列设计3对引物,采用RTPCR方法扩增PRRSV ORF5基因和CSFV E2基因,目的基因依次插入真核表达载体pcDNA4.0,经PCR、酶切及测序分析,重组质粒构建成功...
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪瘟病毒;ORF5基因;
- 概要:
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【中文期刊】 解林红 郭抗抗 等 《中国预防兽医学报》 2008年30卷6期 411-414,419页
【摘要】 利用DNA重组技术将猪瘟病毒石门株囊膜蛋白E2基因定向插入逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2.将pBABE-puro-E2和辅助质粒pVSV-G经磷酸钙共沉淀法转染293GP包装细胞系,将...
【关键词】 猪瘟病毒;E2基因;永生化猪血管内皮细胞;
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【中文期刊】 孙元 夏照和 等 《中国兽医科学》 2008年38卷4期 315-319页
【摘要】 根据昆虫细胞密码子偏嗜性,对猪瘟病毒E2基因进行密码子优化,并利用昆虫杆状病毒表达系统进行了表达,表达水平约为野生型E2基因的3倍.将表达的重组E2蛋白纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组E2蛋白的问接ELISA方法,并对此方法...
- 概要:
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【中文期刊】 侯强 彭伍平 等 《中国兽医科学》 2008年38卷1期 1-5页
【摘要】 利用RT-PCR扩增了猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗株(C株)的E2蛋白主要抗原区(tE2)编码区,并定向克隆到表达载体pPROEX-HTb中,获得重组表达载体pPROEX-tE2,将其转化大肠杆菌DH5α菌株,经IPTG诱导,tE2蛋白...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 李丛丛 吴艳红 等 《现代农业科技》 2007年1期 109-110,120页
【摘要】 本实验利用PCR方法从pUC18-E2上扩增出E2基因的主要抗原域片段,长为601 bp,将该PCR产物克隆到原核表达载体pET32a上,得到pET32a-e2重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导重组蛋白表达,S...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 邱元 黄复深 等 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 2007年33卷2期 200-204页
【摘要】 为探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对猪瘟病毒E2基因核酸疫苗小鼠免疫应答诱导的影响,将CSFVE2基因和GM-CSF片段插入真核表达载体pcDNA3.0内构建pcE2,pcE2-GF及pcGF核酸疫苗.动物试验时,50只雌性...
【关键词】 猪瘟病毒E2基因;粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子;核酸疫苗;
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 查云峰 徐兴然 等 《畜牧兽医学报》 2005年36卷10期 1100-1105页
【摘要】 <篇首> 猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E0和E2囊膜糖蛋白是CSFV主要保护性抗原蛋白,均能诱导机体产生CSFV的中和抗体,保护机体免受强毒的攻击[1,2].尤其是E2糖蛋白,既是人们研究CSFV...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 涂亦娴 张馨玉 等 《中国农业大学学报》 2005年10卷6期 37-41页
【摘要】 比较猪瘟病毒E2基因的真核表达质粒proVAX-E2n和pVP22-E2n体外表达效率以及体内的免疫效果,以从中选出高效的猪瘟病毒核酸疫苗.将上述表达载体转染Hela细胞进行体外表达后,用RT-PCR和间接ELISA法检测Hela细胞体内和...
- 概要:
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【中文期刊】 陆芹章 张超 等 《中国预防兽医学报》 2005年27卷5期 415-417页
【摘要】 本实验对采至广西某猪场的270份母乳奶样,应用间接ELISA和间接血凝试验,分别对其进行了抗猪瘟E2抗体水平和猪瘟全抗体水平的检测.检测结果显示,在270份样品中,间接ELISA检测呈阳性的(即含有抗E2抗体的)占总样品的94.45%,而间...
- 概要:
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【中文期刊】 吴健敏 任兆钧 等 《中国兽医学报》 2004年24卷6期 521-524页
【摘要】 利用重组PCR技术将猪瘟病毒(CSFV)E2基因与T4噬菌体SOC基因C端融合,构建了大小为1233 bp的SOC/E2融合基因,将其插入携带T4溶菌酶基因(e)和denv基因的T4重组载体(pRH),构建了重组载体pRSE2,通过重组载体...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 吴健敏 任兆钧 等 《中国兽医学报》 2003年23卷1期 14-17页
【摘要】 利用DNA重组技术将猪瘟病毒(clascical swine fever virus,CSFV)E2蛋白主要抗原编码区基因(mE2)与T4噬菌体SOC基因融合,插入T4噬菌体表达质粒,构建成T4噬菌体SOC位点表达mE2的表达载体plSmE...
- 概要:
- 方法:
- 结论: