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            【中文期刊】 李琦  牛艺儒  等 《畜牧兽医科技信息》 2007年3期 24-25页

            【摘要】 对大同南郊地区送检的疑似为致病性大肠杆菌病的病死鸡进行了细菌分离培养与鉴定后,确定分离菌为大肠杆菌;将分离菌株分别采用超声破碎菌体灭活和培养茵直接灭活,制备疫苗并比较两种菌苗的免疫效力.实验室效力检测显示采用超声破碎菌体制备的疫苗保护率达到...

            【关键词】 鸡大肠杆菌灭活疫苗超声破碎菌体

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            【中文期刊】 常乐  张括  等 《北京大学学报(医学版)》 2012年44卷5期 737-741页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,构建并表达含轮状病毒NSP3基因耐RNA酶的病毒样颗粒,并探讨其稳定性.方法:设计含Pvu Ⅰ和Kpn Ⅰ酶切位点的上、下游引物,扩增1 049 bp轮状病毒NSP3基因片段,并将包...

            【关键词】 轮状病毒属基因,NSP3病毒粒子

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            【中文期刊】 窦文芳  张莲芬  等 《生物技术通报》 2008年6期 139-143页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以人胰高糖素样肽-1(human ghcagom-like peptide-1,GLP-1))为研究对象,以克隆载体pPblu2SKP/(GLP-1A2G) 2基因为模板,利用PCR扩增获得GLP-1与其突变体GLP-1A2G的编码基因,并...

            【关键词】 人胰高糖素样肽-1突变体表达

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            【中文期刊】 金元昌  向育君  等 《生物技术通报》 2008年3期 87-90,94页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对含重组人促性腺激素释放激素(GnRH)及导肽(LEP)的工程菌株进行诱导表达,分离纯化GnRH/LEP并进行生物学活性分析.工程菌IPTG诱导,收获的菌体经超声破碎后,裂解液用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化G...

            【关键词】 促性腺激素释放激素导肽分离纯化

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            【中文期刊】 马晴  张渝英  《微生物学通报》 2007年34卷1期 28-31页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 用NdeI和BamHI酶切回收腾冲嗜酸热两面菌S5的分子伴侣β亚基基因片段插入pET-23b的相应位置,并分别在BL21(DE3)和Rosetta-gamiTMB(DE3)pLysS中表达.表达的β亚基以可溶的形式存在.β亚基在Rosett...

            【关键词】 嗜酸热古菌腾冲嗜酸两面菌分子伴侣

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            【中文期刊】 何小平  李兆申  等 《解放军医学杂志》 2005年30卷7期 634-637页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的克隆人血管能抑素canstatin基因,构建其原核表达载体,表达并纯化出canstatin蛋白.方法从人胎盘组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增出canstatin基因,克隆进质粒pUCm-T,将测序正确的目的基因片段插入质粒pET-...

            【关键词】 基因,canstatin血管生成基因克隆

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            【中文期刊】 李晓静  张豪  等 《生物工程学报》 2005年21卷2期 216-219页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用PCR方法扩增炭疽杆菌噬菌体裂解酶(γlysin)基因,克隆至大肠杆菌表达载体pET22b中,经菌落PCR筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pET22b-γlysin构建成功,并在Escherichia coli BL21(DE3)中...

            【关键词】 菌体裂解酶炭疽杆菌大肠杆菌

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            【中文期刊】 孙勇  谢数涛  《生态科学》 2005年24卷2期 136-139页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 研究了优美红游动菌(Phodoplanes elegans)的生长以及类胡萝卜素的产生,通过比较4种广泛采用的细胞破碎方法,对优美红游动菌(Rhodoplanes elegans)类胡萝卜素的提取条件进行了研究,结果表明:类胡萝卜素的产生与...

            【关键词】 类胡萝卜素优美红游动菌提取

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            【中文期刊】 魏文进  崔红  等 《中国人兽共患病杂志》 2003年19卷2期 23-25页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的克隆和表达贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)27kDa外膜蛋白基因(com1).方法采用PCR方法,从质粒pGEM-T/com1扩增出Com1基因片段,经鉴定后,将其克隆于原核表达载体pQE30,构建成重组质粒pQE30...

            【关键词】 贝氏柯克斯体基因克隆测序

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            【中文期刊】 段秀梅  谭岩  等 《中国免疫学杂志》 2001年17卷12期 646-648页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:为了制备高纯度、高活性的重组人白细胞介素-6.方法:化学诱导重组表达载体pT7.7hIL-6进行蛋白表达,菌体经超声破碎分离包涵体,并对包涵体进行洗涤、变性和复性处理,用DEAE-Sepharose CL-6B弱阴离子交换柱一步纯化复...

            【关键词】 白细胞介素6纯化活性

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            【中文期刊】 章刚  黄德新  等 《中国药业》 2013年22卷21期 4-5页ISTICCA

            【摘要】 目的 以含有TpN47基因的表达菌体为原料,纯化梅毒螺旋体重组抗原TpN47,并提高产品收率.方法 表达菌体经超声破碎后离心取沉淀,沉淀变性溶解后采用金属螯合亲和层析进行纯化.通过对层析异常现象的分析和优化层析工艺操作提高收率.结果 所得纯...

            【关键词】 梅毒螺旋体金属螯合亲和层析

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            【中文期刊】 孙晓东  王燕  等 《中国医药导报》 2013年10卷7期 22-24页ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨丝瓜籽核糖体失活蛋白基因Luffin-a原核表达载体的构建方法.方法 从Pubmed中查到Luffin-a的mRNA全序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜种子中克隆Luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列,构建原核表达...

            【关键词】 丝瓜籽核糖体失活蛋白Luffin-a基因

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            【中文期刊】 胡桂萍  贾宪波  等 《生物技术通讯》 2013年5期 698-701页ISTICCA

            【摘要】 目的::比较不同破碎方法下3种芽胞杆菌菌体蛋白的提取效果。方法:以菊酯类农药降解菌巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌为研究对象,以裂解液为提取介质,分别采用超声波破碎法、水煮法和机械破碎法提取芽胞杆菌蛋白,并通过革兰染色电镜观察菌株破...

            【关键词】 芽胞杆菌蛋白提取破碎方法

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            【中文期刊】 李政海  胡家华  等 《中国生化药物杂志》 2005年26卷3期 133-135页ISTICCA

            【摘要】 目的摸索一条适合重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的中试分离纯化工艺.方法发酵后菌体经洗涤、超声破碎和2步盐析等预处理后,经过3步色谱纯化,对最终蛋白质进行纯度、内毒素和活性检测.结果目的蛋白质纯度达98%以上,生物活性为4.8×10...

            【关键词】 重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体分离纯化

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            【中文期刊】 王宇宏  高航  等 《中国生物制品学杂志》 2005年18卷5期 405-406页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的减轻短棒状杆菌全菌体制剂接种后的局部疼痛等副作用.方法采用超声破碎、蛋白水解及脱脂的方法提取了细胞壁,通过脾激活试验及抑瘤试验,检测纯化的短棒状杆菌细胞壁活性对家兔股四头肌的局部刺激作用及热原反应.结果纯化的短棒状杆菌细胞壁可使小鼠脾激...

            【关键词】 短棒状杆菌细胞壁免疫活性

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            【中文期刊】 傅绍军  李微  等 《药物生物技术》 2005年12卷6期 361-365页ISTICCA

            【摘要】 以Lactobacillus helveticus ATCC8018为出发菌株,对其液体发酵工艺进行了优化.实验考察了培养液初始pH值,摇床速度,发酵温度,接种量,发酵时间对菌体生长的影响;同时考察了用超声波破碎菌体的条件.实验确定了摇瓶发...

            【关键词】 瑞士乳酸杆菌液体发酵破碎条件

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            【中文期刊】 王静  胡振林  等 《中国生物制品学杂志》 2005年18卷1期 36-38页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的摸索制备高纯度卡介菌(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin,BCG)基因组DNA(BCG-DNA)的制备工艺.方法采用超声破碎结核杆菌,加热使蛋白变性初步去除菌体蛋白,进一步经蛋白酶消...

            【关键词】 卡介菌基因组DNA提纯

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            【中文期刊】 崔建武  奚永志  等 《军事医学科学院院刊》 2004年28卷6期 523-526页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的:对高效表达的重组IL-6 D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白进行包涵体的分离、变性与复性以及纯化.方法:对表达菌体进行超声破碎、洗涤、氧化还原法变性及复性,经离子交换层析.结果:工程菌HB101/pE01T的表达产物是以包涵体形式...

            【关键词】 重组外毒素融合蛋白IL-6 D24-PE40KDEL包涵体

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            【中文期刊】 王晓军  惠俊峰  等 《中国生物制品学杂志》 2003年16卷4期 212-214页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的建立重组类人胶原蛋白分离及纯化工艺.方法将工程菌株E.coli BL21 3.1在L1523型12.8L自控发酵罐中培养14h,发酵菌体经超声破碎、硫酸铵沉淀后,依次经DEAE-52和Sephadex G-100柱层析分离纯化.结果发酵...

            【关键词】 重组类人胶原蛋白分离纯化高密度发酵

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            【中文期刊】 陈唯军  崔红  等 《生物技术通讯》 2003年14卷1期 33-35页ISTICCA

            【摘要】 根据已知的C蛋白基因序列设计一对引物,用PCR法从HBV adw亚型全基因组克隆中扩增出约500bp的DNA片段.将该基因克隆到表达质粒pQE30中,转化大肠杆菌,进一步对重组质粒中的插入片段进行DNA测序,证明是C基因.阳性克隆子经IPT...

            【关键词】 HBV全基因克隆子C蛋白基因PCR

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            【中文期刊】 杨欣  曾献武  等 《中国生化药物杂志》 2001年22卷6期 295-297页ISTICCA

            【摘要】 目的研究重组人干扰素α 2b包涵体的纯化方法.方法超声破碎菌体,干扰素α 2b包涵体经洗涤液洗涤后,SDS-PAGE检测其纯度,VSV-WISH细胞系统测定干扰素活性.结果差速离心很难完全将包涵体和细菌碎片分开.超声破碎6次和9次的干扰素α...

            【关键词】 干扰素α 2b包涵体细菌碎片

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            【中文期刊】 孙叶芳  赵艳萍  等 《牙体牙髓牙周病学杂志》 2001年11卷2期 73-75页ISTICCA

            【摘要】 目的:探索原核表达重组人骨形成蛋白 -2(rhBMP-2)的纯化和复性方法。方法:对携带有pBV220-hBMP-2的 工程 菌进行发酵,收集菌体,超声破碎菌体后制备包涵体。包涵体经进一步超声裂解后过凝胶色 谱和离子交换色谱,对获得的高纯度...

            【关键词】 重组人骨形成蛋白-2纯化复性

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            【中文期刊】 王世伟  王卿惠  等 《高师理科学刊》 2016年36卷8期 47-50页

            【摘要】 研究了红球菌(Rhodoccus sp.Tccc28001)腈水合酶初步提取实验.对腈水合酶提取的菌体培养时间、细胞的超声破碎方法和硫酸铵分级分离方法进行了优化.结果表明,提取的最佳条件为:培养96 h收获菌体;在4℃下溶菌酶处理菌悬液40...

            【关键词】 红球菌腈水合酶优化

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            【中文期刊】 刘晓颖  姚志利  等 《动物医学进展》 2014年35卷1期 32-35页

            【摘要】 为了获得布鲁菌外膜蛋白Bp26活性重组蛋白,以布鲁菌M5株菌体DNA为模板,应用PCR方法扩增得到Bp26基因,将该基因片段克隆到载体pET28a中,转化到E.coli BL21(DE3)中,在不同条件下诱导表达,对获得的菌体细胞超声破碎,...

            【关键词】 布鲁菌外膜蛋白Bp26乳糖

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            【中文期刊】 林莉萍  董墨思  等 《农业科技与装备》 2014年10期 37-39页

            【摘要】 研究大肠杆菌表达的水稻α-半乳糖苷酶基因工程菌菌体破碎的条件。以菌液酶活性为指标,用超声波破碎、溶菌酶降解及菌体反复冻融3种方法破碎细胞。结果表明:超声波功率为200 W、破碎时间为1 min时测得的菌液酶的活性最大,为7.7577 U/m...

            【关键词】 α-半乳糖苷酶超声破碎溶菌酶

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            【中文期刊】 张帆  高顺  等 《四川大学学报(自然科学版)》 2012年49卷2期 465-470页

            【摘要】 为提高重组表达质粒pET32c-ZGA在大肠杆菌中的表达量,对表达重组风雨花凝集素基因工程菌的培养条件进行优化筛选,对影响蛋白质表达量和工程菌生长的因素如pH值、诱导温度、IPTG、接种量、诱导时间、补充碳源形式、诱导时机、无机离子等进行了...

            【关键词】 风雨花凝集素大肠杆菌表达条件

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            【中文期刊】 李娜  聂荣鑫  等 《现代仪器》 2011年17卷6期 7-10页

            【摘要】 采用超声波破碎菌体、DEAE阴离子粒和Superdex200分子筛柱联用法得到较纯的F0F1-ATPase全酶,并得到SDS-PAGE电泳和动态光散射检测确认.动态光、散射检测显示,F0F1-ATPase分子团尺寸随温度升高而增加,不同于普...

            【关键词】 F0F1-ATPase制备动态光散射

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            【中文期刊】 陈家锃  崔红玉  等 《中国预防兽医学报》 2011年33卷11期 849-853页

            【摘要】 为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌- LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子.我们利用底物X-gluC与...

            【关键词】 乳酸菌启动子探测载体Gateway克隆技术

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            【中文期刊】 任明  赵蕾  《西北农业学报》 2010年19卷3期 57-61页

            【摘要】 从新鲜韭菜的根中分离到一株对多种蔬菜病原真菌有抑制作用的优势内生细菌W7,对其拮抗机制的初步研究结果表明,胞外代谢物对病原真菌无抑制作用,而菌体经超声波破碎及有机溶剂沉淀得到的多糖粗提液可明显抑制病原菌菌丝生长.该菌还能以100 mg/L高...

            【关键词】 内生细菌拮抗菌体多糖

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            【中文期刊】 江学斌  陈颖恒  等 《广东化工》 2010年37卷5期 78-79,122页

            【摘要】 利用超声波对蜡样芽孢杆菌进行破碎处理,并测定蛋白质含量和SOD活性,探索以释放出更多高活性的SOD为目的的蜡样芽孢杆菌最佳细胞破碎条件及其对SOD活性的影响.研究结果表明,最佳的蜡样芽孢杆菌的超声波破碎条件为破碎浓度为10 %、破碎功率为6...

            【关键词】 蜡样芽孢杆菌超声破碎细胞破碎条件

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            【中文期刊】 江学斌  雷德柱  等 《广东化工》 2010年37卷4期 272-273页

            【摘要】 文章通过对影响破碎效果的破碎压力,循环次数,菌体浓度等条件来研究超高压循环冷却细胞破碎法对破碎蜡样芽胞杆菌释放SOD的影响.结果表明:用15 %的菌体浓度通过160 MPa的超高压循环冷却破碎3次后,SOD的酶活力可达977.61 U/mg...

            【关键词】 超高压循环冷却破碎蜡样芽孢杆菌超氧化物歧化酶

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            【中文期刊】 董改香  李磊  等 《山西农业大学学报(自然科学版)》 2009年29卷1期 50-54页

            【摘要】 本试验通过对具有良好益生特性乳酸菌的筛选,研究其降胆固醇的机理.我们将分离自内蒙古和新疆地区牧民家庭自制的10份酸马奶中的16株乳酸菌经耐酸、耐胆盐实验,筛选出1株益生特性较好的乳酸菌,为E2301.同时通过胆固醇吸收动力曲线和超声波抗性实...

            【关键词】 耐酸耐胆盐降胆固醇

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            【中文期刊】 郭宇星  潘道东  《食品科学》 2008年29卷8期 140-144页

            【摘要】 目的:确定超声波破碎细胞提取瑞士乳杆菌氨肽酶的最佳条件.方法:采用单因素试验和响应面法对菌体浓度、超声波破碎功率、破碎时间进行研究.结果:菌体浓度、超声波破碎功率、破碎时间对超声波破碎程度都存在一定的影响,其中破碎时间影响最为显著.超声波破...

            【关键词】 瑞士乳杆菌超声破碎氨肽酶

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            【中文期刊】 何熙璞  张敏  等 《食品研究与开发》 2007年28卷10期 76-79页

            【摘要】 对产葡萄糖脱氢酶醋杆菌GX-0013菌株的超声波破碎条件进行了优化,并对酶反应的最适宜pH值,温度以及反应的进程曲线进行了研究,发现醋杆菌GX-0013菌株所产的葡萄糖脱氢酶是位于细胞膜上,且发现超声波方法以菌体浓度(w/v)为1,900 ...

            【关键词】 葡萄糖脱氢酶低聚果糖pH值

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            【中文期刊】 栾美丽  袁其朋  《北京化工大学学报(自然科学版)》 2006年33卷5期 26-29页

            【摘要】 考察了研磨法、有机溶剂法和超声波破碎法对根瘤土壤杆菌细胞破碎的影响.结果表明,在有机溶剂破碎条件下,最佳搅拌时间为3.5 h,此时CoQ10的含量为5.703 mg/L;由正交实验分析得出,菌体浓度为40 mg/mL,作用时间为12min,...

            【关键词】 辅酶Q10根瘤土壤杆菌抗氧化剂BHT

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            【中文期刊】 刘红  潘红春  等 《重庆大学学报(自然科学版)》 2004年27卷10期 75-78页

            【摘要】 大肠杆菌的破碎方法对包含体的纯度有较大影响.采用酶解和超声波相结合的方式进行了大肠杆菌的破碎实验研究,考察了溶菌酶用量、酶解温度、超声处理功率和时间等因素对菌体破碎程度的影响,通过测定破碎液的A650,A280,A260 nm来反映细胞的破...

            【关键词】 酶解超声大肠杆菌

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            【中文期刊】 王立艳  石轩峰  等 《无锡轻工大学学报》 2004年23卷5期 91-95页

            【摘要】 研究了从植物乳杆菌RS2-2中提取胞内乳酸脱氢酶的工艺过程,探讨了超声破碎时菌体质量浓度、处理量及处理时间对破碎效果的影响;对酶的提取工艺研究表明,0.05 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)添加0.10~0.30 mol/L NaCl可...

            【关键词】 乳酸脱氢酶抽提纯化

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            【中文期刊】 程小冬  李梅香  等 《济宁医学院学报》 2003年26卷1期 40-41页

            【摘要】 目的观察超声波作用时间对地衣芽孢杆菌体破碎程度的影响.方法将地衣芽孢杆菌从冷干管中接出且培养成活,扩大培养,收集菌体悬于pH=6.0 0.85%Nacl溶液中,用超声波破碎提取α-乙酰乳酸脱羧酶用于啤酒发酵工业.超声波处理时间分别为1h、2...

            【关键词】 α-乙酰乳酸脱羧酶双乙酰熟化期

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            【中文期刊】 李董  袁文肃  等 《高技术通讯》 2003年13卷11期 27-30页

            【摘要】 克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达.发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%~50%.发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发...

            【关键词】 人IL6/IL2融合蛋白发酵分离纯化

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            【中文期刊】 陈义勇  施用晖  等 《无锡轻工大学学报》 2002年21卷6期 626-629页

            【摘要】 通过SDS-PAGE凝胶电泳确定了目的重组阿片肽存在于包涵体中,系统研究了影响大肠杆菌表达的重组阿片肽包涵体溶解的因素,确定了重组阿片肽包涵体制备溶解的最佳工艺条件,即菌体超声破碎5 min,间隔时间6 s,破碎效果最好;包涵体洗涤温度为4...

            【关键词】 重组阿片肽包涵体溶解

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            【中文期刊】 曲建  谈立松  等 《上海大学学报(自然科学版)》 2000年6卷4期 338-342页

            【摘要】 Endostatin是一种新发现的血管生成抑制因子,具有很强的抗肿瘤活性.为了研究人Endostatin的生物学功能和作用机制,作者从人胎肝组织中克隆到人Endostatin cDNA,然后将其插入到pSQE表达质粒中,转化Escheric...

            【关键词】 人Endostatin基因克隆原核表达

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            【中文期刊】 曹俊  卢锦标  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2017年37卷4期 275-280页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacteria smegmatis,MS)与结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)抗原及其免疫原性的交叉情况.方法 以低温超声破碎方法提取MS和MTB菌体抗原,通过Wes...

            【关键词】 结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌交叉抗原

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            【中文期刊】 朱蕾  王庆民  等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷4期 83-86页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 尿酸氧化酶(urate oxidabe,Uricase,EC.1.7.3.3)是一种能将尿酸氧化为尿囊素的蛋白酶.合成黄曲霉(Aspergillus flavus)尿酸氧化酶基因,构建表达载体pET43.1a/uox,重组质粒经双酶切鉴定和...

            【关键词】 尿酸氧化酶大肠杆菌高效表达

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            【中文期刊】 莫毅  王伟  等 《生物工程学报》 2009年25卷2期 274-278页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了分离纯化SHP-1/SHP-2催化活性域蛋白(分别命名为D1C/D2C),并估测其动力学常数,将已经构建好的D1C/D2C重组质粒转化Escherichia coil BL21菌株,经IPTG诱导表达、菌体裂解缓冲液悬浮和超声波破碎后,...

            【关键词】 SHP-1SHP-2蛋白表达

            OA
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            【中文期刊】 饶海林  曾海鹏  等 《国际生物制品学杂志》 2009年32卷1期 1-3页CA

            【摘要】 目的 建立重组人白细胞介素-6(recombinant human interleukin-6,rhIL-6)包涵体精制工艺,获取高纯度的包涵体蛋白.方法 采用超声破碎法和生物酶解法破碎细胞;摸索洗涤缓冲液中尿素的适当浓度,经多次洗涤获取高...

            【关键词】 包涵体rhIL-6生物酶解法

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