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【中文期刊】 丁霞飞 贾宪波 等 《福建农业学报》 2023年38卷4期 485-496页
【摘要】 [目的]鉴定影响普城沙雷氏菌ACCC 02146产灵菌红素能力的基因,构建ACCC 02146的转座子突变体文库,为进一步研究普城沙雷氏菌ACCC 02146灵菌红素合成机制奠定基础.[方法]采用平板划线法从菌种保藏中心购买菌株和实验室保藏...
【中文期刊】 周莉 詹佳欢 等 《实验与检验医学》 2023年41卷6期 675-680,686页 CA
【摘要】 背景金黄色葡萄球菌能产生多种蛋白酶引起侵袭性感染,转座子测序技术是发掘基因功能的有力工具,从基因组层面分析促进金葡菌蛋白酶活性基因对其预防及治疗具有重要作用.目的构建能用于转座子测序的突变文库,筛选及鉴定促进蛋白水解活性基因.方法 采用基因...
【中文期刊】 牛硕 朱梅君 等 《湖北大学学报(自然科学版)》 2022年44卷1期 24-30页
【摘要】 利用转座子突变技术构建毕赤酵母菌株突变库,并分离出能够在含雷帕霉素(10 ng/mL)培养基中生长的突变株mut375.通过热不对称交错PCR(TAIL-PCR)获取转座子侧翼序列,对转座子的插入位点进行定位.转座子插入PAS_Chr2-2...
【中文期刊】 李娜 靳书刚 等 《中国预防兽医学报》 2021年43卷4期 440-443页
【摘要】 为筛选与鉴定牛源大肠杆菌耐四环素类药物的耐药相关基因,本研究从67份犊牛腹泻病料样品中分离细菌.采用生化和PCR方法鉴定分离菌,通过K-B法检测分离菌的药物敏感性,并选定一株多重耐药菌;通过杂交的方法,将供体菌携带的转座子插入到该分离菌(亲...
【中文期刊】 陈妍 丁云竹 等 《中国动物传染病学报》 2021年29卷1期 21-25页
【摘要】 为了鉴定鸭疫里默氏杆菌中与卡那霉素抗性相关的基因,本研究采用构建Yb2株转座子随机突变库结合卡那霉素抗性平板来筛选相关抗性基因.先以Yb2株为受体菌,携带质粒pEP4351的大肠杆菌BW19851(pEP4351)为供体菌,构建转座子Tn4...
【中文期刊】 刘琳 张美丽 等 《遗传》 2011年33卷5期 485-493页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 近年来,转座子介导的插入突变在哺乳动物的分子遗传学研究中得到了广泛的应用.转座子作为一种简便高效的遗传学操作工具,在构建转基因动物模型、基因治疗、细胞水平和动物整体水平的基因功能研究等方面发挥了重要的作用.文章重点介绍DNA转座子的结构、功...
【中文期刊】 滕铁山 谢建平 《中国药理学与毒理学杂志》 2011年25卷6期 586-590页 ISTICPKUCA
【摘要】 结核菌耐药现象越来越严重,开发治疗结核病的新药非常紧迫.全球药物研发的一个明显趋势是整合分子生物学及功能基因组方法学,结核病治疗药物的研发也如此.本文综述结核病新药分子靶标的鉴定、分子作用机理与耐药机理以及几种前景较好抗结核新药的药物学特征...
【中文期刊】 董洪燕 张小荣 等 《微生物学报》 2008年48卷7期 869-873页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]生物膜在沙门氏菌的致病性和引起沙门氏菌食物中毒等方面起着重要作用,本研究为了鉴定影响沙门氏菌生物膜形成的基因.[方法]利用结晶紫染色定量法对74株鸡源的肠炎、鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌进行生物膜测定,选择生物膜生长较好的肠炎沙门氏菌C0...
【中文期刊】 邓海华 李晓丹 等 《微生物学通报》 2007年34卷1期 32-35页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54.根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中...
【中文期刊】 徐剑宏 洪青 等 《微生物学通报》 2005年32卷2期 34-38页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过接合使供体大肠杆菌DH5α中的质粒pSC123上的转座子插入到受体菌CFDS-1基因组DNA中,以引起该菌株的基因插入突变.利用转座子上的卡那霉素抗性基因和呋喃丹降解过程中红色物质的产生与否初步筛选出6株突变株,分别命名为CFDS-M1...
【中文期刊】 胡莲美 朴英杰 等 《第一军医大学学报》 2004年24卷10期 1150-1152页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的建立快速简便筛选酵母突变株的方法.方法利用同源重组技术,通过转座子上的GFP基因,从酵母基因组文库中,检测发生突变的菌株,从而筛选出酵母突变株.结果应用荧光显微镜观察SC-ura选择平板筛选出的酵母,有绿色荧光发出的即为阳性菌落.结论利...
【中文期刊】 陈其军 肖玉梅 等 《植物生理学通讯》 2004年40卷1期 121-126页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 综述了T-DNA插入突变和转座子插入突变等基因敲除技术的原理及其在植物功能基因组研究中的应用,并简要介绍了向国际有关机构索要或购买拟南芥插入突变体的方法.
【关键词】 基因敲除; 功能基因组; T-DNA插入突变体;
【中文期刊】 徐来祥 张知彬 等 《动物学杂志》 2002年37卷6期 88-93页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 生物为了适应环境变化,需要遗传物质发生变化来为进化提供材料,在进化过程中遗传物质的变化方式主要包括突变和基因重排.对一个种群或个体来讲,在不同的环境或一定生活周期内的不同阶段,基因组存在着基因的差次表达,这种调控在核酸分子水平上主要是通过突...
【中文期刊】 李成涛 薛景珍 等 《微生物学杂志》 2002年22卷4期 17-19页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用转座子标签法以水稻黄单胞菌(Xoo)为研究对象,构建了Xoo的突变体库,为革兰氏阴性细菌突变体库的建立,验证了一个较新的方法和思路.经分子生物学检测,此方法简便易得、高效稳定,可以定向突变,为研究G-细菌的各项功能提供了良好的素材,加快...
【中文期刊】 阮红 Bernhard Eikmann 《微生物学报》 2002年42卷3期 326-330页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点,采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离,并测定插入位点相邻DNA序列,获得了三个转座子插入位点DNA序列,其中一个是柠檬酸合成酶基因,另两个为目前未知基因,暂命名为o...
【中文期刊】 朱正歌 肖晗 等 《生物工程学报》 2001年17卷3期 288-292页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用根癌农杆菌介导的遗传转化法,把玉米转座子Ac片段(合成转座酶)和Ds因子(转座序列)分别导入粳稻品种中花11,获得了400多个转化株系.有63个株系的转基因T0代植株或T1代植株出现了可见的形态变异,包括抗病、白苗、黄苗、白条斑叶、有色...
【中文期刊】 李倩 李贵阳 等 《渔业科学进展》 2020年41卷5期 160-167页
【摘要】 为了寻找影响鳗弧菌(Vibrio anguillarum)表型变化的基因,本研究使用转座子mini-Tn10(pLOF/Kana)构建了鳗弧菌M3突变株文库,筛选影响表型变化的菌株及相关基因,证明这些表型变化的突变子与毒力存在一定的相关性....
【关键词】 鳗弧菌; mini-Tn10转座子; 突变文库;
【中文期刊】 付玉龙 郜宁 等 《中华实验外科杂志》 2018年35卷12期 2242-2245页 ISTICCA
【摘要】 目的 观察靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRv Ⅲ)的嵌合抗原受体修饰T细胞(EGFRv Ⅲ/2CAR-T)对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用.方法 二代EGFRv Ⅲ CAR表达框(EGFRv Ⅲ/2CAR,1 374 bp...
【关键词】 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体; 嵌合抗原受体; 免疫治疗;
【中文期刊】 黄天培 张君 等 《激光生物学报》 2013年22卷3期 230-236页 ISTICCA
【摘要】 将高毒性的Cr(Ⅵ)还原成低毒的Cr (Ⅲ),是处理含Cr(Ⅵ)废水常用的方法之一.以高效还原Cr(Ⅵ)的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)407为研究对象,将转座子随机突变载体pIC333转化Bt40...
【中文期刊】 季文恒 陈胜利 等 《畜牧与兽医》 2018年50卷5期 80-83页
【摘要】 旨在使用转座子插入突变方法构建牛支原体08M株的突变体文库,为毒力相关基因的鉴定提供技术平台.测定了牛支原体08M株的浓度(颜色变化单位,CCU)和庆大霉素最低抑菌浓度(MIC).应用电穿孔方法,将庆大霉素抗性质粒pISM2062(携带有转...
【中文期刊】 丛延广 胡福泉 《微生物学免疫学进展》 2008年36卷2期 78-80页 ISTICCA
【摘要】 构建细菌突变株是认识细菌基因功能的一个重要途径.如果针对某个细菌建立一个包括所有基因的单基因突变株库,对于该细菌基因功能的认识无疑具有巨大的推动作用.本文综述了利用转座子建立细菌突变株库的工作,并侧重于其构建策略和方法.
【中文期刊】 王佳佳 刘冬梅 等 《化学与生物工程》 2017年34卷9期 46-50,60页
【摘要】 利用转座子插入突变技术从睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)JL40中筛选出编码具有锑抗性及锑氧化作用的甲酸脱氢酶-O的fdhO基因.为了进一步验证fdhO基因的功能,在JL40中构建了fdhO基因突变株JL40...
【关键词】 睾丸酮丛毛单胞菌JL40; 转座子插入突变; 锑抗性;
【中文期刊】 朱子薇 潘丽婷 等 《江苏农业学报》 2017年33卷2期 456-462页
【摘要】 构建玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库,以期获得丢失玉米赤霉烯酮降解功能的突变子,克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因,阐明MQ01降解玉米赤霉烯酮的分子机制.将携带转座子TnYLB-1的穿梭载...
【关键词】 玉米赤霉烯酮; BacillusamyloliquefaciensMQ01; 转座子突变;
【中文期刊】 陈兆贵 王江 等 《植物生理与分子生物学学报》 2003年29卷4期 337-341页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 采用Basta抗性鉴定、潮霉素抗性鉴定和PCR检测相结合的方法筛选和鉴定了水稻Ds插入纯合体.在T1代236个转化株系中,有16个株系的全部植株表现出对Basta的敏感,其余220个株系的植株表现出对Basta的抗性.经过3代的纯合筛选,共...
【中文期刊】 刘华华 缪辉 等 《四川大学学报(自然科学版)》 2016年53卷5期 1130-1134页
【摘要】 本实验运用高压尾静脉注射的方法将PB转座系统导入小鼠肝脏,研究其在肝脏中的转座活性,系统中PB转座子携带表达红色荧光蛋白的基因以指示转座的发生.注射10个月后取出小鼠肝脏,体视荧光显微镜观察肝脏是否有红色荧光,并通过基因组PCR、splin...
【关键词】 PiggyBac(PB)转座子; 高压尾静脉注射; Splinkerette PCR;
【中文期刊】 黄胜 卢烨 等 《广西师范大学学报(自然科学版)》 2014年32卷2期 137-142页
【摘要】 水稻细菌性条斑病菌是水稻的主要病原菌之一,其引发的水稻细菌性条斑病可造成水稻严重减产.利用广西分离株GX01作为建库出发菌株,采用EZ∷Tn5转座子标签法构建GX01菌株的Tn5随机插入突变体库,其后利用针刺接种法在水稻上进行致病性试验,筛...
【中文期刊】 樊军 李鹏飞 等 《玉米科学》 2012年20卷4期 1-8页
【摘要】 以位于玉米第4号染色体短臂与su1紧密连锁的Ac转座子作为Ac供体,结合w22报道系,创建1 507个Ac远距离转座事件.利用基于Southern Blot的IPCR和基于酶切连接的Genome-Walking PCR方法,分离到其中56个...
【中文期刊】 刘风侠 杨文君 等 《华中农业大学学报》 2012年31卷1期 39-43页
【摘要】 为探讨苏云金芽胞杆菌高温诱导产黑色素机制,利用含mini-Tn10转座子载体pIC333构建苏云金芽胞杆菌油松亚种4CA1,随机插入突变体库,以寻找相关调控基因.通过高温诱导筛选得到1株在42℃产黑色素减弱的菌株;克隆得到mini-Tn10...
【中文期刊】 贺云霞 徐慧 等 《安徽农业科学》 2011年39卷13期 7820-7823,7831页
【摘要】 [目的]获得副猪嗜血杆菌减毒株.[方法]应用转座子技术构建转座子插入突变体库,卡那抗性筛选阳性菌株,PCR扩增卡那特异片段去除假阳性,小鼠感染试验检测突变株毒力,并对获得的减毒株进行生物学特性检测.[结果]所获得减毒突变菌株具有与野毒株相似...
【中文期刊】 贺云霞 徐慧 等 《农业科学与技术(英文版)》 2011年12卷2期 295-300页
【摘要】 [目的]获得副猪嗜血杆菌减毒株.[方法]应用转座子技术构建转座子插入突变体库,卡那抗性筛选阳性菌株,PCR扩增卡那特异片段去除假阳性,小鼠感染试验检测突变株毒力,并对获得的减毒株进行生物学特性检测.[结果]所获得减毒突变菌株具有与野毒株相似...
【中文期刊】 巫益鸣 阮丽芳 等 《华中农业大学学报》 2010年29卷5期 577-581页
【摘要】 通过携带Mini-Tn10转座子的温度敏感性质粒载体pIC333构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株的插入突变体库.从突变体库中筛选得到1株芽胞不能在萌发剂L-丙氨酸诱导下萌发的突变株(命名为MA1),进一步的试验表明该突变株菌株的芽胞...
【中文期刊】 黄亦钧 季金殿 等 《农业生物技术学报》 2009年17卷5期 931-936页
【摘要】 嗜麦芽窄食假单胞菌(Streptinomonas maltophilia)YHJ-1是一株能高效降解羽毛角蛋白的菌株;该菌对卡那霉素等多种抗生素不敏感.利用携带Tn5转座酶和卡那霉素抗性转座质粒pRL27和含氯霉素抗性基因盒的pMCm质粒,...
【关键词】 嗜麦芽窄食假单胞菌YHIJ-1; 转座子突变; 插入突变体文库;
【中文期刊】 GAI Ying-bao 李强 等 《台湾海峡》 2008年27卷3期 286-291页
【摘要】 L8和L10是豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)CB101的两株转座子突变株,突变位置发生在nagA基因,可以组成型表达几丁质酶.我们构建了基因文库,利用Southern杂交从中筛选到一个克隆子包含了三个基因:nagB、nag...
【中文期刊】 申佩弘 晁红军 等 《山西农业科学》 2008年36卷11期 26-30页
【摘要】 Methylobacterium sp.MB200是一种粉红色的、兼性甲基营养菌,它能以单碳化合物作为唯一碳源和能源,因此,可以作为氨基酸、工业酶等的生产菌株.以M.sp.MB200一碳代谢途径作为主要研究对象,利用mTn5-gusA-pg...
【中文期刊】 李惠 赵明磊 等 《复旦学报(自然科学版)》 2005年44卷4期 498-502页
【摘要】 以杆状病毒模式种AcMNPV为研究对象,应用基于Tn5转座子的随机转座的方法,构建杆状病毒突变体库.将果蝇hsp70启动子后接绿色荧光蛋白基因后插入Tn5转座子,构建了可以在昆虫细胞中表达,易于跟踪的转座载体.利用体外转座系统将转座子随机插...
【中文期刊】 杨求磊 吴桐 等 《中国兽医学报》 2023年43卷5期 937-944页
【摘要】 猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)毒力因子众多,致病性强弱与其毒力因子有关,但单个或多个毒力因子缺失对某些菌株的毒力影响并不明显,新的毒力因子仍有待发现.为挖掘新的毒力相关因子,用携带转座子T...
【关键词】 pMar4S; SS2; 转座子TnYLB-1;
【中文期刊】 张婷 史继敏 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2021年41卷7期 501-506页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的:建立转座子突变文库,筛选高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae, hvKp)的新毒力基因。 方法:构建转座子突变文库,血清处理,通过转座子测序(transposo...
【中文期刊】 王萍 刘存伟 等 《微生物学通报》 2021年48卷1期 156-164页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [背景]细菌在环境中以复杂的微生物群落形式存在,细菌间的竞争是细菌生存的一种重要方式.鼠伤寒沙门氏菌是一种可引起胃肠道疾病的重要人畜共患病病原体,其在水源、食物或是宿主肠道等环境中均需与其他细菌进行相互作用以获得生存优势.[目的]通过转座子...
【中文期刊】 詹学良 姚严翔 等 《微生物学通报》 2020年47卷6期 1927-1934页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [背景]铜绿假单胞菌PAO1中存在与环乌苷二磷酸(cyclic-di-guanosine monophosphate,c-di-GMP)代谢相关基因PA0575.[目的]探讨铜绿假单胞菌PAO1中环鸟苷二磷酸代谢相关基因PA0575对运动能...
【关键词】 GGDEF/EAL结构域; PA0575转座子突变体; 铜绿假单胞菌PAO1;
【中文期刊】 关业俊 王正 等 《微生物学通报》 2020年47卷8期 2331-2337页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [背景]防御假单胞菌(Pseudomonas protegens) H78是分离于油菜根际的一株生防菌,其能合成藤黄绿菌素(pyoluteorin,Plt)等多种广谱抗生素,H78的rsmA/E双突变体中Plt合成被完全抑制.[目的]通过转...
【关键词】 防御假单胞菌; H78△rsmA/E双突变体; 转座子诱变;
【中文期刊】 王亚琴 张宇瑶 等 《中国中药杂志》 2019年44卷1期 77-81页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 该研究以从感染了青枯病的广藿香植株中分离的青枯菌菌株PRS-84为供试菌株,利用电击转化法,对青枯菌进行Tn5转座子插入突变,在含卡那霉素的培养基上筛选抗性克隆.对抗性克隆进行卡那霉素抗性基因的PCR鉴定,并利用反向PCR技术获得转化子Tn...
【中文期刊】 魏解冰 狄少康 等 《植物学报》 2016年51卷6期 817-826页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 植物反转录转座子是转座子中的一大类.目前,在构建突变体库中应用较多的反转录转座子包括Tnt1、Tos17、Tto1和LORE1.该文比较了利用不同反转录转座子构建的植物突变体库的特征,并对目前应用较为广泛的Tnt1突变体库进行了详细的分析和...