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【中文期刊】 宋世斌 陈国华 《甘肃畜牧兽医》 2024年54卷3期 62-67页
【摘要】 为研究羊传染性脓疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF047编码IMV上的膜蛋白在病毒与宿主互作过程中的功能,本研究选择pBT3-N和pBT3-SET两种不同表达特性的诱饵载体,分别成功构建了 pBT3-N-0RF047、pBT3-S...
【中文期刊】 濮雪 王凯彤 等 《作物学报》 2023年49卷1期 36-45页
【摘要】 MAPKKs是促丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联反应主要成员之一,位于该级联反应通路中间,对信号传递起着收集和发散的关键作用.有研究表明马铃薯StMAPKK4基因响应干旱胁...
【中文期刊】 申松松 冯燕 等 《农业生物技术学报》 2023年31卷7期 1345-1356页
【摘要】 类甜蛋白(thaumatin-like protein,TLP)是一类重要的病程相关蛋白,在植物抵御生物胁迫和非生物逆境中具有重要作用.课题组前期发现小麦(Triticum aestivum)类甜蛋白基因TaTLP1参与小麦抗叶锈病菌防御反...
【关键词】 小麦; 类甜蛋白; GST-pull down;
【中文期刊】 李洁 初智霖 等 《北京师范大学学报(自然科学版)》 2023年59卷4期 629-636页
【摘要】 为探索玉米呼吸爆发氧化酶(RBOH)与钙依赖型蛋白激酶(CDPK)协同调控花粉管极性生长的机制,通过蛋白保守结构域分析获得14个ZmRBOH家族基因,且利用转录组数据分析了ZmRBOH的时空表达模式.结果显示,ZmRBOHD1和ZmRBOH...
【中文期刊】 王君君 宋慧敏 等 《畜牧兽医学报》 2023年54卷1期 293-303页
【摘要】 旨在筛选并鉴定与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)相互作用的宿主蛋白.本试验通过构建猪肺酵母cDNA文库、酵母双杂交、免疫共沉淀、激光共聚焦、过表达和干扰试验等手段,筛选与N蛋白互作的宿主蛋白并研究其对PRRSV复制的...
【关键词】 酵母双杂交; 猪繁殖与呼吸综合征病毒; N蛋白;
【中文期刊】 李淑蓉 粟永萍 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷2期 141-145页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JAB1,进一步验证JAB1与GR的结合作用并证明其对GR的影响.构建与Ga14-BD融合表达的载体pGBKT7-GR LBD,与构建于pACT2载体上的人骨髓cDNA文库杂交,在S...
【中文期刊】 李春波 高锋 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷7期 643-649页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了研究果胶甲基酯酶(pectin methyl-esterase,PME)(EC 3.1.1.11)与植物病毒运动蛋白之间的相互作用,应用RT-PCR方法从烟草(Nicotiana benthamiana)中克隆了PME基因,并测定了全序...
【中文期刊】 王成 郑多 等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷6期 885-890页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polytosis coli,APC)的突变导致家族性结肠息肉腺瘤病和散发性结肠癌,APC基因编码一个具有多个结构域、多种磷酸化状态的大分子蛋白质.APC蛋白可通过C段直接或间接与微管结合,同时...
【中文期刊】 杜清友 刘宝英 等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷4期 414-417页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了探讨胰岛素样生长因子受体1(IGF-R1)分子上的胰岛素样生长因子1(IGF-1)结合位点,建立了研究IGF-1与IGF-R1相互作用的酵母双杂交模型;利用基因体外定点突变的方法,构建了7种IGF-R1突变体;然后通过报告基因活性的定量...
【中文期刊】 张建禹 王晓彤 等 《农业生物技术学报》 2022年30卷8期 1454-1467页
【摘要】 AT-hook核定位蛋白(AT-hook motif nuclear localized protein,AHL)是一类具有AT-hook基序的核定位蛋白,在植物生长发育过程中起着重要的调控作用.为探究木薯(Manihot esculent...
【关键词】 木薯; 木薯AT-hook核定位蛋白19(MeAHL19); 酵母双杂交;
【中文期刊】 洪广成 陈倩 等 《生物学杂志》 2019年36卷3期 18-21页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 酵母双杂交是在真核生物酵母细胞体内研究蛋白质之间相互作用的一种高效分子生物学技术.为了研究水稻氮吸收与利用的分子调控机理,以硝态氮(5 mmol/L KNO3)诱导处理的水稻9311幼苗为材料,构建水稻在高氮响应条件下的酵母双杂交cDNA文...
【中文期刊】 武景阳 李朝翠 等 《动物学研究》 2008年29卷4期 368-372页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 描述了一种新的构建cDNA文库的方法,其中用来合成cDNA第一链的随机引物5'-端被加上碱基d(AC),在cDNA双链合成后所添加的连接头的末端含有碱基d(GTCG).在cDNA舣链3'-端,连接头连接上后会形成一个完整的Sall酶切位点d...
【中文期刊】 张党权 王宏斌 等 《遗传学报》 2006年33卷11期 1027-1036页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 含有LRR基序的胡萝卜抗冻蛋白虽然具有抗冻活性,但却属于植物PGIP家族.胡萝卜抗冻蛋白虽然在氨基酸序列上属于PGIP家族,但却失去了抑制外源真菌的PGase活性,并且获得了一个重要的活性--抑制冰晶的生长和重结晶.胡萝卜抗冻蛋白的这种活性...
【关键词】 植物抗冻蛋白; 多聚半乳糖醛酸酶; 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白;
【中文期刊】 刘烨 赵桂华 等 《中国血吸虫病防治杂志》 2017年29卷4期 464-467,474页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立猫肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)培养体系,构建其酵母双杂交cDNA文库,为筛选弓形虫毒性因子在终末宿主的互作蛋白奠定基础.方法 分别采用组织块法以及低浓度胶原蛋白酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联...
【中文期刊】 路艳芳 刘为勇 等 《华中科技大学学报(医学版)》 2016年45卷4期 398-401页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过酵母双杂交试验筛选与HIV Tat蛋白相互作用的宿主因子.方法 对构建的pGBKT7-tat进行自激活和半乳糖苷试验.运用酵母双杂交实验以HIV Tat作为诱饵,与人均一化基因库进行初筛.对筛选出来的阳性克隆进行测序分析.结果 构...
【中文期刊】 林振 江建明 等 《中国骨质疏松杂志》 2013年19卷9期 930-933页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建乳鼠成骨细胞的酵母双杂交cDNA文库.方法 用TRIzol法提取乳鼠成骨细胞总RNA,按照SMART cDNA Library Construction Kit (CLONTECH)说明书反转录合成双链cDNA,Spin Colu...
【中文期刊】 焦佰海 文艳 等 《南方医科大学学报》 2013年33卷4期 486-490页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 筛选与乙型肝炎病毒HBx蛋白发生相互作用的肝细胞蛋白.方法 构建诱饵重组载体pSos-HBx,经测序正确后将其转化酵母菌cdc25Hα中,检测其在酵母中的表达及有无自激活作用,并利用CytoTrap酵母双杂交的方法筛选与诱饵蛋白HBx...
【关键词】 HBx蛋白; CytoTrap酵母双杂交; 蛋白质相互作用;
【中文期刊】 李靓 崔柳青 等 《郑州大学学报(医学版)》 2013年48卷1期 24-27页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白.方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8 C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵...
【中文期刊】 柴丹丹 李庆华 等 《郑州大学学报(医学版)》 2012年47卷1期 16-20页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用.方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHH cDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构...
【关键词】 S腺苷高半胱氨酸水解酶; 酵母双杂交; 诱饵载体;
【中文期刊】 周小海 王春燕 等 《生物学杂志》 2012年29卷1期 16-20页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 神经元蛋白3.1(P311)是肺泡发育的上游调节因子.以pEGFP-P311重组质粒为模板,利用PCR方法扩增P311基因编码序列.通过Nde I和BamH I位点插入诱饵载体 pGBKT7,构建重组诱饵载体pGBKT7-P311.重组体转...
【中文期刊】 雷科锋 王翼飞 等 《中华胃肠外科杂志》 2012年15卷2期 169-173页 MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 探讨胃癌细胞中SerpinB5能与MAFbx的相互作用及其作用位点.方法 采用酵母双杂交及免疫共沉淀方法检测SerpinB5与MAFbx之间的相互作用.分别用RNA干扰及瞬间转染pGBKT7-SerpinB5调节SerpinB5表达水...
【中文期刊】 马晶 赵国强 等 《郑州大学学报(医学版)》 2011年46卷1期 45-48页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨小电导Ca2+激活K+(SK)通道亚型SK2通道与肌浆网(RyR)2蛋白的相互作用.方法:经PCR扩增及酶切鉴定,构建含有SK2和RyR2目的基因片段的酵母表达载体pGBKT7-SK2和pGADT7-RyR2.pG-BKT7-SK...
【关键词】 小电导Ca2+激活K+通道; 肌浆网; 酵母双杂交;
【中文期刊】 温小杰 郝晨阳 等 《遗传》 2011年33卷1期 88-94页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 F-box蛋白是E3泛素连接酶SCF复合体的重要亚基,通过底物蛋白的特异识别发挥功能.TaFRA是在盐胁迫差异表达片段基础上通过RACE方法获得的一个基因,编码F-box蛋白.文章利用TaFRA基因构建诱饵表达载体,直接用cDNA+pGAD...
【中文期刊】 侯永杰 李杰 等 《郑州大学学报(医学版)》 2011年46卷6期 835-838页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:观察杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基stt3a的酵母双杂交诱饵载体表达产物对酵母细胞有无毒害作用并检测其自激活作用.方法:应用PCR方法获得stt3a可溶端的基因片段,将基因片段按正确的方向插入到酵母表达质粒pGBKT7中,经限制性内酶切鉴定...
【中文期刊】 周扬帆 王晓辉 等 《安徽医科大学学报》 2011年46卷10期 989-993页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子 (TRAFs)各成员间的相互作用及各成员间的关系.方法 利用PCR技术扩增出TRAFs;构建到pDBLeu、pPC86载体上,分别形成诱饵、猎物质粒;转化,扩增酵母菌;将诱饵、猎物菌液结合酵母双杂交阵列组...
【关键词】 酵母双杂交Mating; TRAFs; 相互作用;
【中文期刊】 李伟 李婷婷 等 《遗传》 2010年32卷7期 712-718页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 SH2D4A 是SH2蛋白家族成员之一,可能参与酪氨酸蛋白激酶相关受体介导的信号转导,调节细胞的生长、增殖和分化,进而影响人类疾病的发生.文章运用酵母双杂交技术筛选SH2D4A相互作用蛋白,并利用酵母交配(mating)实验和GST pul...
【关键词】 SH2D4A; 酵母双杂交技术; GST pull-down;
【中文期刊】 朱丹 王翀 等 《中南大学学报(医学版)》 2010年35卷7期 649-654页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:验证带有核定位信号的维甲酸受体α(nuclear localization signal-retinoic acid receptor α, NLS-RARα)与Ubiquilin 1(UBQLN1)蛋白之间的相互作用.方法:将表达N...
【中文期刊】 王慧 周玉峰 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷10期 959-964页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 应用酵母双杂交技术筛选小鼠脑cDNA文库中与鼠巨细胞病毒即刻早期蛋白M122相互作用的宿主因子,为进一步研究巨细胞病毒的致病机制奠定实验基础.方法将诱饵质粒pGBKT7-M122转化酵母菌AH109,Western blot检测诱饵蛋...
【中文期刊】 王春苗 钟雪萍 等 《环境昆虫学报》 2009年31卷1期 41-45页 ISTICPKUCSCD
【摘要】 草地贪夜蛾Spdoptera frugiperda是危害玉米、高粱等农作物的重要害虫.草地贪夜蛾卵巢细胞系IPLB-Sf-9(Sf9)广泛应用于病毒学研究和真核生物基因表达.本研究从Sf9细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以p...
【中文期刊】 王维新 黄倢 等 《水生生物学报》 2009年33卷3期 552-555页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 <篇首> 对虾暴发性流行病是近十年来危害对虾养殖业发展的重要病害之一,其主要病原为对虾白斑综合症病毒(WSSV)[1].近年来对WSSV的研究主要集中在其囊膜蛋白、黏附蛋白等结构蛋白方面[2].本实验室经病毒结合分析[3]和病毒铺覆蛋白印迹技术...
【中文期刊】 单志新 林秋雄 等 《南方医科大学学报》 2009年29卷12期 2383-2386,2390页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用酵母双杂交系统鉴定巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与Ⅱ型穿膜蛋白CD74胞外片段间可能的相互作用区域.方法 利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为载体的人全长MIF、MIF~(50-65)、MIF~(1-50/65-115)的重...
【关键词】 酵母双杂交; 巨噬细胞移动抑制因子; CD74;
【中文期刊】 喻达时 赵琼 等 《遗传》 2009年31卷10期 1037-1041页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用RT-PCR方法从拟南芥中分离了1个CK基因家族成员CK1A,该基因的ORF全长2112 bp,编码一条703个氨基酸残基的多肽.构建了CK1A基因的植物表达载体35S:GFP:CK1A,采用基因枪法进行的洋葱表皮细胞GFP瞬时表达实验...
【中文期刊】 王翀 王东生 等 《四川大学学报(医学版)》 2009年40卷3期 382-384,402页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过实验验证带有核定位信号的维甲酸受体α(NLS-RARα)与JTV1蛋白之间的相互作用.方法 将表达NLS-RARα诱饵蛋白和JTV1靶蛋白的两种重组表达质粒共转化AH109酵母菌,通过一对一的酵母双杂交技术验证两者在活细胞内的相互...
【中文期刊】 薛颖 黄维藻 等 《应用与环境生物学报》 2008年14卷3期 337-340页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 RBX1蛋白是基于Cullin蛋白的E3复合体中的一个亚基,对于基于Cullin蛋白的E3复合体结合E2及Cullin蛋白的活化具有重要作用.利用RT-PCR分离到水稻RBX1cDNA,序列比对分析显示,水稻RBX1与拟南芥、人、果蝇及酵母...
【中文期刊】 陈说 肖海鹏 等 《中山大学学报(医学科学版)》 2008年29卷5期 521-525页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]FAM3A(family with sequence similarity 3,member A)为新近发现的细胞因子FAM3的家族成员之一,本研究检测FAM3A的相互作用蛋白.[方法]克隆FAM3A并连接到pGB载体,转化酵母Y1...
【关键词】 FAM3A; 睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸激酶; 酵母双杂交;
【中文期刊】 王琪 张静 等 《重庆医科大学学报》 2008年33卷2期 133-135,193页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过一对已知蛋白Pak和Chp间的相互作用介绍酵母双杂交RRS筛选系统,以期将此系统更广泛的用于蛋白间相互作用的研究.方法:挑选酵母温度缺陷株cdc25-2的低回复突变单克隆,醋酸锂法制备酵母感受态细胞.重组质粒Met425-Myc-...
【中文期刊】 胡海英 张烁 等 《中国病理生理杂志》 2007年23卷6期 1041-1044页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:筛选hCDC14A(human cell division cycle gene 14A)的相互作用蛋白,探索功能联系.方法:酵母双杂交筛选hCDC14A的可能相互作用蛋白,Pulldown实验和免疫共沉淀实验验证蛋白质间相互作用,免...
【中文期刊】 胡国库 颜永红 等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷5期 678-682页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 作为研究木质素降解系统的模式微生物黄孢原毛平革菌,迄今还没有蛋白-蛋白相互作用方面的报道.本研究利用酵母双杂交技术构建了低氮培养基中培养2 d和3 d的酵母双杂交cDNA文库,分别得到2.5×105和3.0×105个重组子.以14-3-3蛋...
【中文期刊】 罗星 张峪涵 等 《中国公共卫生》 2006年22卷4期 444-445页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础.方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用...
【中文期刊】 张方 施毅 等 《解放军医学杂志》 2006年31卷5期 404-406页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)作用后的肺泡巨噬细胞(AMs)酵母双杂交cDNA文库,探寻炎症条件下与糖皮质激素受体(GR)相互作用的蛋白质分子.方法用LPS(10mg/ml)和Dex(10-5mol/L)作用于原代培养的肺泡巨...
【中文期刊】 李岩 鲍朗 等 《四川大学学报(医学版)》 2006年37卷3期 349-352页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的观察结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用.方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌 ESAT-6与CFP-10 基因,构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10,经酶切分析和DNA测序证实连...
【中文期刊】 田瑞 李英娜 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2006年22卷6期 484-490页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 选择ZO-1的PDZ1结构域作为研究对象,以酵母双杂交为筛选系统,筛选随机多肽文库和与其它PDZ结构域的配体进行相互作用,阐明ZO-1 PDZ1的配体结合特性.ZO-1 PDZ1识别配体C末端保守的氨基酸序列通式可以表示为:[S/T][F/...
【中文期刊】 窦洁 姚堃 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2006年26卷4期 289-292页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的构建用于筛选人CD4结合蛋白的酵母双杂交饵载体,并对其功能进行鉴定.方法RT-PCR扩增编码CD4的cDNA.构建双杂交饵载体pAS2-1-CD4,并转化入宿主酵母菌Y190中.通过测定报告基因--β-半乳糖苷酶的活性,判断饵载体自激活...
【中文期刊】 李兰松 李维琪 等 《微生物学通报》 2006年33卷2期 68-73页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 先以含全长SR-BI cDNA序列的重组质粒pMD18-T-rS为摸板进行PCR反应扩增SRBI得到胞外域cDNA片段,经测序证明正确后,定向克隆到酵母双杂交表达载体,然后与pGBKT7-ApoA-I质粒共转化酵母细胞,通过报告基因及酵母交...
【关键词】 载脂蛋白AI(ApoA-I); B族I型清道夫受体(SR-BI); SR-BI胞外域;