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            【中文期刊】 苗朝悦  杜乐  等 《中国生物工程杂志》 2023年43卷9期 33-45页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 大肠杆菌表达体系因其表达量高、周期短、成本低等诸多优势特征而被广泛用作重组异源蛋白质的表达宿主.据统计超过30%的重组蛋白质药物和50%重组蛋白质的制备是使用大肠杆菌作为表达宿主.蛋白质错误折叠或未折叠以及包涵体形成是大肠杆菌表达体系更广泛...

            【关键词】 大肠杆菌表达体系重组异源蛋白质可溶性表达

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            【中文期刊】 费嵩禹  王梓懿  等 《食品与生物技术学报》 2023年42卷1期 83-92页

            【摘要】 通过表达水平分析比较,从生抱噬纤维菌Sporocytophaga sp.CX11基因组中筛选出在菌株降解纤维二糖过程中起关键作用的β-葡萄糖苷酶基因SmBgl3A.该基因含有2 283 bp碱基对,编码760个氨基酸,其编码蛋白质与来源于B...

            【关键词】 β-葡萄糖苷酶GH3家族生孢噬纤维菌CX11

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            【中文期刊】 郭瑞琪  向康铭  等 《食品与发酵工业》 2023年49卷7期 26-31页

            【摘要】 蛋白质谷氨酰胺酶(protein glutaminase,PG)可水解蛋白质侧链的谷氨酰胺残基,生成氨和蛋白质-L-谷氨酸,从而增加负电荷、降低蛋白等电点,进而改善蛋白质的功能特性.但其生产菌株解朊金黄杆菌的产酶量较低,仅有0.258 U/...

            【关键词】 毕赤酵母蛋白质谷氨酰胺酶异源表达

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            【中文期刊】 李跃萍  邱曙东  等 《南方医科大学学报》 2007年27卷7期 936-940页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建包括神经营养因子4(NT4)信号肽,p53氨基端短活性肽(12~26位氨基酸)及蛋白质转导结构域-黑腹果蝇触足肽(Ant)序列在内的异源融合基因,并以腺病毒作为基因转移载体观察NT4p53(N15)Ant基因在体外对肝癌细胞系He...

            【关键词】 神经营养因子4信号肽p53蛋白质转导结构域

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            【中文期刊】 吕青  陈枢青  等 《中国药学杂志》 2007年42卷21期 1610-1614页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 获得有活性的人CYP2B6重组酶,用于进一步药物代谢研究.方法 采用Bac-to-Bac杆状病毒介导的昆虫细胞表达系统进行人CYP2B6重组酶的表达,采用His抗体进行蛋白质印迹分析.安非他酮作为底物进行重组酶活性测定,高效液相色谱法...

            【关键词】 细胞色素 P450 2B6杆状病毒高效液相色谱

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            【中文期刊】 郝林  徐昕  等 《植物学通报》 2004年21卷1期 101-112页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 近年来,以植物为生物反应器异源表达和生产具有药用及商业价值的蛋白质发展迅速,某些产品已进入临床试验,且获得了很好的疗效;另一类在植物体中表达的具有重要农艺价值的蛋白质可介导植物抵抗病原体,即植物抗体介导的抗性,是植物抗病原体分子育种的又一途...

            【关键词】 重组蛋白转基因植物植物抗体

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            【中文期刊】 刘玉军  小川智子  等 《生物工程进展》 2000年20卷6期 79-83,67页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对生物大分子形状的正确了解有助于对其功能的解析.事实上,借助于电子显微镜观察法,使我们在对构成细胞各组分功能的探讨和研究方面收益匪浅.自从生物学家们认识到DNA在细胞行使其功能中的重要性以来,电子显微镜便成为一种最重要的技术手段而被用于分析...

            【关键词】 DNADNA-蛋白质复合体杂合物

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            【中文期刊】 潘俏俏  裘娟萍  等 《工业微生物》 2018年48卷4期 5-11页ISTICCA

            【摘要】 Methanopyrus sp.SNP6是一株极端嗜热产甲烷菌,本文将其黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶基因(fads)进行生物信息学分析并在大肠杆菌中加以表达.生物信息学分析发现,FAD合成酶由150个氨基酸残基组成,理论分子量为17 049.9...

            【关键词】 嗜热产甲烷菌FAD合成酶异源表达

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            【中文期刊】 王赟  章晓庆  等 《食品与药品》 2014年2期 77-80页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建毕赤酵母基因工程菌,以实现朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶的异源高效表达。方法人工合成朱黄青霉HI-4的α-1,6-葡聚糖酶基因ZHdex,克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电转入毕赤酵母GS115。甲醇诱导目的蛋白表达。结果...

            【关键词】 朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶异源表达

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            【中文期刊】 秦兰霞  徐德昌  等 《生物信息学》 2005年3卷3期 127-129页ISTIC

            【摘要】 描述了大肠杆菌异源重组蛋白质的形成、制备、变性和复性,综述了国内外变性、复性的有效方法.

            【关键词】 包含体变性复性

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            【中文期刊】 宁云山  李妍  等 《生物技术通讯》 2001年12卷3期 237-240页ISTICCA

            【摘要】 包含体的形成是异源蛋白质在大肠杆菌中高效表达的必然结果,也是目前产生重组蛋白质最有效的方法之一.不可溶、无生物活性的包含体必须经过变性、复性才能获得天然结构,完成特定的生物学功能.聚集是造成重组蛋白质复性产率低下的主要因素,因此理解蛋白质聚...

            【关键词】 包含体聚集复性

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            【中文期刊】 王雪松  李躬军  等 《吉林大学学报(工学版)》 2016年46卷4期 1368-1372页

            【摘要】 摘 要;利用RT-PCR技术和酶切连接技术克隆得到人参皂苷生物合成关键酶DS和D12H基因,并构建出两种基因的表达载体DS-pAUR123和D12H-pAUR123.通过热转化法将两个表达载体转化到酿酒酵母中,得到重组工程菌.两种基因在重组...

            【关键词】 生物工程人参皂苷异源共表达

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            【中文期刊】 姚其玉  张梁  等 《食品与生物技术学报》 2015年34卷11期 1172-1177页

            【摘要】 为实现磷脂酶A1(PLA1)的异源表达,将杨氏柠檬酸杆菌(CICC No.21596)PLA1基因插入栽体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-pla1,并将重组质粒转入宿主菌E.coliBL21(DE3)中,获得重组菌...

            【关键词】 杨氏柠檬酸杆菌磷脂酶A1表达

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            【中文期刊】 张飞飞  石牡丹  等 《安徽农业科学》 2015年20期 29-31,72页

            【摘要】 [目的]提高最常用的异源蛋白表达宿主菌E.coli BL21(DE3)的转化效率.[方法]利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修复功能.[结果]敲除了编码降解外源DNA的Ⅰ型限制性内切酶的ksdR基因,获得了高转化效率以及其他功能与BI21...

            【关键词】 重组工程基因敲除双链断裂修复

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            【中文期刊】 胡廷章  钟彦  等 《西南农业学报》 2013年26卷6期 2281-2284页

            【摘要】 为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能,利用PCR方法扩增目的基因,采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性分析对OsLEA2基因进行研究.结果表明,构建的原核表达载体pET32a-OsLEA2,转化到E.coli BL21中,得到表达...

            【关键词】 胚胎发育后期丰富蛋白OsLEA2异源表达

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            【中文期刊】 凌雪  代艳  等 《生物工程学报》 2024年40卷2期 517-528页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 α-1 抗胰蛋白酶Z型突变体蛋白(α-1 antitrypsin Z-mutant protein,ATZ)是引发α-1 抗胰蛋白酶缺陷症(α-1 antitrypsin deficiency,AATD)的主要原因,研究ATZ蛋白的泛素化修...

            【关键词】 α-1抗胰蛋白酶泛素化E3泛素连接酶

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            【中文期刊】 孙锦霞  刘钟滨  《生物化学与生物物理进展》 2010年37卷9期 967-974页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 运用生物信息学技术从嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)CICC 20156中克隆获得羧酸酯酶基因,构建黑曲霉和毕氏酵母表达质粒,将重组质粒分别转化毕氏酵母GS115和黑曲霉pyrG基因缺陷株M5...

            【关键词】 羧酸酯酶嗜热脂肪芽孢杆菌黑曲霉

            OA
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            【中文期刊】 李庆猛  李盛陶  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷6期 26-33页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 糖基转移酶Alg11作为N-糖基化途径中一个重要蛋白,功能为催化将甘露糖转移到底物DPGn2 M3(Dolichyl-pyrophosphate-GlcNAc2 Mannose3)上进而生成DPGn2 M4和DPGn2 Ms这两种多萜醇寡糖...

            【关键词】 N-糖基化糖基转移酶Alg11液质联用(LC-MS)

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            【中文期刊】 曾钰  熊亮  等 《菌物学报》 2018年37卷11期 1479-1488页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 异源蛋白质分泌效率低限制了重组酿酒酵母的多种药用蛋白和工业酶生产.挖掘促进蛋白质生物合成和分泌的关键基因,是提高异源蛋白质生产效率的重要手段.酿酒酵母细胞壁完整性影响异源蛋白质分泌,本研究利用基于CRISPR/Cas9的基因组编辑技术,破坏...

            【关键词】 纤维素酶酿酒酵母β-葡萄糖苷酶

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            【中文期刊】 冀柳欣  胡又佳  《微生物学通报》 2018年45卷8期 1804-1811页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 丝状真菌不仅是致病菌,而且在异源表达工业酶、化学制品以及药物活性物质中发挥着越来越重要的作用.随着人类基因组计划的实施和推进,生命科学研究已进入了功能基因组时代,特别是蛋白质组学,在蛋白质水平对丝状真菌细胞生命过程中蛋白质功能和蛋白质之间的...

            【关键词】 丝状真菌蛋白质组学功能基因组学

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            【中文期刊】 李小波  王婷婷  等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2010年28卷5期 332-336页MEDLINEISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 构建家蝇抗菌肽(攻击素, attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达.方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPI...

            【关键词】 家蝇抗菌肽攻击素

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            【中文期刊】 阮昊  陈枢青  等 《中国现代应用药学》 2009年26卷9期 697-702页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2(CYP1A2)重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究.方法 以人肝组织提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质...

            【关键词】 细胞色素P4501A2杆状病毒草地夜蛾细胞

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            【中文期刊】 蔡文伟  王正鹏  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷8期 92-96页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 甘蔗茎秆是利用转基因方法生产重组药用蛋白或有价值的化合物的理想器官,构建能在甘蔗茎秆中高水平表达异源蛋白质的表达载体是非常有意义的.而一个高效表达的载体,启动子则是其最重要元件之一,因此,茎秆特异性启动子的获得是甘蔗作为生物反应器的前提.利...

            【关键词】 甘蔗启动子茎秆特异表达

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