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【中文期刊】 代基强 野庆松 等 《医学研究生学报》 2020年33卷2期 133-138页 ISTICPKU
【摘要】 目的 ezrin基因在胰腺癌中过表达,其上游序列对于基因表达具有重要作用.文章拟敲除胰腺癌细胞ezrin基因转录调控区,鉴定其基因编辑gRNA靶位点.方法 将携带ezrin基因上游片段的报告基因表达载体瞬时转染胰腺癌细胞Panc-1,采用双...
【中文期刊】 冯万有 杨燕燕 等 《畜牧兽医杂志》 2022年41卷2期 15-21页
【摘要】 CRISPR/cas9基因编辑系统可高效的实现目标基因靶向敲除,是当前基因功能研究的强有力工具.然而目前该系统主要针对编码蛋白质基因的靶向编辑,靶向非编码基因,尤其是miR-NAs的基因少有报道.由于miRNA序列的简短性和多样性,从基因功...
【中文期刊】 张佳珊 谭韬 《中国免疫学杂志》 2019年35卷6期 767-768,封3-封4页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 CRISPR是一种特别的免疫系统,它可以对入侵到细菌或古生菌体内的病毒和核酸进行特异性识别,利用Cas9蛋白酶进行切割,达到自身免疫的效果,它是绝大部分细菌和一些古生菌的天然免疫系统.本文通过对近期CRISPR的研究文献的阅读,总结了CRI...
【关键词】 CRISPR-Cas9; 靶向敲除; 基因编辑;
【中文期刊】 郭晓龙 张青峰 等 《生物学杂志》 2017年34卷6期 19-22页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建靶向人ezrin增强子关键区的CRISPR/Cas9载体并检测其基因敲除功能.设计2个gRNA,分别靶向人ezrin增强子关键区的上、下游.合成gRNA寡核苷酸序列,连接至质粒pX459构建重组质粒pX459-sgRNA-EL和pX45...
【关键词】 靶向敲除; ezrin增强子; CRISPR/Cas9;
【中文期刊】 姜安丽 张建业 等 《山东大学学报(医学版)》 2003年41卷3期 238-240页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建鼠LTC4合酶基因靶向敲除载体,用于转染鼠胚胎干细胞,建立LTC4合酶基因敲除鼠.方法:分离、克隆LTC4合酶基因的1.85kb和1.35kb片段,作为靶向载体的5'同源臂和3'同源臂,重组到pJNS2载体中,筛选鉴定阳性重组子....
【中文期刊】 樊玉梅 段相林 等 《生物学通报》 2008年43卷2期 1-4页 ISTICCA
【摘要】 人类对于自身基因功能的研究是生物学领域非常重要的一项内容.随着人类基因组计划的完成和人类基因信息的不断完善,基因功能的研究已成为近年来国际上的热点.基因敲除小鼠技术的建立和发展使得科学家们能够从分子、细胞及动物整体水平研究特定基因在生物发育...
【中文期刊】 王超玄 孙航 《生物工程学报》 2019年35卷5期 784-794页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因敲除小鼠技术的建立和发展使得人们为研究基因的功能和寻找新的治疗人类疾病的靶点提供了强有力的支持.基因打靶和基因捕获是两种通过胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)构建基因敲除小鼠的技术.基因打靶通过同源重组替换内源...
【中文期刊】 陈秀丽 黄海燕 等 《遗传》 2022年44卷9期 783-797页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 人类 β-地中海贫血的发病机制与 β-样珠蛋白基因异常表达息息相关.人类 β-样珠蛋白基因以5'-ε-Gγ-Aγ-δ-β-3'的顺序排列于β-珠蛋白基因座,受5'LCR(locus control region)中5个超敏位点(hypers...
【中文期刊】 蔡昊 桂峥 等 《蚌埠医学院学报》 2022年47卷4期 437-441,446页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建Trib3基因敲除大鼠模型及基因型鉴定.方法:靶向敲除大鼠Trib3基因后,通过基因测序和PCR技术对大鼠Trib3基因的第3号外显子删除情况进行检测与基因型鉴定.结果:得到阳性F0代首建大鼠Trib3-/+,通过自交得到F1与F...
【学位论文】 作者: 金莲 导师:何农跃 东南大学 生物医学工程 生物医学工程(硕士) 2014年
【摘要】 壳聚糖和聚乙烯亚胺(PEI)是两种受到广泛研究的阳离子聚合物基因载体,能有效浓缩核酸物质、保护其不被降解、将核酸物质转入细胞并表达。而转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)是一种新的分子生物学编辑工具,能任意靶向基因组任意位点,实现基因敲...
【学位论文】 作者: 孔凡铭 导师:郝希山 天津医科大学 临床医学 临床医学;肿瘤学(博士) 2013年
【摘要】 目的:采用“蛋白敲除”技术——即调控SCF泛素-蛋白水解酶的底物特异性,降解乳腺癌细胞内磷酸化的ErbB家族蛋白,在细胞及动物模型中观察对乳腺癌细胞增殖、化疗敏感性以及细胞恶性转化的影响;探讨、研究蛋白敲除技术降解ErbB家族的抗肿瘤机制,...
【会议论文】张勇 中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会 2013年
【摘要】 近年来,随着现代基因操纵技术的完善及基因组测序计划的推进,针对植物基因组特定基因(或区域)进行"基因组定向修饰"(GT),逐渐成为可能.通过对基因组特定区域进行精确定向修饰:一方面可以针对目标序列进行定向敲除,获得突变材料,对目标基因功能进...
【中文期刊】 杨雅雯 夏敏 等 《磁共振成像》 2024年15卷4期 106-112页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 评估Rho激酶(Rho-kinase,ROCK)1在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的表达,合成ROCK1靶向探针,并探索其可视化AS斑块的可行性.材料与方法 ROCK1抗体与超小超顺磁性氧化铁纳米颗粒偶联制...
【中文期刊】 赛文莉 姚敏 等 《中华肝脏病杂志》 2019年27卷11期 866-871页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨肝癌组织Wnt3a异常表达及其靶向干预的抑制作用. 方法 以自身配对法收集2012年至2013年原发性肝癌患者术后癌和癌旁组织,以组织芯片和免疫组织化学染色法及特异性抗体检测肝癌组织及癌周组织Wnt3a表达情况,结合随访数据评估其...
【中文期刊】 吴云成 赵永波 《中国神经科学杂志》 2004年20卷4期 321-326页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 RNA干扰(RNAi)是指生物体内利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱发序列特异的转录后基因沉默(PTGS)的现象,它可以通过抑制蛋白表达模拟基因敲除技术.RNAi主要通过dsRNA被核酸酶Dicer切割成21~25nt的小干扰RNA...
【中文期刊】 周淼 焦莉 等 《实用医学杂志》 2018年34卷21期 3508-3512页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 探讨干扰素调节因子8(IRF-8)对气道再生的影响及其机制.方法 收集健康受试者和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的人支气管上皮细胞(HBEC)和痰液,检测IRF8的表达并分析IRF8表达与FEV1占预计值的百分比(FEV1%)的相关...
【中文期刊】 管丽红 林俊堂 《眼科新进展》 2018年38卷9期 801-803,814页 ISTICPKUCA
【摘要】 规律成簇间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及相关核酸内切酶9(CRISPR associated protein,Cas9)技术是...
【关键词】 CRISPR-Cas9; 基因组编辑; 基因治疗;
【中文期刊】 刘海龙 谌阳 等 《遗传》 2018年40卷7期 561-571页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 CRISPR/Cas技术能高效进行基因组定点编辑,但不同细菌来源或人工改造的Cas9以及Cpf1等核酸酶识别的PAM(protospacer adjacent motif)有差异,因此不同的基因编辑核酸酶可能采用不同类型的sgRNAs(sm...
【关键词】 猪; miRNA; CRISPR/Cas9;
【中文期刊】 邹征伟 赖兴强 等 《中山大学学报(医学科学版)》 2018年39卷5期 660-668页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法,比较带有oriP-EBNA1序列的episomalCRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别.[方法]首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白Ds...
【关键词】 CRISPR/Cas9; episomal载体; 敲除;
【中文期刊】 陈达华 厉有名 《浙江大学学报(医学版)》 2017年46卷4期 427-432页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas9 基因编辑技术构建两种一体化载体,用于敲除AML12 细胞系中的微小RNA(microRNA, miR)-101a.方法:设计三条小鼠靶向miR-101a 基因的小向导RNA(sgRNA) 以及一条靶向绿色荧...
【中文期刊】 刘丁源 邱婷 等 《遗传》 2016年38卷8期 756-764页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 IAA2(Indole Acetic Acid2)是拟南芥Aux/IAA生长素响应基因大家族中的一员,目前还没有它的突变体的报道,阻碍了对其功能和作用机制的深入研究.在CRISPR/Cas9基因组编辑技术中,1个sgRNA只能靶向基因的1个...
【关键词】 CRISPR/Cas9; 多重sgRNA串联; 基因组编辑;
【中文期刊】 雷建峰 徐新霞 等 《西北植物学报》 2016年36卷5期 857-864页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 GGB是抗旱负调控基因.为了获得拟南芥ggb突变体材料,构建了以拟南芥U6启动子驱动GGB sgRNA的CRISPR/Cas9基因组编辑载体.将构建好的编辑载体利用农杆菌介导的浸花法转化野生型拟南芥.对转基因后代GGB基因的测序结果分析发现...
【关键词】 拟南芥; CRISPR/Cas9; GGB;
【中文期刊】 孙冉冉 陈晓龙 等 《郑州大学学报(医学版)》 2016年51卷1期 22-27页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒.方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并合成靶向PD-L1基因的5对sgRNA序列.为了进一步降低克隆背景和提高构建阳性率,在受体载体中引入毒性蛋白系统(Ccd)...
【关键词】 PD-L1; 肿瘤免疫; CRISPR/Cas9;
【中文期刊】 何玉婷 李娟 等 《郑州大学学报(医学版)》 2016年51卷3期 293-297页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建靶向低氧诱导因子(HIF)-1α基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒,并体外鉴定其敲除效果.方法:设计靶向HIF-1α基因的gRNA序列,将其插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体pCAG-T7中,转化后挑取克隆,进行测序验...
【关键词】 HIF-1α; CRISPR/Cas9; 肝细胞癌;
【中文期刊】 刘静 何嘉玲 等 《中国比较医学杂志》 2015年4期 1-7,13页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因,建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体,将其体外转录成TALEN mRNAs,通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中,胚胎检测TALEN的敲...
【中文期刊】 刘文娟 《中国病理生理杂志》 2015年10期 1805-1805页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】
KCNE2是电压依赖性离子通道的辅助β亚基,在维持心电稳定性中起着十分重要的作用。有研究发现,KCNE2基因敲除小鼠发生心肌肥大、纤维化和收缩力减弱。
我们以往的研究发现,KCNE2具有双向调节ICa,L的作用,通过RNAi降低心...
【中文期刊】 李飞达 李勇 等 《遗传》 2014年36卷9期 903-911页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 DNA编辑技术是基因靶向修饰技术的研究热点,已广泛应用于生物医学和农业研究.然而,传统基因打靶技术存在效率低、成本高、工作量大等缺点,其应用受到了极大的限制.文章利用最近发展起来的新型人工核酸酶——转录激活因子样效应物核酸酶(Transcr...
【中文期刊】 付明翠 文颂 等 《磁共振成像》 2011年02卷5期 331-336页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究氧化低密度脂蛋白(oxLDL)靶向的超微超顺磁性纳米氧化铁(USPIO)探针在载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-)颈动脉动脉粥样硬化MR成像中的作用.方法 将聚乙二醇(PEG)包被的USPIO与抗小鼠oxLDL抗体结合,构建a...
【中文期刊】 楼宏强 廖苏梅 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2009年29卷8期 677-682页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 其引起J774A.1细胞坏死和细胞凋亡率(30.6%和22.7%)也明显低于野生株(48.2%和35.2%)(P<0.05).结论 fliN基因产物与问号钩体黏附细胞、分泌毒力因子和诱导细胞凋亡密切相关.采用基于自杀质粒基因敲除技术可用于研...
【中文期刊】 陈千杰 张金三 等 《温州医科大学学报》 2018年48卷6期 391-395,400页 ISTICCA
【摘要】 目的:研究胰腺癌细胞中YAP1对胰腺癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法:利用CRISPR-Cas9技术,在人胰腺癌L3.6细胞中敲除YAP1基因,并用Western blot验证;通过MTT比色法及EdU流式检测敲除YAP1前后的癌细胞增殖能...
【中文期刊】 董旭 张兆域 等 《天津医科大学学报》 2018年24卷5期 395-398页 ISTIC
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除CBX2基因的A549细胞系.方法:设计针对敲除CBX2的short guide RNA(sgRNA),并克隆到载体PX459中.将测序正确的重组质粒转染到A549细胞中,利用嘌呤霉素筛选转染...
【关键词】 CBX2基因; CRISPR/Cas9系统; 基因敲除;
【中文期刊】 李双 马珊珊 等 《基础医学与临床》 2018年38卷3期 375-380页 ISTICCA
【摘要】 目的 应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,完成HEK293T细胞中DMD基因第51号外显子(exon51)高效的靶向敲除.方法 设计靶向人DMD基因exon515′端及3′端的sgRNA并克隆至CRISPR/Cas9载体质粒PX459中...
【关键词】 CRISPR/Cas9; DMD基因; 单载体质粒;
【中文期刊】 朱跃 彭昌民 等 《军事医学》 2018年42卷2期 119-123,157页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 利用CRISPR/Cas9技术,构建靶向精氨酸甲基转移酶3(PRMT3)的基因编辑质粒,建立prmt3基因稳定敲除的A549细胞株,检验prmt3基因敲除效率及其对A549细胞增殖的影响.方法 设计靶向prmt3基因的sgRNA序列,...
【关键词】 PRMT3; CRISPR/Cas9; 非小细胞肺癌;
【中文期刊】 范启明 李若碧 等 《癌变·畸变·突变》 2017年29卷5期 352-357,363页 ISTICCA
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas9系统在HEK293FT细胞系中敲除基因并探讨其在检测化学物毒性中的应用.方法:设计CYP2E13对分别靶向CYP2E1基因第2、第3和第7外显子的sgRNA序列并构建PX461表达载体;将携带靶向CYP2E1...
【关键词】 CYP2E1; CRISPR/Cas9; 基因敲除;
【中文期刊】 孙嘉慧 栗梓仓 等 《生物技术通讯》 2017年28卷6期 785-788页 ISTICCA
【摘要】 目的:建立CRISPR/Cas9系统用于敲除人源雌激素受体α(ERα)基因(ESR1),并利用此细胞模型初步检测ESR1基因对乳腺癌细胞侵袭能力的影响.方法:设计一个靶向人源ESR1基因第2外显子的单向导RNA (sgRNA),分别克隆表达...
【关键词】 CRISPR/Cas9系统; 雌激素受体α; 基因敲除;
【中文期刊】 张鑫 孙嘉慧 等 《生物技术通讯》 2017年28卷6期 781-784页 ISTICCA
【摘要】 目的:建立CRISPR/Cas9n系统,用于敲除人源黏着斑蛋白(VCL)基因.方法:设计一个靶向人源VCL基因第3个外显子的单向导RNA (sgRNA),分别克隆表达载体后,通过慢病毒转入人MDA-MB-231细胞,通过PCR及Wester...
【关键词】 CRISPR/Cas9系统; 黏着斑蛋白; 基因敲除;
【中文期刊】 宋爽 胡彬 等 《中国医疗器械信息》 2019年25卷12期 83-85页
【摘要】 目的:本研究旨在通过靶向超声分子成像评估小鼠动脉粥样硬化斑块的早期诊断.方法:将40只载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠和40只C57BL/6野生型小鼠随机分为4组,每组20只.实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料20周后,制备靶向超声微泡.结...
【中文期刊】 徐铭 徐宏治 等 《中国临床神经科学》 2015年23卷6期 615-623页 ISTIC
【摘要】 目的 将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因,拟通过Cre/LoxP系统条件性敲除Alk1基因建立脑动静脉畸形小鼠模型.方法 利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠Alk1基因:①设计和选择两个单导向RNA(sgRNA)分别识别外显子3~4...
【关键词】 CRISPR/Cas9; Alk1基因; 小鼠;
【中文期刊】 简卫华 张娈景 等 《中华普通外科学文献(电子版)》 2012年06卷3期 205-209页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨用小干扰核酸 (Small interfering RNA,siRNA)靶向沉默神经鞘氨酸激酶1(sphingosine kinase1,SPHK1)基因敲除后对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响.方法 人工化学合成SPHK1 s...
【关键词】 神经鞘氨酸激酶-1; 小干扰RNA; SGC-7901胃癌细胞株;