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【中文期刊】 聂珂珂 刘英 等 《生物加工过程》 2025年23卷2期 212-225页ISTICCABP
【摘要】 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有遗传背景清晰、无密码子偏好、生长迅速、蛋白分泌能力强以及无致病性等优点,是异源蛋白表达的优选模式菌株.目前已有多种工业酶实现了其在枯草芽孢杆菌中的高效表达,如α-淀粉酶、β-葡聚糖酶、角...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 郑晓芳 赵敏 《化学与生物工程》 2017年34卷6期 6-11页
【摘要】 大肠杆菌是表达重组蛋白最常用的宿主菌之一,但是由于它大多将重组蛋白分泌到菌体内部,导致重组蛋白不能正确折叠或者被降解而失去活性,使得目的蛋白的提取和纯化过程较为繁琐.解决这些问题的方法之一就是将重组蛋白分泌到胞外培养基中,这样不仅有利于蛋白...
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- 方法：
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【中文期刊】 魏韬 王菡 等 《黑龙江医药》 2011年24卷4期 561-563页CA
【摘要】 目的:随着基因工程技术的不断发展,目前已有多种表达系统可用于生产具有医疗价值的人或动物来源的蛋白质.真核细胞中CHO细胞与其他表达系统相比具有许多优点,是目前重组糖基蛋白生产的首选体系.本文着重阐述外源蛋白在CHO细胞中高效表达的策略.
- 概要：
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【中文期刊】 骆诗鸿 《海峡药学》 2007年19卷2期 4-7页
【摘要】 巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)是表达外源蛋白最理想的真核表达系统之一.要在一种宿主表达系统中成功表达外源蛋白并获得较高产量,必须要较为全面地了解影响其表达的诸多因素.本文综述了应用该体系高效表达外源蛋白需考虑的策略.
- 概要：
- 方法：
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【学位论文】 作者：闵琪 导师：熊海容 中南民族大学 生物学 微生物学（硕士） 2020年
【摘要】 甘露聚糖酶是降解半纤维素的主要酶类之一，因其功能已被广泛应用于食品、饲料、纺织、造纸等行业。本课题以实验室前期获得来源于嗜热好氧细菌的一种耐热甘露聚糖酶ManA（AccessionNo.KJ806637）为研究对象，将其在毕赤酵母中进行分泌...
- 概要：
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- 结论：
【学位论文】 作者：王利军 导师：郭蔼光 西北农林科技大学 西北农林科技大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2004年
【摘要】 近年来利用植物作为生物反应器生产目的产品成就瞩目,正成为基因工程研究中新的热点.借助于高活性特异表达的启动子提高外源基因的表达量,以及使外源基因只在特定的发育阶段在特定的组织或器官中表达,成为植物生物反应器研究的关键技术之一.Rubisco...
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- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李晓丽 张晓朋 等 《中国医药导刊》 2024年26卷8期 748-754页ISTIC
【摘要】 宫颈癌是全球女性第四大常见癌症.目前上市的HPV疫苗均为预防性疫苗,对已感染HPV人群无治疗效果.HPV感染率仍然很高.近年来,科学家日益关注治疗性HPV疫苗的研发,可诱导细胞免疫杀死已感染HPV的细胞.治疗性HPV DNA疫苗以其低成本、...
【关键词】 人乳头瘤病毒(HPV)；治疗性HPV DNA疫苗；热敏型质粒；
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- 结论：
【中文期刊】 刘治影 罗顺 等 《中南药学》 2023年21卷3期 625-631页ISTICCA
【摘要】 目的 采用一种高效的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞株构建方法获得稳定高表达治疗性重组蛋白的CHO细胞株.方法 利用自主研发载体构建含目的基因的真核表达质粒,经电击转染转入CHO细胞中,经抗性压力筛选后使用细胞池至单克隆的一步筛选策略,配合一...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 林钰莹 魏劲松 等 《复旦学报（自然科学版）》 2023年62卷2期 198-207,216页
【摘要】 CRISRP/Cas系统是目前广为使用的基因编辑工具,而腺相关病毒(AAV)也是目前最安全有效的基因治疗递送载体.为了实现AAV载体介导的CRISRP/Cas基因编辑,各种可装载于AAV载体的基因编辑工具也先后被报道.尽管如此,AAV载体介...
【关键词】 腺相关病毒；Un1Cas12f1；光控蛋白；
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- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘士琦 荣兰新 等 《食品科学》 2022年43卷15期 357-366页
【摘要】 乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)是一种典型的非常规酵母,在微生物基础研究和应用研究方面都有着非常重要的用途.该酵母具有食品安全级别高、蛋白分泌能力强、整合表达能力高效及大规模发酵能力优异等特点,因此,工业应用前景较...
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【中文期刊】 王茜茹 《中学生物教学》 2022年24期 77-78页
【摘要】 新高考形势下高考试题发生了很大变化,不仅体现在题型和数量上,其考查方向也更多地侧重于学生的素质能力.由于新冠疫情的影响,导致高三复习任务拖沓繁重.针对这些情况,寻找提升高三复习效率的方法变得至关重要.现从构建知识网络——概念图、攻克STSE...
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【中文期刊】 金晓灵 王晓燕 等 《现代医学》 2021年49卷7期 820-823页ISTIC
【摘要】 建立优质高效的医疗卫生服务体系需要和谐的医患关系,护士作为医护队伍的主体之一,有效的护患沟通尤为重要.护患沟通是护士为促进患者康复,而与患者及其亲属分享信息、思想和情感的过程,贯穿在患者住院全过程.作者对患者住院期间护患沟通的信息特征及表达...
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【中文期刊】 栗亚美 陈阿娜 等 《生物学杂志》 2017年34卷1期 23-29页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 来自于酸性普鲁兰芽孢杆菌的普鲁兰酶，由于分子量较大，在大肠杆菌中难以实现高效分泌表达。为研究其在E．coli中高效分泌表达策略，构建了带信号肽的pET－28a（＋）-pelB-pul13A质粒，通过发酵过程控制及向发酵培养基中添加促分泌物质...
- 概要：
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【中文期刊】 肖硕 洪华珠 等 《生物技术通报》 2008年4期 9-12页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物反应器,是基因工程的研究主体之一.获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞是基因工程的核心步骤与最终目的.基因工程菌重组质粒稳定性问题是基因工程菌工业化生产与实验研究中的最主要问题,就其在基因...
- 概要：
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【中文期刊】 钟耀华 王晓利 等 《生物工程学报》 2008年24卷4期 531-540页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 丝状真菌是具有高效分泌蛋白质潜力的真核表达系统,能对蛋白质进行翻译后修饰,如蛋白质糖基化等;并且比植物、昆虫和哺乳动物细胞具有更快的生长速率.近年来,随着真菌分子遗传技术和菌种改良策略的进步,尤其是真菌基因组学的发展,利用丝状真菌生产异源蛋...
- 概要：
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【中文期刊】 牟琳 王红宁 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷4期 93-97页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 巨大芽孢杆菌是一种很有潜力的分泌型基因工程宿主菌,现已广泛应用于工业和学术研究领域,它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等优点.综述了其自身的优点、表达载体的特点、巨大芽孢杆菌的转化方法、外源蛋白的表达、高效表达的策略以及表达...
- 概要：
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【中文期刊】 阎金勇 闫云君 《中国生物工程杂志》 2008年28卷5期 135-140页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 微生物脂肪酶在传统和新型工业催化领域中的应用越来越广泛与深入.作为脂肪酶规模化制备主要途径的高效重组表达,为脂肪酶催化剂的最终形成及工业催化奠定了坚实的技术基础.概述并讨论了微生物脂肪酶重组表达的最新策略和发展趋势,阐述密码子优化、融合共表...
- 概要：
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【中文期刊】 任增亮 堵国成 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷9期 103-109页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早和目前应用最广的经典表达系统.利用该系统表达重组蛋白具有许多优越性,但其表达效率受诸多因素的影响.综述了国内外利用大肠杆菌表达系统高效表达外源蛋白的策略,主要包括选择合适的启动子、改变信号肽结构、提高...
- 概要：
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【中文期刊】 宋琳 张志谦 《中国生物工程杂志》 2007年27卷5期 1-5页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了便于收集和纯化, 重组蛋白常需要引导至真核细胞外.蛋白能否分泌主要取决于其是否含有信号肽, 由于不同信号肽诱导蛋白分泌的效率不同,高效信号肽的筛选已成为生物工程领域提高重组蛋白产量的重要策略之一.为了筛选诱导MMP-2 C末端PEX在C...
- 概要：
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【中文期刊】 王明华 钟雪云 等 《中国病理生理杂志》 2007年23卷12期 2361-2364页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:诱导分化是肿瘤治疗的新策略,CDA-2是1种高效低毒的新型细胞分化剂,本实验研究CDA-2对人脑胶质瘤细胞SWO-38诱导分化作用并探讨CDA-2诱导分化的机制.方法:应用MTT法检测CDA-2对SWO-38细胞活性的抑制作用、平板集...
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【中文期刊】 饶贤才 胡福泉 《医学研究生学报》 2006年19卷6期 557-560页ISTICPKU
【摘要】 为了获取足够的DNA片段或得到基因的表达产物,常需要构建基因串联体,将目的基因按头尾相连随机串联起来,克隆入克隆载体以制备需要的目的基因片段或克隆入表达载体进行高效表达.串联的策略包括定向串联法、PCR扩增串联法、化学拼接法、同尾酶法等,不...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 徐焕宾 徐薇 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷1期 29-32页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 构建可高效表达表位短肽的基因免疫载体, 并研究其在表位为基础的基因免疫中的免疫效应.方法: 将基因表达调控序列插入pUC19载体中, 加入KOZAK增强序列、基因克隆位点及转录起始和终止码, 构建可表达短肽的表达载体, 进一步将表位...
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【中文期刊】 王秀文 符立梧 《中国药理学通报》 2004年20卷2期 129-133页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 凋亡抑制蛋白(IAP)能够抑制细胞内凋亡作用,是与肿瘤发生、发展密切相关的关键分子。近年来，以IAP为靶点研制有基因特异性的拮抗剂，寻找高效低毒的基因治疗策略倍受关注。IAP家族中survivin及livin特异表达于肿瘤组织的特性以及IA...
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【中文期刊】 章越 沈亚领 等 《生物工程学报》 2004年20卷3期 408-413页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性.通过比较几种不同的补料策略:间歇流加、DO-stat、pH-stat,摸索了一种流加...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘伟丰 毛爱军 等 《微生物学报》 2004年44卷4期 487-490页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 从木聚糖酶高产短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BP51中克隆得到木聚糖酶基因xynA,将其构建在芽孢杆菌表达载体pWH1520中得到重组质粒pWSX11.xynA由木糖诱导xylA启动子调控xynA表达.采用同源高效表达策略...
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【中文期刊】 李敏 章文贤 等 《生物工程学报》 2002年18卷3期 331-334页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 蜘蛛大壶腹线产生的拖丝是非常优良的纤维蛋白,具有独特的强度和弹性.基于拖丝蛋白高度重复序列和部分cDNA序列,合成蜘蛛拖丝蛋白基因单体,通过头尾相连的构建策略,得到拖丝蛋白多聚体,与原核高效表达载体pET30a(+)连接,转化大肠杆菌BLR...
- 概要：
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【中文期刊】 侯爱华 鲍晓明 等 《微生物学杂志》 2002年22卷4期 42-44页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 外源基因的稳定高效表达是重组酵母用于工业化生产的前提,综述了酵母表达体系中外源基因稳定高效表达策略.
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王忠华 夏英武 《生物工程进展》 2001年21卷3期 23-25,12页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因沉默现象已成为转基因植物商品化生产的严重阻碍.本文就DNA甲基化的作用机制及由其引起转基因沉默的研究作了简要综述.另外,结合基因表达的抑制因素,对如何消除DNA甲基化,促使外源基因高效表达的策略进行了初步探讨.
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 郑新程 安威 等 《生理学报》 1999年2期 199-205页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 本实验构建含人铜锌超氧化物歧化酶(hSOD1)基因的逆转录病毒载体, 将其导入离体培养的鼠血管平滑肌细胞(VSMCs), 观察hSOD1基因表达及其抗氧自由基损害作用.结果表明: (1)载体构建策略和方法正确, hSOD1基因可在靶细胞中高...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李清亮 周月涵 等 《工业微生物》 2016年46卷2期 8-13页ISTICCA
【摘要】 本文探讨了甲醇流加控制、添加胰蛋白胨和甲醇/山梨醇共混诱导对重组毕赤酵母GS115/pPIC9K-HSA-GCSFm表达HSA-GCSFm的影响.结果显示:甲醇供应充足条件下HSA-GCSFm表达水平仅为37 mg·L-1,而甲醇添加受限条...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵福永 严寒 等 《中国食物与营养》 2019年25卷7期 41-45页
【摘要】 纳豆激酶是一种碱性丝氨酸蛋白酶,具有较强的直接溶解血纤维蛋白的特性,与当前的溶栓药物相比具有诸多优点,已成为新型溶栓药物开发的焦点.本文首先简要介绍了纳豆激酶基因及纳豆激酶分子的理化特性和生物学功能,对当前国内外采用基因工程技术(密码子优化...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈双全 刘松 等 《食品与生物技术学报》 2019年38卷2期 35-43页
【摘要】 本研究组合了基因密码子优化及分子伴侣共表达策略提高碱性果胶酶(PGL)在毕赤酵母中的胞外产量.基于Pichia pastoris密码子偏好性,优化了来源于Bacillus sp.WSHB04-02 PGL高热稳定性突变体K314M基因,并克...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨爱华 刘佳 等 《生物加工过程》 2015年5期 14-19页ISTICCABP
【摘要】 利用基因工程手段过量表达E． coli K4荚膜多糖（ K4CPS）合成途径中相关代谢调控因子SlyA和RfaH，以构建高效合成K4CPS的菌株。结果发现：slyA和rfaH基因的单独过量表达和共表达重组菌的K4CPS的产量较对照菌分别提高...
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- 结论：
【中文期刊】 杨英桂 彭虎 等 《生命科学研究》 2013年17卷2期 185-188页ISTICCA
【摘要】 RNAi是真核生物中普遍存在的,能够剔除特定基因表达的监控机制,是传染性疾病及恶性肿瘤基因治疗的理想策略.然而,人体内各种生物膜形成的天然屏障的存在,使得siRNA进行临床应用的效率低下.近年来,研究者们发现了一类能够以高效无耗能方式穿过细...
- 概要：
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【中文期刊】 陆永超 《微生物学免疫学进展》 2013年41卷1期 70-76页ISTICCA
【摘要】 毕赤酵母表达系统是外源蛋白表达的较为理想的系统,但是并不是所有蛋白都能利用此系统获得高效表达,不同来源的蛋白,其表达水平、生物活性和稳定性均存有明显差别.概述了影响毕赤酵母高效表达的主要因素以及外源蛋白在毕赤酵母中的高效表达策略.
- 概要：
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【中文期刊】 江为 靳彦文 等 《生物技术通讯》 2012年23卷4期 476-480页ISTICCA
【摘要】 目的:通过昆虫-杆状病毒表达系统获得人乳头瘤病毒(HPV)16/18/33/58亚型的主要衣壳蛋白L1.方法:克隆了HPV16/18/33/58亚型的L1蛋白基因,并采用密码子优化策略进行改造(记为HPV16/18/33/58亚型mL1),...
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- 方法：
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【中文期刊】 张俣 《医学综述》 2010年16卷22期 3387-3390页ISTICCA
【摘要】 基质金属蛋白酶2(MMP-2)是基质金属蛋白酶家族(MMPs)的重要成员,可通过高效降解细胞外基质参与充血性心力衰竭(CHF)过程中的左心室重构.CHF时MMP-2表达升高并存在与组织抑制因子失衡,因此,MMP-2与CHF的发生发展密切相关...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 彭清林 张婷 等 《基础医学与临床》 2009年29卷10期 1039-1043页ISTICCA
【摘要】 目的 优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV 18 L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清.方法 联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV 18 L1基因...
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【中文期刊】 张婷婷 叶波平 《药物生物技术》 2007年14卷4期 306-309页ISTICCA
【摘要】 外源基因在大肠杆菌中高效表达时,通常会形成不溶性、无活性的蛋白聚集体--包涵体.包涵体中富含表达的重组蛋白质,它们经分离、洗涤、变性溶解以及复性等过程才能得到具有生物活性的蛋白质.近年来,随着对包涵体体外复性机制的深入研究,从包涵体中复性重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐寒梅 周康 等 《生物加工过程》 2007年5卷3期 1-5页ISTICCABP
【摘要】 酵母由于其本身的一些优良特性和容易操作性,可以高水平表达重组蛋白,近年来已经有多个酵母表达的蛋白质多肽类药物上市.作为宿主的酵母最常用的是毕赤氏酵母和酿酒酵母.本文对酵母的一般特性、酵母表达操作、密码子、载体和表达策略、两种不同酵母表达系统...
- 概要：
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【中文期刊】 周宏 刘志刚 等 《生物技术通讯》 2006年17卷6期 945-949页ISTICCA
【摘要】 能够生产有功用的治疗性蛋白的一个重要前提是获得稳定的重组蛋白高表达细胞株,然而筛选一个能够持续稳定表达外源蛋白的重组细胞株是费时费力的过程.有多篇文献报道了重组蛋白细胞株表达的不稳定性.位置效应是高表达细胞株不稳定性的重要因素,克服或利用位...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 韩继超 崔慧斐 《齐鲁药事》 2005年24卷1期 39-40页ISTICCA
【摘要】 巴氏毕赤酵母表达体系是近年发展起来的真核表达体系,具有良好的应用前景.本文综述了应用该体系高效表达外源蛋白需考虑的策略.
- 概要：
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【中文期刊】 郭斯启 奚永志 等 《中国输血杂志》 2004年17卷4期 227-231页ISTICCA
【摘要】 目的探索并建立人干细胞因子(SCF)的原核高效表达系统.方法设计特异性引物,以RT-PCR从人胎肝组织中扩增出干细胞因子的膜外区活性片段,克隆进入pGEM-T载体.以Goldkey软件进行翻译起始序列RNA结构和自由能优化;通过合成寡核苷酸...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 邵筱 余新炳 等 《热带医学杂志》 2004年4卷2期 126-129页ISTICCA
【摘要】 目的结合分子生物学和生物信息学方法筛选鉴定日本血吸虫新基因.方法从日本血吸虫(Schistosoma japonicum,大陆株)成虫cDNA文库中获取表达序列标签(expressed sequence tag,EST),用电子拼接的方法延...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 何江 张杰 《中国优生与遗传杂志》 2004年12卷6期 28-30页ISTIC
【摘要】 目的探讨优化通过大肠杆菌表达重组人TNF-α的相关条件,改良纯化策略,为使用噬菌体随机肽库技术筛选抗TNF-α特异小分子肽提供纯度高活性好的靶蛋白. 方法将表达质粒pUC118- TNF-α转化入大肠杆菌,对表达条件进行优化后进行大量表达....
- 概要：
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【中文期刊】 谈宁馨 刘社际 等 《药物生物技术》 2003年10卷3期 137-140页ISTICCA
【摘要】 目的高密度培养重组细菌和高效表达重组幽门螺杆菌尿素酶A融合蛋白.优化细菌培养和重组幽门螺杆菌尿素酶A融合蛋白表达的发酵工艺条件.重组细菌的培养条件:培养温度为35℃,培养基pH值为7.0～7.5,葡萄糖浓度为0.5%～2.0%,采用合理的策...
【关键词】 细菌发酵；重组尿素酶A融合蛋白；表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘佳 杨力明 等 《哈尔滨医科大学学报》 2003年37卷6期 465-467页ISTICCA
【摘要】 目的将流感病毒RNA聚合酶合酶PB1-1亚基进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PB1亚基功能奠定基础.方法以PB1亚基cDNA为模板,用PCR方法扩增出PB1-1片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曹慧青 丁金凤 《国外医学(分子生物学分册)》 2002年24卷1期 1-4页ISTICCA
【摘要】 于同一载体二同时表达多个外源基因在生物学领域中有广泛的应用价值,尤其在针对疾病发生发展的各个环节设计的联合基因治疗方案中,构建合适的载体获得多个外源基因的高效转移与表达具有重要意义.目前可提供的载体难以满足这一要求.近年来在多顺反子表达载体...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨鑫 吴茜 等 《食品与发酵工业》 2015年41卷5期 14-18页
【摘要】 克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化.采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体pET28a连接,构建重组质...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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