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【中文期刊】 马爱瑛 周栋 等 《生物技术通报》 2009年11期 154-157页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以DMEM: F12(1: 1)为基础培养基,对CHO细胞的低血清培养进行了初步探索,降低培养基中血清含量,观察了细胞在10%、5%和1%等不同浓度低血清培养条件下生长状态和外源蛋白表达活性的变化.试验结果表明:在含1%血清的F12: DM...
【关键词】 CHO-pCSA工程细胞株; t-PA rPA(K); 低血清培养;
【中文期刊】 时成波 徐军 等 《中国生物制品学杂志》 2009年22卷12期 1172-1175页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 构建高效表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的CHO 工程细胞株.方法 从pCIneo质粒出发,构建含有改造了稀有密码子的HBsAg S基因和启动子弱化的二氢叶酸还原酶(DHFR)转录单位的新型表达载体,利用脂质体转染CHO/dhfr-...
【中文期刊】 王欢 韩海 等 《中国医院药学杂志》 2010年30卷2期 99-102页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:通过细胞摄取巴氯酚的体外药动学研究及液质联用定量检测方法的建立,为确定巴氯酚更合理的给药途径和跨越血脑屏障的机制研究提供依据.方法:利用CHO-K1细胞摄取药物的细胞生物学实验方法结合液质联用检测技术,以细胞/介质(cell/medi...
【中文期刊】 王卓 吕茂民 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷3期 248-251,255页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 利用Flp/FRT位点特异性重组技术,在Flp-In-CHO细胞中表达重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ),并进行鉴定.方法 用限制性内切酶EcoR Ⅰ和EcoR Ⅴ分别双酶切质粒pT-FⅦ与表达载体pcDNA5/FRT/TO,将回收的目的基...
【关键词】 人凝血因子Ⅶ; 位点特异性重组; Flp-In-CHO细胞;
【中文期刊】 千爱君 萧耿苗 等 《中国药理学通报》 2024年40卷2期 390-396页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 在悬浮中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ova-ry cells,CHO-S)中分泌表达、纯化重组hCGH-CTP融合蛋白,验证其对3T3-L1成熟脂肪细胞脂质积累的影响.方法 构建CTP连接肽融合人糖蛋白激素β5/α...
【关键词】 重组人糖蛋白激素β5/α2融合蛋白; 真核表达; 悬浮CHO-S细胞;
【中文期刊】 鲁晨 王子玉 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2024年40卷10期 1400-1408页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 工业生产上中国仓鼠卵巢细胞(CHO)药物蛋白质的表达水平受多种因素影响:调控元件对转录翻译的影响、基因组整合位点的影响以及表达系统的影响等.转录作为基因表达第一步,较大程度影响蛋白质的表达,其中启动子在转录起始发挥至关重要的作用.启动子筛选...
【中文期刊】 李晓红 李红文 等 《工业微生物》 2024年54卷5期 39-43页 ISTICCA
【摘要】 以中国仓鼠卵巢细胞为宿主细胞构建重组表达细胞用以表达单克隆抗体,已经被广泛应用于生物制药领域.物理调控是影响细胞增殖和表达的重要方式,但针对恒稳磁场暴露下的CHO细胞培养及其抗体表达还鲜有报道.基于此,文章利用 3.0 mT恒稳磁场,在 3...
【中文期刊】 何俊奇 陆定艳 等 《贵州医科大学学报》 2023年48卷12期 1454-1458页 ISTIC
【摘要】 目的 构建稳定表达细胞色素P450家族3亚家族A成员4(CYP3A4)的C239S突变体(CYP3A4-C239S)的 Flp-InTM CHO 细胞系.方法 使用 Lipofectamine2000 转染试剂将 pcDNA5/FRT-CY...
【关键词】 细胞色素P450 3A4; 黄曲霉毒素B1; 突变体;
【中文期刊】 孙雪珂 丁培阳 等 《河南农业科学》 2023年52卷6期 131-138页
【摘要】 为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S1蛋白的CHO细胞系,利用电转染技术将重组质粒pCGS3-S1转染至CHO细胞,通过有限稀释法筛选稳定表达重组S1蛋白的单克隆细胞系.利用阴离子交换层析和凝胶过滤层析方法对重组S1蛋白进行纯化,采用...
【中文期刊】 李倩卉 刘旭 等 《生物化工》 2023年9卷5期 62-68页
【摘要】 目的:建立重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统,并从生物化学与凝血活性等方面对活化的重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦa)进行分析.方法:利用公司专有的CHO细胞表达系统构建rhFⅦ表达载体并筛选稳定高产细胞株.通过经典的...
【关键词】 人重组凝血因子Ⅶ; 活化的人重组凝血因子Ⅶ; CHO细胞;
【中文期刊】 曹辉 董静 等 《生物技术进展》 2023年13卷5期 698-703页
【摘要】 CHO细胞作为宿主细胞广泛应用于生物药工业化生产中.其中,CHO-K1、CHO-DG44和CHO-S是最常见的3种亚型.虽然这些亚型是从共同的原始CHO细胞分离出来的,但在不同的实验室或生物医药公司、研究人员、培养基或培养方式下连续传代、驯...
【中文期刊】 姚克 王凯军 等 《中华医学杂志(英文版)》 2003年116卷7期 1034-1038页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 Objective To investigate the role of caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induc...
【关键词】 caspase-3 * lens * epithelial cells * hydrogen peroxide * Ac-DEVD-CHO * apoptosis;
【中文期刊】 付艳霞 黄巧 等 《生物学杂志》 2017年34卷6期 28-31,36页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 已有研究表明卵壳蛋白ZPC5(Dissostichus mawsoni zona pellucida c5,DmZPC5)在南极鱼卵巢中大量表达,但是其具体功能尚不清楚.为了明确ZPC5是否参与鱼类抗寒过程,研究在中国仓鼠卵巢细胞(Chin...
【中文期刊】 马靖 裴晓磊 等 《北京大学学报(医学版)》 2014年46卷5期 669-675页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建新的具有趋化作用的人类细胞因子PSMP的真核表达载体,在仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)中表达并纯化,为PSMP的功能机制研究奠定基础.方法:从pcDNA3.1-PSMP-myc/His中切下PS...
【关键词】 PC3-分泌微量蛋白,人; CHO细胞; 遗传,重组;
【中文期刊】 易继林 田耕 《华中科技大学学报(医学英德文版)》 2003年23卷4期 392-395页 SCIMEDLINE
【摘要】 To clone the murine α-fetoprotein (AFP) gene, construct the eukaryotic expression vector of AFP and express in CHO cells...
【关键词】 gene cloning; α-fetoprotein gene; eukaryotic expression vector;
【中文期刊】 黄洪超 苗军 等 《中华骨科杂志》 2010年30卷12期 1228-1234页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 拟构建双顺反子增强型绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)真核表达载体,为其在真核细胞体内外示踪定位打下基础.方法 以重组质粒pcDNA3.1/CT-hBMP2为模板...
【中文期刊】 阚伯红 藏晓怡 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2009年25卷11期 1002-1004页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建截短型人骨保护素(hTOPG)哺乳动物表达载体pcDNA3.1/DHFR-hTOPG, 实现其在CHO-DHFR~-细胞中的高效表达, 获取生物活性较高的重组蛋白.方法:利用基因重组技术构建重组表达载体pcDNA3.1/DHFR-...
【关键词】 骨保护素; CHO-DHFR~-细胞; 表达;
【中文期刊】 李冰 李建民 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2009年29卷12期 1069-1074页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)人-鼠嵌合抗体,并对其活性进行分析.方法 RT-PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因,分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合...
【中文期刊】 习东 李黎 等 《中华肝脏病杂志》 2008年16卷12期 930-934页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探索人fg12凝血酶原酶(hfg12)短干扰RNA(siRNA)在体外对hfg12凝血酶原酶基因表达的干预效应.方法 构建产生hfg12短发夹状RNA(shRNA)的载体p-hfg12shRNA,将其与hfg12-增强型绿色荧光蛋白(...
【中文期刊】 施勇 朱海艳 等 《中华神经医学杂志》 2008年7卷12期 1189-1192页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆人NR2B基因,构建其真核表达载体,获得暂态表达NR2B的CHO细胞.方法 RT-PCR方法克隆人NR2B基因,并插入真核表达载体pcDNA3.1中,将该重组载体转染至CHO细胞.通过RT-PCR、Western blot及间接免...
【中文期刊】 崔晶 王中全 等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2004年22卷5期 266-270页 MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的观察编码旋毛虫相对分子质量(m)31 000抗原的DNA疫苗(重组真核表达质粒pcDNA3-TspE1)在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的体外表达,并分析其表达产物的抗原性.方法通过用阳离子脂质体Lipofectamine2000将重组质...
【中文期刊】 施菊 胡雅儿 等 《上海第二医科大学学报》 2000年20卷6期 503-505页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 观察知母甾体皂甙元(sarsasapogenin,SAR)对M2受体亚型的调节作用。 方法采用转染了m2胆碱受体基因的CHO细胞为模型,以非选择性的3H-QNB作单点放射配基结合分析。 结果CHO m2细胞受体密度在培养...
【关键词】 M2受体亚型 CHO m2细胞 放射配基结合分析 知母皂甙元; M2 muscarinic acetycholine receptor m2 receptor gene transfected Chinese hamster ovary cells radioligand binding ; assay sarsasapogenin;
【中文期刊】 富岩 杨小楠 等 《中国医药生物技术》 2017年12卷1期 6-18页 ISTIC
【摘要】 目的:研究作为药物级别重组人血清白蛋白/促红素融合蛋白的生产制备工艺;开展详尽的融合蛋白理化特性研究;提出作为长效创新药物的质量基础和技术指标。方法利用基因工程技术构建1个能稳定表达全新分子结构和更优长效性的重组人血清白蛋白/促红素融合蛋白...
【中文期刊】 彭蔚宇 王丽廷 等 《实验动物科学》 2017年34卷2期 16-20,25页 ISTIC
【摘要】 目的 分析鸡白细胞介素10(chicken interleukin-10,chIL-10)的信号肽对体外表达的影响,以获得稳定表达ehIL-10的细胞系.方法 采用RT-PCR方法从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中分别扩增含信...
【中文期刊】 朱融和 陈慧瑶 等 《温州医科大学学报》 2016年46卷8期 561-565页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建人肠三叶因子(hITF)重组真核表达载体,并检测其在CHO/dhfr-细胞中的表达。方法:通过重叠延伸PCR法获得hITF cDNA片段,将目的基因插入真核表达载体pIRES/dhfr,得到重组真核表达载体pIRES/hITF/d...
【关键词】 人肠三叶因子; 真核表达载体; CHO/dhfr-细胞;
【中文期刊】 敬佳 李文瑾 等 《国际免疫学杂志》 2016年39卷6期 539-542,546页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建包含大鼠骨桥蛋白(OPN)的真核表达载体,获得稳定表达重组蛋白的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对蛋白进行纯化,为OPN在大鼠模型实验中的进一步功能学研究奠定基础.方法 通过脂质体lipofectamine 2000将重组质粒pLV...
【中文期刊】 欧红梅 周长慧 等 《癌变·畸变·突变》 2015年1期 39-43页 ISTICCA
【摘要】 目的:建立96孔板流式细胞术体外微核自动化检测的方法,并探讨其用于药物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价的可能性。方法:试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),分别选择3个不同浓度的环磷酰胺和丝裂霉素C处理CHO-K1...
【中文期刊】 刘毅华 童梅 等 《中国医药生物技术》 2014年4期 260-267页 ISTIC
【摘要】 目的:通过构建基于 SM 基因的分泌工程化改造的CHO-AV-SM 细胞株,探讨在悬浮培养条件下,过表达转运蛋白 SM 基因对分泌蛋白表达的影响。方法首先从人 HEK293FT 细胞中克隆出 sly1和munc18c 基因,然后构建含有 S...
【中文期刊】 杨剑峰 何杨 等 《中国血液流变学杂志》 2014年2期 188-191页 ISTICCA
【摘要】 目的:真核表达及纯化重组人凝血因子Ⅶ(rFⅦ)。方法通过PCR方法扩增FⅦ全长cDNA,克隆入真核表达载体pcDNA3.0,利用脂质体将FⅦ基因与二氢叶酸还原酶基因共转染CHO-dhfr-/-细胞,采用氨甲喋呤药物加压,Western bl...
【中文期刊】 李鹏飞 王恺 等 《癌变·畸变·突变》 2014年6期 438-440页 ISTICCA
【摘要】 目的:探讨曲酸对受辐射中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的保护作用。方法:CHO细胞分别经不同强度(0~20 Gy ) Coγ射线照射,于照射后24、48和72 h采用MTT法检测细胞存活情况;细胞经不同浓度(分别为0、0.01、0.1、1、10、...
【中文期刊】 李伊培 高丽华 等 《生物技术通讯》 2014年25卷2期 165-169页 ISTICCA
【摘要】 目的:表达优化的血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体1(VEGFR1)胞外区第2个类免疫球蛋白结构域(VEGFR1D2)和VEGF受体2(VEGFR2)胞外区第3个类免疫球蛋白结构域(VEGFR2D3)与人IgG1 Fc片段的融合产物VEG...
【关键词】 血管内皮细胞生长因子受体; VEGF-Trap; Fc融合蛋白;
【中文期刊】 潘芸 高丽华 等 《中国医药生物技术》 2014年3期 185-190页 ISTIC
【摘要】
目的获得高效表达 hDll1ext-Fc 融合蛋白的细胞系以及具有生物学活性的目的蛋白。
方法根据已知序列设计引物,并将 hDll1ext 基因片段经PCR 扩增,酶切后连接至 pIRES2-EGFP-Fc 中,挑选阳性克隆测序,...
【关键词】 配体,Notch; CHO 细胞; Delta-like;
【中文期刊】 刘霞 刘飞 等 《食品与药品》 2013年15卷6期 381-384页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建含重组人凝血酶基因的重组真核表达载体,并转染哺乳动物细胞CHO,建立稳定表达重组人凝血酶的细胞株.方法 利用限制性内切酶EcoR I和XbaI将凝血酶基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建含人凝血酶基因的重组质粒pcD...
【中文期刊】 许琴英 朱家勇 等 《中华生物医学工程杂志》 2011年17卷6期 509-512页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建家蝇幼虫抗菌肽的真核表达载体,并检测它在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达情况.方法 以pUCm-T/Defensin为模板,设计带His标签特异引物,扩增C-末端融合6×His标签的Defensin基因的cDNA全长编码区序列,...
【中文期刊】 让文亮 檀英霞 等 《军事医学》 2011年35卷1期 54-57页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建重组人α-半乳糖苷酶A(GLA)真核表达载体,并在中华仓鼠卵巢细胞CHO中表达重组的人GLA.方法 利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人GLA cDNA,并构建到哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1/myc-His A中.将重...
【中文期刊】 贾卫红 罗德炎 等 《国际免疫学杂志》 2011年34卷5期 306-308页 ISTICCA
【摘要】 目的构建小鼠α烯醇化酶(Enol)基因的真核表达载体。方法以健康小鼠肾脏组织细胞的cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增Enol基因编码区的全部序列,克隆至真核细胞表达载体pCDNA3.1+中,测序鉴定目的基因用阳离子脂质体转染的...
【中文期刊】 薛君力 赵雁林 等 《中华生物医学工程杂志》 2010年16卷6期 542-547页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)-Ig融合蛋白表达体系并初步分析其活性.方法 在质粒PGEM-T easy-SPLUNC1基础上联合应用大引物法和巢式PCR实现目的序列147位碱基的定点突变,亚克隆于表达载体PDH3...
【关键词】 短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1; 基因表达; CHO细胞;
【中文期刊】 李玉蕾 颜玲娣 等 《军事医学科学院院刊》 2009年33卷5期 409-411,485页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础.方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的...
【中文期刊】 《脊柱外科杂志》 2006年4卷3期 159-162,182页 ISTIC
【摘要】 Objective To express the recombinant human bone morphogenetic protein-7 (rhBMP-7) in Chinese hamster ovary (CHO) cells a...
【关键词】 bone morphogenetic proteins; recombinant proteins alkaline phosphatase; CHO cells;
【中文期刊】 张霖阳 潘殊男 等 《国际生物制品学杂志》 2013年36卷4期 177-181页 CA
【摘要】 目的 建立检测百日咳毒素(pertussis toxin,PT)活性的中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞簇集法,并将建立的方法应用于无细胞百日咳疫苗生产的质量控制.方法 将PT标准品系列稀释后与培养的CH...
【中文期刊】 付托 张存超 等 《化学与生物工程》 2013年30卷6期 39-42页
【摘要】 构建了人丙酮酸羧化酶(hPC)异位表达的重组CHO细胞,并检测了重组细胞生长情况的改变.利用分子生物学实验技术构建hPC-pcDNA 3.0表达载体,将其转染CHO-K1细胞;转染细胞经过G418抗性筛选后,通过荧光定量PCR检测目的基因表...
【中文期刊】 俞锦锋 陈慧萍 等 《南昌大学学报(工科版)》 2013年35卷2期 125-129,175页
【摘要】 以悬浮CHO DG44细胞为对象,采用central composite响应面分析法,以活细胞密度为评价指标,确定了3种对细胞生长有明显促进作用的培养基关键组分——胰岛素、转铁蛋白及亚硒酸钠(简称ITS)的最优浓度及其相互影响模式,并设计了...
【关键词】 CHO DG44细胞; 响应面分析; 硫酸葡聚糖;
【中文期刊】 吴园园 盛光阳 等 《国际医药卫生导报》 2012年18卷15期 2184-2186页
【摘要】 目的 探索唾液酸化程度高且EPO表达量高的最优pH.方法 考察不同pH对细胞生长、EPO产量和EPO唾液酸含量的影响.结果 pH7.10~ 7.25 EPO表达量可达10 388 IU/ml,唾液酸可达11.5 mol/mol EPO,纯化...
【中文期刊】 李睿书 王石泉 等 《南京大学学报(自然科学版)》 2010年46卷1期 85-91页
【摘要】 骨形态发生蛋白2(BMP-2)是转化生长因子β(TGF-β)超家族的成员,在骨组织工程领域被广泛应用.如今,BMP-2的商业生产所受关注程度与日俱增.这里建立了一种方便且低成本的方法,将人重组骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)从中国地鼠卵巢...
【关键词】 重组人骨形态发生蛋白2; 中国地鼠卵巢细胞系; 蛋白纯化;
【中文期刊】 《南京医科大学学报(英文版)》 2006年20卷6期 325-330页 MEDLINECSCDCABP
【摘要】 Objective: To investigate whether CYP2E1 is responsible for the acrylamide metabolic activation in Flp-In CHO cell syste...
【中文期刊】 《辐射研究与辐射工艺学报》 2005年23卷2期 95-95页
【摘要】 Extremely low frequency magnetic field (ELFMF) produced by power lines and household electric appliances has been associ...
【关键词】 X-rays; Eextremely low frequency magnetic fields (ELFMF); CHO cells;
【中文期刊】 《中国人民解放军军医大学学报》 2004年19卷6期 346-349页 CA
【摘要】 To prepare secretary recombinant human neutrophil peptide1 (HNP1)and test its antimicrobialactivity. Methods: The eukary...
【关键词】 human neutrophil peptide1; CHO-dhfr- cells; MTX;
【中文期刊】 杨双惠 李超影 等 《中国生物工程杂志》 2024年44卷5期 32-39页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 近年来,随着多种双特异性抗体药物的成功上市和基因工程技术的发展,双特异性抗体已成为抗体领域的研究热点.由于双特异性抗体结构复杂,其在生产过程中往往更容易产生聚体,不仅为下游纯化增加了难度,也提高了实验成本.为减少生产过程中聚体的产生,以表达...
【中文期刊】 张慧 高文丽 等 《中国生物制品学杂志》 2024年37卷1期 72-78页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 采用SYBR Green Ⅰ染料建立实时定量PCR法检测CHO细胞外源抗体轻链(light chain,LC)、重链(heavy chain,HC)基因拷贝数,并进行方法的验证及初步应用.方法 以CHO细胞中稳定表达的B2m(β2-m...