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【中文期刊】 高二可 张路 等 《牡丹江医学院学报》 2023年44卷3期 18-20,26页
【摘要】 目的 构建C端携带Flag标签蛋白的重组小鼠IL-33 慢病毒表达载体,为进一步研究IL-33 在肿瘤免疫中的作用提供实验基础.方法 设计引物在小鼠IL-33 基因的C端加入Flag标签,PCR法扩增带有标签的目的基因,再接入经酶切后的线性...
【中文期刊】 高建伟 叶峰 等 《北京生物医学工程》 2022年41卷3期 307-310页 ISTIC
【摘要】 目的 构建TRAM基因真核表达载体,为研究TRAM的功能提供研究工具.方法 首先采用PCR方法扩增人TRAM蛋白相应的编码序列,将扩增的特定片段克隆至pCMV-N-Flag真核表达载体.然后,对重组载体进行DNA测序,确认序列正确后将重组载...
【中文期刊】 葛祥伟 张德宇 等 《解放军医学院学报》 2021年42卷12期 1293-1297,1303页 ISTICCA
【摘要】 背景 人造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(hematopoietic pre-B cell leukemia transcription factor interacting protein,HPIP)参与多种肿瘤的发生发展过程,其在...
【中文期刊】 闵玉涛 王云龙 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷1期 93-97页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 碳化二亚胺法合成FLAG-BSA完全抗原,利用杂交瘤技术制备5株分泌抗FLAG标签单克隆抗体的杂交瘤细胞株.制备腹水,并对其进行纯化、分析和鉴定.制备交联抗FLAG mAb亲和层析柱,纯化带FLAG标签的融合蛋白,经SDS-PAGE电泳后薄...
【中文期刊】 徐竹蔚 刘莹 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷5期 613-614,618页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 制备并鉴定抗GST、His×6及FLAG的单克隆抗体(mAb).方法: 分别以含GST、 His×6及FLAG标签的融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗相应标签蛋白的mAb.用Western blot检测mAb对变...
【中文期刊】 杨旭颖 安丽君 《江苏农业科学》 2019年47卷12期 63-65页
【摘要】 表皮毛是由高等植物地上部组织表皮细胞发育而来的一种特殊结构,细胞周期调控因子在植物表皮毛细胞形态的建成过程中发挥着重要作用.利用原核表达系统,构建pET-28a-KRP2-FLAG融合表达载体,在大肠杆菌中对拟南芥细胞周期依赖激酶抑制因子K...
【中文期刊】 吴嘉 杨红玉 等 《西南林业大学学报》 2019年39卷4期 89-95页
【摘要】 为了利用染色质免疫共沉淀技术研究转录因子AtIDD4蛋白与下游DNA的互作,通过构建35S-AtIDD4CDS-3×Flag农杆菌原核表达载体,利用农杆菌花浸法将35S-AtIDD4CDS-3×Flag结构转入野生型拟南芥中,实现ATIDD...
【中文期刊】 李瑞花 付汉江 等 《生物技术通讯》 2016年27卷1期 7-11页 ISTICCA
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas系统在XRCC6基因5'端插入Flag标签序列,筛选XRCC6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(HeLa)株.方法:根据GenBank中XRCC6基因序列,设计XRCC6基因敲入的gRNA序列,构建入pCas-G...
【关键词】 CRISPR/Cas系统； XRCC6基因； Flag标签；
【中文期刊】 鲁凤民 李雅娟 等 《癌变·畸变·突变》 2006年18卷2期 119-121页 ISTICCA
【摘要】 背景与目的:已知细胞分裂周期抑制因子P21通过蛋白酶体通路降解,其氨基端的泛素化可能参与了这一过程.Flag为一蛋白标签,常用于标记重组蛋白质,以便对靶蛋白进行生物学功能分析.本文旨在研究N-端加flag对P21蛋白质稳定性的影响.材料与方...
【关键词】 P21Cip1/WAF1； Flag标签； 蛋白酶体；
【中文期刊】 王云龙 李忠信 等 《动物医学进展》 2011年32卷1期 38-43页
【摘要】 探讨不同免疫原制备抗Flag标签单克隆抗体的效果,以及Flag标签单克隆抗体在融合蛋白纯化中的应用.通过碳化二亚胺分别合成Flag-BSA、Flag-OVA、Flag-KLH 3种完全抗原,采用SDS-PAGE和免疫效价对比方法确定偶联效果...
【中文期刊】 戴志昂 丁先锋 《浙江理工大学学报》 2010年27卷2期 313-317页
【摘要】 FLAG融合标签是由8个氨基酸组成的短肽,可用于重组蛋白的免疫吸附纯化.为了建立一个基于FLAG融合标签的共表达纯化体系,将2个新的FLAG标签序列DYKDYKDYK和DYKDEDDK与FLAG标签的原有序列DYKDDDDK分别命名为FLA...
【关键词】 FLAG融合标签； 免疫吸附纯化； 抗-FLAG单克隆抗体M2；
【中文期刊】 邹少林 丁先锋 等 《科技通报》 2010年26卷3期 350-357页
【摘要】 构建了三种融合标签FLAG1(DYKDDDDK)、FLAG2(DYKDYKYK)和FLAG3(DYKGGGYK)的原核表达质粒pGEX-2t-His-NSH2-FLAG,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,表达并纯化重组蛋白GST-His-...
【中文期刊】 王欣怡 王晓倩 等 《生物技术通报》 2023年39卷10期 323-331页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 纳米抗体是一种新型的蛋白质工程抗体,其体积小、稳定性强、亲和力高等特性为科学研究提供了新的可能性.FLAG标签是一种广泛应用于生物学研究中的短肽标签,在生物学研究中具有重要的作用.为了制备FLAG标签的纳米抗体,利用酵母双杂交技术筛选出具有...
【中文期刊】 沈玥 路丽明 等 《上海交通大学学报（医学版）》 2014年34卷5期 567-572页 ISTICPKUCSCDCA
【关键词】 Klotho； 内部核糖体进入位点序列； FLAG标签；
【中文期刊】 赵金匣 王志平 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年6期 1149-1154页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建人 B细胞易位基因2（BTG2）真核表达载体，并在 H eLa细胞中表达携带 FLAG标签的BTG2蛋白，为阐明BTG2基因的功能提供实验工具。方法：利用 PCR法获得全长 BTG2片段，将扩增得到的片段插入真核细胞表达载体 pc...
【中文期刊】 徐长庚 张杰 《武汉大学学报（医学版）》 2016年37卷1期 76-80页 ISTICCABP
【摘要】 目的:构建lefty1基因与pcDNA3.1(+)相融合的真核表达载体,并在lefty1基因的下游加上Flag标签,转染人肾小管上皮细胞株验证重组质粒活性.方法:设计并合成lefty1基因上下游引物,同时加上Flag标签序列,PCR扩增基因...
【中文期刊】 陆娇娇 郑娴 等 《中国实验诊断学》 2024年28卷10期 1199-1204页 ISTIC
【摘要】 目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体,建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系.方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段,利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中,并对...
【中文期刊】 辛晨 况春燕 等 《贵州医科大学学报》 2024年49卷11期 1593-1600页 ISTIC
【摘要】 目的 构建携带小鼠Schlafen3(Slfn3)基因的重组过表达质粒,并观察其在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率.方法 从GenBank基因数据库获取小鼠Slfn3基因序列,利用VectorNTI软件对其进行引物设计,通过PCR扩增获得...
【中文期刊】 黄萃园 王娇娇 等 《实用临床医药杂志》 2024年28卷8期 22-28页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建及鉴定携带小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP6)基因(NM_133 946.2)的过表达重组腺病毒载体.方法 合成小鼠NLRP6基因的编码序列,经酶切后插入腺病毒载体(GI2003),转化大肠杆菌感受态细胞DH-5α...
【中文期刊】 许锦霞 吴龙建 等 《中国预防兽医学报》 2024年46卷2期 178-184页
【摘要】 AIM2炎症复合体参与自身免疫性疾病和机体抵御病原体的过程,研究其激活机制具有重要的意义.为构建AIM2炎症复合体的体外活化体系,本研究通过PCR方法从人单核细胞(THP-1细胞)中扩增AIM2、ASC、pro-Caspase-1、pro-...
【中文期刊】 吴梦丽 孙华林 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷10期 4646-4659页
【摘要】 前期研究发现宿主表观遗传调控蛋白——含溴结构域蛋白质4(bromodomain-containing protein 4,BRD4)有助于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的复制,为了深入研究BRD...
【中文期刊】 张苗苗 李雪 等 《江苏大学学报（医学版）》 2023年33卷6期 516-520,527页 ISTICCA
【摘要】 目的:建立副溶血弧菌QsvR的染色质免疫共沉淀-实时定量PCR(ChIP-qPCR)实验方法.方法:通过热激转化和转化结合将标记2×Flag标签的qsvR片段转入qsvR突变株(ΔqsvR)中,阿拉伯糖诱导表达QsvR-2×Flag蛋白,通...
【关键词】 ChIP-qPCR； 蛋白质-DNA复合物； 副溶血弧菌；
【中文期刊】 田硕 厉建中 《药学实践与服务》 2023年41卷4期 222-226页 ISTIC
【摘要】 目的 通过构建ZNF24基因过表达慢病毒载体,建立ZNF24基因过表达的人结直肠癌HCT116细胞株,为开展后续研究提供物质基础.方法 通过PCR扩增ZNF24基因序列片段和3FLAG标签序列片段,并将两产物通过同源重组克隆至慢病毒载体pM...
【中文期刊】 孙志佳 亢小峰 等 《西南医科大学学报》 2023年46卷2期 130-134页
【摘要】 目的 将pCMV-Tag2B-Flag标签连接到人线粒体溶质载体蛋白25A37(SLC25A37)的基因上构建真核表达载体,检测其对人肺癌细胞H460功能的影响.方法 采用PCR技术扩增人乳腺文库中SLC25A37的编码区片段,用限制性内切...
【中文期刊】 符静 薛春源 等 《军事医学》 2022年46卷4期 280-284页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建带Flag标签的人溶质载体家族成员蛋白SLC25A39基因的真核表达载体,在获得Flag?SLC25A39融合蛋白表达后,研究SLC25A39表达对人乳腺癌细胞线粒体稳态的影响.方法 以人乳腺文库为模板采用PCR技术扩增出人SLC...
【关键词】 线粒体溶质载体蛋白SLC25A39； 真核表达； 人乳腺癌细胞ZR75-1；
【中文期刊】 王瑞营 张晔婷 等 《医学分子生物学杂志》 2022年19卷5期 415-420页 ISTICCA
【摘要】 目的 研究精氨酸调节蛋白ArgR对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)中Ⅵ型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)相关基因表达的调节作用.方法 构建带有SUMO标签的ArgR蛋白表达载...
【中文期刊】 韩甜甜 尹婕 等 《基础医学与临床》 2022年42卷6期 896-901页 ISTICCA
【摘要】 目的 以分子克隆技术建立稳定表达人细胞周期调控蛋白50A(CDC50A)的SKOV3细胞株.方法 通过分子克隆技术将CDC50A定向连接到表达载体pLVX-IRES-GFP上.pLVX-CDC50A-GFP表达质粒经慢病毒包装,稳定转染SK...
【中文期刊】 史艳侠 韩文杰 等 《中山大学学报（医学科学版）》 2007年28卷6期 641-644页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4+CD25+Treg细胞的免疫抑制功能.[方法]使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列,化学合成法合成4条shRNA序列,构建含foxp3的靶序列的慢病毒载...
【关键词】 foxp3； FLAG蛋白； 慢病毒载体,CD4+CD25+Treg,RNA干扰；
【中文期刊】 朱祥 马晓燕 等 《军事医学》 2019年43卷1期 37-41页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建带Flag标签pcDNA3.0载体的Sirt4真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞HepG2生长之间的关系.方法 以人卵巢文库为模板,采用PCR技术扩增出Sirt4的CDS区编码序列,将PCR产物插入到带Flag标签的pcDNA...
【关键词】 肝肿瘤； HepG2； pcDNA3.0-Flag-Sirt4；
【学位论文】 作者： 石文洁 导师：丁卫 首都医科大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2012年
【摘要】 腺相关病毒(adeno-associatedvirus，AAV)作为成熟的基因治疗载体之一，已应用于许多疾病的临床治疗。以增加AAV对宿主细胞的感染靶向性和转导效率为目的的病毒重组改良不断在进行尝试并获得突破。其中对AAV衣壳蛋白的改造和修...
【学位论文】 作者： 易科 导师：高晓莲 浙江理工大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2009年
【摘要】 绿色荧光蛋白(GFP)源于多管水母等海洋无脊椎动物，是一种在生物化学和细胞生物学中得到广泛应用，具有荧光特性的监测细胞或组织内基因表达和蛋白质定位的标记物。但为满足日益提高的技术要求，大量性质优良的荧光蛋白突变体的应用需求变得迫切起来。通过...
【中文期刊】 王桂玲 王孝会 等 《生命科学研究》 2012年16卷1期 1-5页 ISTICCA
【摘要】 构建Flag标签pcDNA3.1-MORC2的677丝氨酸位点突变重组质粒并完成在SGC-7901细胞中表达,更好地研究677丝氨酸位点所发生的功能.首先,构建含有Kpn Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点Flag标签的pcDNA3.1空载体；再以含有...
【中文期刊】 闫双双 马克 等 《山东医药》 2012年52卷11期 12-14页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建抑癌基因FATS的真核表达载体和针对其单核苷酸多态性(SNP)位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础.方法 通过RT-PCR从小鼠睾丸cDNA中扩增FATS基因,并克隆到p3 ×Flag-myc-CMV-26载体上...
【关键词】 脆性位点相关的肿瘤抑制基因； 定点突变； 真核表达；
【中文期刊】 刘小会 淡松松 等 《重庆医学》 2012年41卷12期 1194-1196页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 构建带FLAG标签的细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白Y211A、Y211D突变型重组质粒,真核表达及鉴定.方法 以FLAG-PCNA野生型基因为模板,运用PCR定点突变技术扩增出带突变位点的基因序列,将其插入真核表达载体pCMV-N-F...
【中文期刊】 宋伟 李尚泽 等 《医学研究杂志》 2011年40卷11期 21-24页 ISTIC
【摘要】 目的 应用改良的体细胞基因敲入技术将标签序列靶向敲入目的基因.方法 设计引物并构建RHBDD1的打靶载体,经过腺相关病毒包装、感染、新霉素筛选和鉴定等步骤获得含有新霉素抗性的阳性单克隆细胞株,最后通过cre病毒感染和筛选获得RHBDD1内源...
【中文期刊】 王宇 阎瑾琦 等 《军医进修学院学报》 2010年31卷1期 45-47页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建含有FLAG标签的人DC-SIGN真核表达载体,并在人胚肾293T细胞中进行表达.方法 通过PCR方法获得含有FLAG标签的人DC-SIGN分子基因,将其插入到真核表达载体pIRES-neo中.构建的重组质粒pIRES-neo-F...
【中文期刊】 杨波 苑玉和 等 《武警医学院学报》 2009年18卷7期 573-576页 ISTICCA
【摘要】 [目的]构建pEGFP-N1-α-synuclein真核表达载体,为研究帕金森病奠定基础.[方法]设计特异引物,PCR扩增α-synuclein cDNA并引入FLAG标签,克隆入pEGFP-N1质粒,对重组质粒进行酶切及测序,鉴定正确后转...
【关键词】 帕金森病； α-synuclein； pEGFP-N1；
【中文期刊】 付宁 赵莉霞 等 《生物技术通讯》 2009年20卷3期 343-345页 ISTICCA
【摘要】 目的:制备Gas8抗体,并检测小鼠各组织中Gas8表达谱.方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达His标签标记的Gas8融合蛋白,以纯化的Gas8重组融合蛋白为抗原制备兔Gas8多抗血清,进一步利用亲和纯化方法制备Gas8多克隆抗体;为确...
【中文期刊】 詹万雷 崔东 等 《生命的化学》 2004年24卷2期 155-156页 ISTICCA
【摘要】 FLAG融合标签由八个氨基酸组成(AspTyrLysAspAspAspAspLys),专门设计用于重组蛋白质的免疫吸附纯化.现已发展出了多个针对该短肽的抗体,包括M1、M2和M5单克隆抗体.FLAG标签与融合的重组蛋白质之间一般含有一个肠激...
【中文期刊】 臧富玉 亓文宝 等 《中国畜牧兽医》 2011年38卷9期 40-43页
【摘要】 通过RT-PCR方法扩增出日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株的NS1基因,利用Hind Ⅲ和Hpa Ⅰ双酶切克隆到带有Flag标签的pcDNA3.1载体上,重组质粒命名为pcDNA3.1-NS1-Flag.脂质体法转染293T细胞后,经间...
【关键词】 日本乙型脑炎； NS1-Flag融合蛋白； 真核表达；
【中文期刊】 孔志成 熊潇然 等 《生物工程学报》 2024年40卷1期 269-279页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 植物生物反应器是一种新兴的重组蛋白表达系统,是分子农业的核心内容之一.本研究在本氏烟草(Nicotiana benthamiana)中表达了抗八肽(DYKDDDDK,FLAG)标签抗体,并对其进行纯化与鉴定.通过多次免疫小鼠获得高效价抗FL...
【中文期刊】 侯丽青 侯东霞 等 《中华实用诊断与治疗杂志》 2023年37卷8期 802-808页 ISTIC
【摘要】 目的 构建5个PAH基因无义突变位点慢病毒载体并转染细胞,比较3种不同类型药物PTC124、Amlexanox和G418对PAH基因无义突变的通读效率.方法 选择5个突变频率较高的人PAH基因无义突变位点(R111X、Y166X、R176X...
【中文期刊】 屈玉杏 郭兴 等 《生物工程学报》 2022年38卷8期 3041-3048页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 C型流感病毒是感染人的重要呼吸道病原,也可感染猪、狗等动物.聚合酶是C型流感病毒复制的核心,是研究病毒复制机制的重要靶标.然而目前没有商品化针对C型流感病毒聚合酶的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),一定程度制约了...
【中文期刊】 黄勤淼 刘燕辉 《社区医学杂志》 2022年20卷1期 14-18页 CA
【摘要】 目的 筛查与DNA聚合酶delta(polδ)最小亚基POLD4相结合的蛋白.方法 构建携带FLAG标签的POLD4融合表达质粒FLAG-POLD4-pcDNA3,转染293T细胞表达FLAG-POLD4融合蛋白,通过FLAG Pull-d...
【关键词】 POLD4； 相互作用蛋白； FLAG Pull-down技术；
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