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            【中文期刊】 李静怡  熊雷  等 《中国兽医杂志》 2024年60卷12期 64-72页

            【摘要】 为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了 FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测...

            【关键词】 猫杯状病毒(FCV)肽核酸(PNA)分子荧光探针

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            【中文期刊】 章晓波  徐洵  等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷3期 277-280页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 将对虾白斑杆状病毒的一段特异性DNA设计成分子信标探针,用于该病毒的PCR检测.温度与荧光强度之间的关系表明,所设计探针的发夹既可以形成也可以打开,符合PCR对分子信标探针的要求.结果表明,在PCR同时加入分子信标探针不影响PCR扩增,分子...

            【关键词】 对虾白斑杆状病毒PCR分子探针

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            【中文期刊】 王颜颜  夏茂宁  等 《中国人兽共患病学报》 2017年33卷6期 508-512页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 将诺卡氏菌属细菌的一段特异性DNA设计成分子信标探针,用于该细菌的PCR检测.方法 将诺卡氏菌属细菌、戈登氏菌属细菌及红球菌属细菌菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况,提取菌株DNA作为扩增模板;设计诺卡氏菌属细菌...

            【关键词】 诺卡氏菌属SecA1基因分子探针

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            【中文期刊】 王超  孟祥晨  《微生物学通报》 2007年34卷6期 1163-1168页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为建立双歧制品中双歧杆菌快速、敏感、特异的检测方法,根据双歧杆菌16S rRNA/16S rDNA基因设计合成了双歧杆菌属特异性引物和分子信标探针,建立了快速检测双歧杆菌的分子信标-实时PCR检测方法,并对反应条件进行优化.检测方法重复性好...

            【关键词】 双歧杆菌分子实时PCR

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            【中文期刊】 刘光明  苏文金  等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷2期 273-277页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 选择了内源基因大豆植物凝集素(lectin)、玉米转化酶(invertase)和外源基因花椰菜花叶病毒35S(CaMV35S)启动子的分子信标探针,确定了探针浓度和镁离子浓度等反应条件,分别对转基因大豆和转基因玉米系列标准品进行内源基因和外...

            【关键词】 转基因食品分子探针荧光PCR

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            【中文期刊】 章晓波  徐洵  《生物工程进展》 2000年20卷2期 14-15,25页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 自从Southern(1975)首次进行DNA探针杂交后,至今核酸分子杂交已成为分子生物学的最基本方法.Matthews和Kricka[1]总结了各种杂交方法,将其归为两大类:一是异相杂交(heterogeneous assay)即固相杂交...

            【关键词】 荧光探针分子探针荧光PCR

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            【中文期刊】 唐连飞  禹思宇  等 《中国畜牧兽医》 2017年44卷6期 1847-1853页

            【摘要】 试验旨在利用新型荧光探针——分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法.根据H3N2亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的H3和N2基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用数字RT-P...

            【关键词】 猪流感病毒H3N2亚型分子探针

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            【中文期刊】 张立国  张琚  《生物技术》 2003年13卷2期 39-40页ISTICCA

            【摘要】 <篇首> 实时定量PCR(real-time PCR)技术是近几年发展起来的新技术,既保持了PCR技术灵敏、快速的特点,又克服了以往PCR技术中存在的假阳性污染和不能进行准确定量的缺点.另外,还有重复性好、省力、低费用等优点.实时定量PCR技术...

            【关键词】 实时定量PCR荧光染料探针

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            【中文期刊】 禹思宇  周宇  等 《中国动物检疫》 2015年7期 67-71,76页

            【摘要】 利用新型荧光探针—分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和NA基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒pSK-...

            【关键词】 猪流感病毒H3N2亚型分子探针

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            【中文期刊】 金锐  《科教文汇》 2007年29期 213页

            【摘要】 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)于1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有CCD的PCR仪检测样品的荧光强度,它的优势性决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检...

            【关键词】 实时荧光定量PCR探针分子

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            【中文期刊】 蔡霞  《现代诊断与治疗》 2005年16卷2期 112-115页CA

            【摘要】 实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测来给核酸定量的技术.目前,该技术已经应用于临床微生物、基因表达、肿瘤免疫、微小残留病变的检测,DNA拷贝数的测量、基因组变异和多态性等许多方面.现主要介绍该技术的一些基本原理及其应用.

            【关键词】 定量PCR水解探针分子

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            【中文期刊】 李秉鸿  《动物医学进展》 2003年24卷5期 4-6,25页

            【摘要】 随着现代医学和分子生物学的飞速发展,近年来在病原体的鉴别诊断方面,不断研究和开发了一些先进的检验新技术,TaqMan荧光探针脱颖而出.这项新技术日臻成熟并开始大量应用于临床实践中.它实时、准确、定量和高度重现性的特点优于其它核酸扩增技术,在...

            【关键词】 TaqMan荧光探针核酸扩增技术实时定量PCR

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            【中文期刊】 唐振柱  孙贵娟  等 《中国食品卫生杂志》 2010年22卷4期 332-335页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立沙门菌、志贺菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌O157:H7、金黄色葡萄球菌5种致病菌的实时荧光PCR检测方法,并在食源性致病菌监测工作中推广应用.方法 将菌株及样品经培养基增菌后,用热裂解法提取DNA,使用荧光定量PCR反应试...

            【关键词】 实时荧光PCR食源性致病菌分子探针

            OA
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            【中文期刊】 陈建新  文芳  《国外医学(遗传学分册)》 2003年26卷4期 185-188页ISTICCA

            【摘要】 PCR分子信标法是近几年发展起来的一种全新的核酸定量检测技术,它具有PCR技术的高效核酸扩增特性,核酸探针杂交的高特异性,以及光谱技术的高灵敏性和可计量性.目前,PCR分子信标法已被广泛应用于病原微生物的检测、肿瘤研究、基因突变研究等多个领...

            【关键词】 PCR分子荧光探针

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            【中文期刊】 蔡杰  《华章》 2012年8期 311页

            【摘要】 实时荧光定量PCR(real- time quantitative PCR)由Higuchi等人在1992年第一次报告,是一种新兴的分子生物学技术,这项技术灵敏、简便、快速、不需使用放射性同位素.它将EB加入PCR反应体系,再通过改装的带有...

            【关键词】 实时荧光定量PCR探针分子

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            【学位论文】 作者:郝麟导师:朱平   北京大学   临床医学 内科学(硕士) 2003年

            【摘要】 目的:确定以后用于不同方面的荧光PCR反应能否在芯片上侧顺利进行,能否正确检测到其荧光变化.并分析在芯片上进行PCR反应及其反应时间的变化.比较在芯片上不同类型的荧光PCR反应的优点与缺点.方法:设计并制作以硅片为材料的PCR基因芯片.利用...

            【关键词】 PCR基因芯片荧光PCR反应

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            【学位论文】 作者:郭秋平导师:李庆阁   厦门大学   生物学 生物化学和分子生物学(硕士) 2001年

            【摘要】 该论文涉及一种新的实时PCR方法的建立和应用,论文分为四部分:1.孪生引物实时PCR检测方法的建立.提出一种新型的实时PCR检测技术——孪生引物实时PCR.2.孪生引物实时PCR基因分型技术.设计两种分别带不同荧光标记的孪生引物,采用实时P...

            【关键词】 实时PCR基因分型

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            【中文期刊】 承海  朱洪亮  等 《中国食品学报》 2023年23卷6期 378-384页

            【摘要】 建立一种基于通用型分子信标检测及探针熔解曲线分析技术的肉类食品动物源性成分多重筛检方法.通过对猪、牛、羊等9种常见食用畜禽动物基因组多序列比对及生物信息学分析,选取线粒体基因组16s rDNA中具有特定结构的基因片段作为检测靶序列,设计单一...

            【关键词】 分子肉类食品熔解曲线

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            【中文期刊】 徐珊  张静  等 《齐齐哈尔医学院学报》 2023年44卷12期 1150-1154页

            【摘要】 目的 沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,对公众的生命健康和财产安全造成重大危害.基于此,我们拟建立并验证一种基于多重PCR结合分子标记探针的检测方法用于快速筛查临床高毒力致泻性沙门氏菌,旨在指导临床快速甄别由高毒力沙门氏菌引起的感染,及时采...

            【关键词】 高毒力沙门氏菌多重PCR分子探针

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            【中文期刊】 陈庆海  边志衡  等 《中华医院感染学杂志》 2008年18卷3期 312-315页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 设计结核分枝杆菌高特异性分子信标探针及优化TB-MB-PCR体系,尝试运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号.方法 运用软件Beacon designer设计分子信标探针,优化TB-MB-PCR反应体系各组份浓度,运用荧光分光光度计观...

            【关键词】 分子探针结核分枝杆菌荧光分光光度仪

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            【中文期刊】 崔银秋  张全超  等 《吉林大学学报(医学版)》 2007年33卷1期 9-12页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:设计荧光检测探针,对古DNA样本中的线粒体DNA片段进行定量分析,并对其检测效果进行评价.方法:利用分子信标的茎环结构和TaqMan的降解作用设计一种新型的TaqMan-Molecular Beacon荧光检测探针,与实时PCR仪联用...

            【关键词】 TaqMan-MB实时定量PCR定量分析

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            【中文期刊】 贺连华  扈庆华  等 《中国热带医学》 2006年6卷5期 761-762页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157:H7的快速方法. 方法根据GenBank公布O157:H7的rfbE保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,用FAM荧光剂标记探针的5'端,建立改良分子信标实时PCR检测O157:H...

            【关键词】 大肠杆菌O157H7改良分子

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            【中文期刊】 万成松  谭翰清  等 《中国公共卫生》 2006年22卷12期 1475-1477页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 采用分子信标PCR技术进行副溶血性弧菌tdh基因检测.方法 在反应体系中加入分子信标探针,对13株副溶血性弧菌和其他细菌分别进行tdh基因实时和终点法荧光检测.结果 2株副溶血性弧菌和阳性质粒的终点法检测荧光值分别为114.9,95....

            【关键词】 副溶血性弧菌(VP)分子tdh基因

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            【中文期刊】 扈庆华  郑薇薇  等 《现代预防医学》 2004年31卷3期 441-443页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:建立改良分子信标-实时PCR检测副溶血弧菌的快速方法,应用于副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验.方法:根据GenBank公布副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,用FAM荧光剂标记...

            【关键词】 副溶血弧菌改良分子实时PCR

            浏览:306 被引:44 下载:20
            • 概要:
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            【中文期刊】 朱进  张云  等 《中国人兽共患病杂志》 2002年18卷4期 61-62,74页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的确定肾综合征出血热病毒(HFRSV)在革螨体内分布和定位,进一步证明革螨作为HFRS传播媒介的意义.方法采用原位RT-PCR分子杂交技术检测鼠肺组织细胞内和革螨体内的HFRSV-RNA.结果阳性信号呈弥散分布,多见于鼠肺吞噬细胞、血管内...

            【关键词】 肾综合征出血热病毒原位RT-PCR革螨

            浏览:228 被引:2 下载:6
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            【中文期刊】 王尉平  蒋滢  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2002年18卷2期 161-164页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了探讨西蜂与高产王浆相关特异基因标记,用12种随机引物(P1~P12)对产王浆量不同的4品系西蜂的基因组DNA进行了RAPD-PCR分析,分别获得了产王浆量高、低不同西蜂的DNA多态性图谱,并从P2引物的DNA多态性图谱中筛选出一差异DN...

            【关键词】 西蜂RAPD-PCR杂交

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            • 概要:
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            【中文期刊】 邱亚群  扈庆华  等 《实用预防医学》 2015年22卷8期 905-908页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立高效、特异、简便、快速的四重实时荧光PCR(real-time PCR)检测体系同时检测沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H74种常见的主要食源性致病菌. 方法 从GenBank数据库中下载沙门菌侵袭...

            【关键词】 食源性致病菌实时荧光PCRHAND系统

            浏览:175 被引:6 下载:32
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            【中文期刊】 陆巧荣  方梅  等 《现代检验医学杂志》 2010年25卷3期 27-30页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立分子信标荧光定量PCR检测结核分枝杆菌的最佳反应体系,探讨影响分子信标荧光定量PCR扩增结果的多个因素.方法 利用单因素法和正交实验法,从MgCl2,引物,分子信标探针,dNTP,Taq DNA聚合酶5种因素对分子信标荧光定量PC...

            【关键词】 结核分枝杆菌分子荧光定量PCR单因素法

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            【中文期刊】 史跃杰  杨玉林  等 《中国卫生检验杂志》 2008年18卷4期 653-654页ISTIC

            【摘要】 目的:探讨Real-Time PCR对粪便检测艰难梭菌的可行性.方法:以组织培养细胞毒素试验为标准,参考艰难梭菌的毒素A/B基因相应的引物和分子信标探针,对标准菌株和粪便提取的DNA实行Real-Time PCR扩增.结果:Real-Tim...

            【关键词】 Real-Time PCR艰难梭状芽孢杆菌tcd A

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            【中文期刊】 戴善军  孙莹璞  《国外医学(计划生育-生殖健康分册)》 2007年26卷3期 144-148页ISTICCA

            【摘要】 实时荧光定量聚合酶链反应技术是一种基于荧光共振能量转移原理进行核酸定量的新型技术,常用荧光检测系统主要包括SYBR Green Ⅰ染料、Taqman探针、分子信标探针、蝎子引物探针、杂交探针、LUXTM引物、Amplisensor探针等.目...

            【关键词】 实时定量PCR荧光探针植入前遗传学诊断

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            【中文期刊】 赵丽华  周勇  等 《热带医学杂志》 2006年6卷5期 499-502页ISTICCA

            【摘要】 目的用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属(Shigella).方法根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列,设计引物和分子信标探针,以4种细菌进行对照,进行特异性和灵敏度分析,建立Shigella的实时PCR技术快...

            【关键词】 Shigella分子实时PCR

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            【中文期刊】 张新  何云志  等 《重庆医学》 2006年35卷17期 1547-1549页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的 建立2个快速、同步检测脲原体U.Parvum和U.Urealyticum的分子信标PCR反应体系.方法 依据脲原体尿素酶B基因序列,设计分别针对U.Parvum和U.Urealyticum的特异性分子信标探针及引物,建立2个分子信标P...

            【关键词】 分子PCR脲原体

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            【中文期刊】 石嵘  马文丽  等 《广东医学》 2003年24卷z1期 14-17页ISTICCA

            【摘要】 目的设计并应用60 mer寡核苷酸基因芯片实现对SARS冠状病毒的检测.方法根据寡核苷酸基因芯片的设计原则设计出30条60 mer的寡核苷酸片段,覆盖SARS冠状病毒(以TOR2株为参考序列,GENEBANK索取号:AY274119)全基因...

            【关键词】 SARS冠状病毒寡核苷酸基因芯片RD-PCR

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            【中文期刊】 王小红  王升启  《医外医学(分子生物学分册)》 2001年23卷1期 42-45页ISTICCA

            【摘要】 基于荧光能量传递技术的荧光定量PCR技术可实时监测PCR反应,准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等,它的出现,极大地克服了原有PCR技术存在的不足如交叉污染等问题,并改善了PCR技术的应用如可广泛应用于临床观测患者病情发展及预后,判断药物...

            【关键词】 荧光定量PCR

            浏览:645 被引:182 下载:173
            • 概要:
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            【中文期刊】 陈小金  董志珍  等 《中国动物检疫》 2016年33卷7期 72-77页

            【摘要】 对GenBank中基因3型猪戊型肝炎病毒(HEV)代表毒株基因进行序列分析,最终选定ORF3基因的部分序列为目的基因,运用生物信息学软件设计特异性引物和探针,扩增获得目的片段,并构建重组载体pUC-19-ORF3。梯度稀释重组质粒制备标准品...

            【关键词】 猪戊型肝炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 高博  黄野能  等 《口岸卫生控制》 2015年20卷6期 24-27页

            【摘要】 目的 建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法.方法 针对登革病毒3'-UTR保守区设计引物和分子信标探针,构建阳性参考质粒,建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法.应用建立方法对血清标本进行检测,检测结果与TaqMan探针法进行比较...

            【关键词】 分子实时荧光PCR登革病毒

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            【中文期刊】 徐速  刘晓辉  等 《中国乳品工业》 2010年38卷6期 8-12页

            【摘要】 从降解乳蛋白菌株Bacillus subtilis strain ZJ06中克隆蛋白酶基因apr,分析蛋白酶基因apr结构,预测蛋白酶性质.以PCR方法从降解乳蛋白菌株Bacillus subtilis strain ZJ06基因组中扩增一...

            【关键词】 降解乳蛋白碱性蛋白酶基因克隆

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            【中文期刊】 袁亚男  刘文忠  《中国畜牧兽医》 2008年35卷3期 27-30页

            【摘要】 实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性.该技术根据荧光作用方式分为:SYBR荧光染料法、TaqMan技术、分子信标和复合探针等类型,依据其各自优缺点可将各技术方法分别应用于畜牧兽...

            【关键词】 实时荧光定量PCR技术荧光共振能量转移荧光探针

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            【中文期刊】 史惠  杨得胜  《国外畜牧学-猪与禽》 2007年27卷3期 44-47页

            【摘要】 跨边界动物疾病(如口蹄疫、典型猪瘟和高致病性禽流感)的爆发和再次发生强烈地表明,需要开发功能强大和稳定的新型诊断方法.本文对1个OIE合作中心和2个欧盟计划合作伙伴在利用基于凝胶的PCR、常规PCR系统、系统发育史、分子流行病学、实时PCR...

            【关键词】 分子诊断PCR自动化

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            【中文期刊】 张贺  李波  等 《动物医学进展》 2006年27卷z1期 5-12页

            【摘要】 实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术.它利用荧光实...

            【关键词】 实时荧光定量PCR应用

            浏览:4 被引:129 下载:0
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            【中文期刊】 肖一红  孟庆文  等 《动物医学进展》 2006年27卷1期 21-24页

            【摘要】 原位杂交组织化学(ISHH)技术是利用两条互补单链之间通过核酸分子碱基的氢键配对反应形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学方法,在核酸原有的位置上把它显示出来.目前它已是一种比较成熟的技术,因其能对核酸进行原位检测而得到...

            【关键词】 原位杂交组织化学原位PCR号扩增

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            【中文期刊】 肖国生  曹三杰  等 《动物医学进展》 2005年26卷2期 13-17页

            【摘要】 荧光定量PCR是近年发展起来的一种新的实时定量检测特定核酸技术,它是核酸探针技术、荧光共振能量传递技术和PCR技术的有机结合,而荧光探针是荧光定量PCR的核心.目前报道的荧光探针主要有TaqMan、Amplisensor、分子信标、Ligh...

            【关键词】 荧光定量PCR荧光探针动物

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            【中文期刊】 石嵘  马文丽  等 《科学通报》 2003年48卷12期 1237-1241页

            【摘要】 设计并应用60 mer寡核苷酸基因芯片实现对SARS冠状病毒的检测.根据寡核苷酸基因芯片的原则设计出30条60 mer的寡核苷酸片段, 覆盖SARS冠状病毒(以最先提交全序列的TOR2株作为参考, GenBank登录号: AY274119)...

            【关键词】 SARS冠状病毒寡核苷酸基因芯片RD-PCR

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            【中文期刊】 戢福云  余其兴  等 《科学通报》 2001年46卷22期 1894-1898页

            【摘要】 在倒置显微镜下显微分离了黄鳝56条单染色体. 以兼并寡核苷酸为引物进行PCR扩增, 并将其DOP-PCR产物作为探针进行染色体反向描绘. 描绘结果表明, 已对黄鳝1, 3, 5, 6, 7, 10和12号染色体获得了成功的分离. 随后, 把...

            【关键词】 黄鳝显微分离DOP-PCR

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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 107-114页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在 TaqMan 探针法实时荧光定量 PCR 中,排除由引物探针聚合延伸引起的假阳性问题以及由引物二聚体(Primer Dimer,PD)引起的假阴性问题。首先对不同探针进行引物探针聚合实验;然后通过双重 PCR 的干扰实验选择合适的内标基...

            【关键词】 实时荧光定量 PCRTaqMan 探针反义碱基

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            【中文期刊】 李雪玲  陈勇  等 《中国食品卫生杂志》 2012年24卷1期 30-33页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立分子信标-实时PCR技术检测婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的快速方法.方法 在PCR反应体系中加入分子信标探针,探针的5′端标记FAM,3′端标记TAMRA,建立阪崎肠杆菌zpx基因分子信标-实时PCR技术快速检测方法.结果 检测方法...

            【关键词】 阪崎肠杆菌分子实时PCR

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            【中文期刊】 唐震  李显  等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2010年30卷12期 1729-1731,1759页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:基于核酸等温扩增技术(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)荧光分子信标探针检测技术,进行肠道病毒的快速检测与辅助诊断.方法:根据Genebank上肠道病毒5′端非编码区序列,...

            【关键词】 NASBA磁珠捕获探针

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            【中文期刊】 张红  郑欣  等 《热带医学杂志》 2012年12卷2期 162-164,183页ISTICCA

            【摘要】 目的 研究和评估乙型肝炎病毒(HBV)DNA G1896A点突变的实时荧光PCR检测方法.方法 收集经测序验证HBV DNA G1896A未突变的野生型样本150例和已发生突变的突变型样本58例,在突变区域设计分子信标探针,点突变处进行锁核...

            【关键词】 乙型肝炎病毒变异分子

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