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【中文期刊】 王硕 何金宝 等 《中草药》 2015年46卷1期 112-117页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对25个薏苡种质资源进行序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记研究.方法 采用改良CTAB法提取的薏苡叶片基因组DNA为模板,利用优化的SRAP-PCR反应体系,从88对引物中筛选出6对理想的引物组合,对25个薏苡种质资源进行SRAP...
【关键词】 薏苡； 序列相关扩增多态性标记； 遗传多样性；
【中文期刊】 许宏涛 陈东科 等 《中国热带医学》 2015年15卷5期 612-614页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 分析2014年结核标本检测结果并比较4种实验室常用检测方法以评价其临床应用价值.方法 对2014年792份结核标本进行实验室检测,并对罗氏改良培养法、荧光定量PCR法、涂片金胺O染色法及T-SPOT.TB等四种方法结果进行比较.结果 ...
【中文期刊】 官丽莉 张雪 等 《中草药》 2015年46卷17期 2603-2609页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 从红花Carthamus tinctorius花瓣中克隆转录因子基因CtMYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建.方法 根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣...
【中文期刊】 姚元枝 黎晓英 等 《中草药》 2015年46卷1期 107-111页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过克隆鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyltransferase,AACT)基因cDNA全长,并展开生物信息学分析和表达分析,为解析鱼腥草萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础.方法 采用RT-PCR方...
【关键词】 鱼腥草； 乙酰辅酶A酰基转移酶； RT-PCR；
【中文期刊】 曹月霞 凌键 等 《生物技术通报》 2015年31卷7期 58-63页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过西瓜枯萎病菌与其他专化型枯萎病菌及瓜类几种重要病原菌的比较基因组分析,获得了西瓜枯萎病菌的基因组特异序列.在此基础上,设计出特异引物,筛选可扩增出西瓜枯萎病菌特异性DNA条带的引物.将特异性引物和尖孢镰刀菌专化型的通用引物W106R/W...
【中文期刊】 代斯宁 王文玲 等 《中草药》 2015年46卷18期 2774-2780页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础.方法 根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PC...
【关键词】 2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶； RACE； 实时荧光定量PCR；
【中文期刊】 杨文婷 刘秀明 等 《中草药》 2015年46卷2期 250-254页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆红花花瓣中的黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)基因并研究其在不同开花时期的表达量.方法 根据红花花瓣转录组测序结果挑选FLS基因的设计引物,以红花花瓣总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增FLS基因片段...
【中文期刊】 姚元枝 黎晓英 等 《中草药》 2015年46卷16期 2449-2453页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆接骨草Sambucus chinensis3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达.方法 采用RT-PCR方法获得HMGR基因cDNA序列,并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析,...
【关键词】 接骨草； 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶； 实时荧光定量PCR；
【中文期刊】 孙同玉 祝娟 等 《中草药》 2015年46卷11期 1656-1660页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对西洋参Panax quinquefolium种子休眠与萌发过程中赤霉素20-氧化酶(GA20ox)基因编码区进行克隆及生物信息学分析.方法 根据西洋参种子转录组的注释信息,得到9条GA20ox相关序列,通过比对分析确定了GA20ox...
【中文期刊】 吴文如 刘良 等 《中草药》 2015年46卷14期 2127-2133页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立人参皂苷生物合成通路中的关键酶——人参达玛烯二醇合成酶(DS)基因cDNA序列的单核苷酸多态性(SNP)检测方法,为人参属植物DS基因的SNP研究以及人参类药材的品种鉴定提供参考.方法 采集不同产地、不同品种和生长年限的人参样品,...
【中文期刊】 尹明华 洪森荣 等 《中草药》 2015年46卷10期 1520-1524页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对黄独微型块茎鲨烯合酶(SQS)基因的表达量进行分析,旨在为阐明黄独微型块茎不同诱导形成时期皂苷的合成机制提供理论依据.方法 以Actin基因为内参基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析技术.通过对不同诱导形成时期的黄独微...
【中文期刊】 吴海娟 谢淑娴 等 《中国热带医学》 2015年15卷7期 785-788页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 应用改良分子信标探针建立多重实时荧光PCR方法快速检测产毒性大肠杆菌.方法 通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)下载产毒性大肠杆菌肠毒素基因Stp、Sth、Lt的基因序列,设计引物和探针,建立多重实时荧光PCR体系,应用于感染性腹...
【中文期刊】 曹凤明 杨小红 等 《微生物学通报》 2014年41卷5期 968-974页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 枯草芽孢杆菌近缘种群(简称枯草群)是一群表型相似的革兰氏阳性、产芽孢的杆菌,目前该群已包括10个有效发表种.该群细菌广泛应用于生物技术、工业和农业等领域,因此实现菌株的快速准确鉴别与鉴定,确保其使用的安全性和有效性是首要条件.本文在本研究室...
【中文期刊】 申玉华 徐振军 等 《植物遗传资源学报》 2014年15卷6期 1312-1319,1326页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 NAC转录因子是高等植物所特有的具有多种生物功能的转录因子,在植物生长发育、抵抗逆境和激素调节等过程中发挥着重要作用.本研究利用RACE-PCR技术,克隆获得了紫花苜蓿NAC转录因子MsNAC1(GenBank登录号为JN099384.1)...
【中文期刊】 黄颖桢 陈菁瑛 等 《中草药》 2014年45卷15期 2230-2234页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究金线莲Anoectochilus roxburghii种质资源及其伪品的遗传多样性.方法 采用ISSR方法,对24份试验材料进行PCR扩增,对扩增结果进行电泳检测.对条带进行“0”、“1”矩阵标记后,应用NTSYSpc软件,计算材...
【中文期刊】 李敏 黄龙妹 等 《中草药》 2014年45卷12期 1754-1757页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用特异性引物对浙贝母Fritillaria thunbergii进行特异性PCR鉴定.方法 回收RAPD扩增筛选到的浙贝母分子标记ZB1基因,将其连接进入T-载体克隆并测序.根据测序结果设计一对特异性引物P2/P3,以贝母基因组DN...
【中文期刊】 陈娟 谷巍 等 《中草药》 2014年45卷21期 3149-3152页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对主产地广东遂溪、福建漳浦及引种栽培地区江苏南京、淮安的不同生长期穿心莲Andrographis paniculata活性成分及关键酶基因表达情况进行分析,研究穿心莲活性成分积累动态,探讨其最佳采收期及分子机制.方法 用HPLC法测定...
【中文期刊】 侯双利 韩梅 等 《中草药》 2014年45卷17期 2530-2533页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立人参β-actin基因实时荧光定量PCR的方法.方法 根据GenBank上其他高等植物β-actin基因保守区域设计一对特异性引物,将从人参中PCR扩增得到的β-actin基因克隆到pMD20-T载体上构建重组质粒,经1/10梯度...
【中文期刊】 谭翰清 蔡建生 等 《中国食品卫生杂志》 2014年26卷1期 40-44页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测方法.方法 根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,建立和优化反应体系,用25种其他常见致病菌评价反应体...
【关键词】 克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌)； 实时荧光定量PCR； TaqMan-MGB探针；
【中文期刊】 雒军 王引权 等 《中草药》 2014年45卷13期 1907-1913页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆当归Angelica sinensis1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达.方法 根据己克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA...
【关键词】 当归； 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶； 克隆；
【中文期刊】 魏麟 伍贤进 等 《中草药》 2014年45卷11期 1607-1612页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆鱼腥草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶1(DXSl)基因并分析其表达差异.方法 根据已经获得的鱼腥草DXS1转录本序列设计1对引物,采用RT-PCR方法获得DXS1基因cDNA序列并对DXS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三...
【关键词】 鱼腥草； 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶； RT-PCR；
【中文期刊】 徐丽 陈新 等 《植物遗传资源学报》 2014年15卷2期 320-326页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据CBF基因氨基酸保守序列设计简并引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆核桃JrCBF基因cDNA全长序列.用实时荧光定量PCR分析JrCBF基因在低温胁迫下的表达模式,并分析JrCBF基因的单核苷酸多态性.结果获得长度为87...
【中文期刊】 刘建福 钟书淳 等 《中草药》 2014年45卷21期 3141-3148页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对姜黄Curcuma longa苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因(CurPAL)全长进行克隆并开展生物信息学分析,为姜黄次生代谢产物的生物合成机制研究奠定基础.方法 利用RT-PCR...
【中文期刊】 孙同玉 祝娟 等 《中草药》 2014年45卷24期 3599-3606页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆、分析西洋参Panax quinquefolium种子萌发过程的赤霉素2-氧化酶(gibberellin 2-oxidase,GA2ox)基因.方法 从前期由高通量测序得到78 207条unigenes基因的注释信息中挖掘出与赤霉...
【中文期刊】 宋士利 《现代预防医学》 2014年41卷10期 1862-1865页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 建立双重荧光PCR用于检测食物中毒中副溶血性弧菌和沙门菌.方法 设计特异性引物和探针用于扩增副溶血性弧菌tlh基因和沙门菌invA基因(invA),采用倍比稀释法检测方法的DNA灵敏度和菌液灵敏度,采用9株其他肠道致病菌验证方法的特异...
【中文期刊】 张晓 孟志刚 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2014年30卷11期 1119-1125页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【中文期刊】 魏麟 伍贤进 等 《中草药》 2014年45卷24期 3607-3611页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆鱼腥草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)基因,并分析其差异表达.方法 采用RT-PCR方法获得DXR基因cDNA序列,并对DXR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测了该蛋白功能;利用实时荧光定量...
【关键词】 鱼腥草； 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶； 萜类化合物；
【中文期刊】 王峰 吴秋红 等 《中草药》 2013年44卷16期 2294-2299页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对杯萼海桑Sonneratia alba萜类化合物生物合成途径的关键酶法呢基焦磷酸合成酶(Farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)基因的编码cDNA序列进行克隆,为研究杯萼海桑萜类化合物生物合成与基因调...
【中文期刊】 邢朝斌 龙月红 等 《中草药》 2013年44卷13期 1819-1822页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆刺五加Eleutherococcus senticosus的肌动蛋白(actin,ACT)基因并使其成为可用的内参基因.方法 运用RT-PCR法克隆ACT基因的部分序列,并以其为内参基因进行半定量PCR和real-time PCR...
【中文期刊】 范丙友 李芳 等 《中草药》 2013年44卷15期 2136-2142页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆芍药肌动蛋白(Actin)基因并应用RT-PCR技术分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况.方法 根据近缘物种Actin基因的保守序列设计一对PCR扩增引物,以“桃花飞雪”芍药根部总RNA反转录而成的cDNA为模板,采用RT...
【中文期刊】 赵文婷 魏建和 等 《中草药》 2013年44卷23期 3379-3385页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞定位,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣.方法 从白木香愈伤组织中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法克隆倍半萜合酶ASS基因,并连接于pEZS-NL载体和p...
【中文期刊】 徐洁森 魏建和 等 《中草药》 2013年44卷17期 2453-2459页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆北柴胡Bupleurum chinense中可能参与柴胡皂苷生物合成的糖基转移酶基因BcUGT8,构建其原核表达载体,为通过体外表达和纯化蛋白的催化活性,分析验证其功能奠定基础.方法 在Roche (454) GS FLX系统高通...
【中文期刊】 魏麟 伍贤进 等 《中草药》 2013年44卷23期 3372-3378页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆鱼腥草查耳酮合成酶1 (CHSl)基因并分析其蛋白质序列.方法 根据已经克隆的植物CHS基因的保守序列设计一对引物,以鱼腥草总RNA为模板,采用RT-PCR和SON-PCR的方法快速获得CHS基因序列并连接到pMD 18-TSim...
【中文期刊】 高山 陈桂信 等 《植物遗传资源学报》 2013年14卷6期 1124-1129页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与β-Gal基因相关的EST序列,采用经3′RACE技术,克隆获得1个苦瓜β-Gal基因的cDNA序列McGAL,全长为2261 bp,开放阅读框2160 bp,编码719个氨基酸.该基因在GenBa...
【中文期刊】 李晓霞 付丽娅 等 《微生物学通报》 2013年40卷9期 1618-1623页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]了解大学生宿舍空气中产超广谱p-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率和分离株之间的遗传相似性,为预防和控制传染病的传播提供依据. [方法]用FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器采集大学生宿舍内室内空气并分离鉴定其中的产ESB...
【关键词】 空气； 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)； 大肠埃希菌；
【中文期刊】 吴琼 孙超 等 《中草药》 2013年44卷11期 1476-1480页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆西洋参三萜皂苷生物合成途径关键酶β-香树脂合成酶(bAS)全长cDNA,为研究西洋参皂苷生物合成与次生代谢调控奠定基础.方法 采用大规模ESTs测序和cDNA末端扩增(RACE)技术克隆西洋参bAS基因.结果 获得了西洋参bAS基...
【中文期刊】 张蕾 张海予 等 《中国食品卫生杂志》 2013年25卷6期 520-524页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 将环介导等温扩增检测方法应用于食品中沙门菌的检验,并在检测方法特异性、灵敏度等方面与实时荧光PCR和传统检测方法进行比较.方法 针对沙门菌属高度保守的fim Y基因设计环介导等温扩增检测引物并优化反应体系,在特异性、灵敏度和实际样品检...
【中文期刊】 杜琳 向进乐 等 《中国中药杂志》 2013年38卷13期 2092-2095页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立一套快速、灵敏、高效的怀地黄TMV检测技术,为怀地黄TMV的脱毒检测提供技术支持,以实现怀地黄脱毒苗的产业化生产,改善病毒病引起的品种退化现象.方法:根据GenBank上登录的TMV外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用免疫捕...
【中文期刊】 陈思 曾磊 等 《生物工程学报》 2010年26卷4期 530-537页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究通过对霞多丽葡萄花前约10 d的花丝进行组培诱导,获得胚性和非胚性两种愈伤组织,分别进行继代、组织结构观察和体细胞胚的诱导验证.为研究两种愈伤组织对培养基中主要碳源蔗糖的利用特点,根据GenBank中的定位于细胞质膜的葡萄蔗糖转运蛋白...
【关键词】 Vitis vinifera L.； 愈伤组织； 蔗糖转运蛋白；
【中文期刊】 刘静 吴凤芝 等 《应用生态学报》 2010年21卷3期 661-667页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 采用PCR-DGGE技术,研究了NaCl(0、292.5、585 mg·kg~(-1)土)胁迫下,不同浓度苯丙烯酸(0、25、50、100、200 mg·kg~(-1)土)对黄瓜根际细菌DNA分子水平多态性的影响.结果表明:在黄瓜幼苗的不同...
【中文期刊】 王海鸿 雷仲仁 《生态学杂志》 2010年29卷4期 693-701页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了检测B型烟粉虱和温室白粉虱在受到温度胁迫时热激基因Hsp70的差异表达谱,克隆了2种粉虱Hsp70基因的全长cDNA序列,并用实时定量PCR的方法分析了在不同温度条件下该基因的表达谱.结果表明:B型烟粉虱和温室白粉虱的Hsp70基因BT...
【中文期刊】 李坤 郭修武 等 《应用生态学报》 2009年20卷12期 3109-3114页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 分别采集种植葡萄30年的连作园和3年的新植园根围土、非根围土及葡萄园周边的空地土壤,采用PCR-DGGE技术,研究葡萄连作对土壤细菌和真菌种群结构及多样性的影响,并对分离出的优势种扩增条带进行测序.结果表明:葡萄连作后土壤细菌和真菌的多样性...
【中文期刊】 张吕平 胡超群 等 《应用生态学报》 2009年20卷10期 2551-2557页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以细菌16S rDNA片段作为分子标记,采用PCR结合DGGE(Denaturing gradient gel electrophoresis)的方法构建了细菌区系指纹图谱,研究了对虾苗池使用硫酸链霉素、土霉素和氨苄青霉素3种抗生素后水体细...
【中文期刊】 陆海英 黄松明 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2009年29卷8期 1153-1156页 ISTICPKUCSCDCA
【关键词】 小儿癫痫； Interleukin.1α基因； 多态性；
【中文期刊】 尹明华 洪森荣 《中草药》 2009年40卷9期 1462-1466页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 以黄独为试材,研究不同因素对黄独茎尖培养的影响,以期找到适合黄独茎尖分化成苗的培养基和脱毒检测方法 .方法 采用植物组织培养的方法 进行茎尖培养,采用症状学法、指示植物法和RT-PCR法对茎尖脱毒植株进行病毒检测.结果 黄独茎尖的最佳...
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