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【中文期刊】 李小平 邓楠  等 《分子细胞生物学报》 2006年39卷1期 1-8页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

【摘要】 植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用.利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs...

【关键词】 大豆； 类受体蛋白激酶； RNAi；

【中文期刊】 莫爱琼 文了  等 《华南师范大学学报（自然科学版）》 2016年48卷4期 50-56页

【摘要】 根据番茄基因组DNA序列信息设计引物进行PCR扩增了Micro-Tom中番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase,LcyB)基因起始密码子上游1 534 bp启动子区域序列(LcyBp),生物信息学分析表明,该启动子序列中存在...

【关键词】 番茄； 番茄红素β-环化酶(Lycopene β-cyclase,LcyB)； 启动子；

【中文期刊】 胡兰 隋世慧  等 《中国兽医杂志》 2013年49卷7期 11-13,17页

【摘要】 为了建立有效抑制MSTN基因表达的方法,本试验利用基因克隆技术构建MSTN RNAi双元表达载体,并利用脂质体介导转染成肌细胞、用SDS-PAGE和Western blottingf法检测蛋白质的表达.试验结果表明,以TA载体为克隆载体,p...

【关键词】 MSTN基因； RNAi； 双元表达载体；

【中文期刊】 杨少华 王丽  等 《西北农业学报》 2010年19卷1期 147-150页

【摘要】 萝卜过氧化物酶在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要作用.利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究酶功能已日渐成熟.本文根据植物hpRNA(hairpin RNA)的原理,以萝卜过氧化物酶基因r...

【关键词】 萝卜； 过氧化物酶； RNA干扰双元表达载体；

【中文期刊】 谭秀华 武玉永  等 《江苏农业学报》 2010年26卷5期 920-924页

【摘要】 为了通过构建高通量RNAi(RNA干扰)双元载体来得到油菜RNAi文库,对PCR引物设计时,在目的片段5'端和3'端分别引入合适的酶切位点序列,在3种中间载体的基础上构建高通量RNAi双元载体pHBMT4.该载体Bsu36Ⅰ酶切位点间的片段...

【关键词】 RNAi文库； 构建； 油菜；

【中文期刊】 谭秀华 宋晓冬  等 《安徽农业科学》 2009年37卷8期 3474-3476,3519页

【摘要】 [目的]为利用RNAi技术研究植物基因组功能奠定基础.[方法]通过PCR技术克隆一系列RNAi双元载体所需要的元件:绿色荧光蛋白基因(gfp)、花椰菜花叶病毒启动子 (CamV35S)、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因(aada)、胭脂碱合...

【关键词】 RNAi； 构建； 基因克隆；

【中文期刊】 王芳 董乐  等 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2009年24卷5期 526-530页

【摘要】 植物水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是细胞膜上选择性高效转运水分子的特异蛋白孔道.本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以甘草质膜水通道蛋白基因GuPlP1为靶基因,在GuPlP1-cDNA序列中选择378b...

【关键词】 甘草； 水通道蛋白； RNAi；

【中文期刊】 曹艳红 章镇  等 《实验生物学报》 2004年37卷6期 487-493页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

【摘要】 以成熟苹果果实的RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆苹果多酚氧化酶(APPO)长度为710bp的反义、正义基因片段.以副球菌中类胡罗卜素合成有关的(crtW+crtY)融合基因片段YYT为间隔区,将APPO反义基因片段、YYT和APPO正...

【关键词】 双链RNAi APPO基因 载体构建 遗传转化 苹果 荧光定量 RT-PCR；

【中文期刊】 韦淑亚 张莹莹  等 《基因组学与应用生物学》 2013年5期 581-588页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 水稻钙依赖型蛋白激酶(CDPKs)是一个响应逆境胁迫并在植物发育过程中起重要作用的蛋白激酶。我们采用RT-PCR从水稻品种日本晴(Oryza sativa L. cv. Nipponbare)中克隆了OsCPK9基因靠近翻译起始位点下游的一...

【关键词】 OsCPK9； 水稻； RNAi；

【中文期刊】 梁倩倩 魏玉杰  等 《西北植物学报》 2009年29卷8期 1520-1526页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 的RNAi双元表达载体pARC,转化烟草获得转基因植株.

【关键词】 可待因酮还原酶； RNAi载体构建； 转化；

【中文期刊】 胡钟东 乔玉山  等 《西北植物学报》 2007年27卷7期 1285-1290页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 以砂梨'若光'的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯...

【关键词】 砂梨； 脂氧合酶； RT-PCR；

【中文期刊】 刘乐承 向珣  等 《遗传》 2006年28卷11期 1428-1434页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜 (Brassica campestris ssp. chinensis var. communis, syn. B. rapa ss...

【关键词】 普通白菜； BcMF4； 菜心；

【中文期刊】 马欣荣 谈心  等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷2期 151-154页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶...

【关键词】 RNA干扰(RNAi)； 发卡RNA(hpRNA)； 小分子干扰RNA(siRNA)；

【中文期刊】 蹇锐 程小星  等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷11期 26-31页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 为建立一条简便、有效的构建哺乳动物细胞随机RNAi文库技术路线,首先通过PCR将19～21nt siRNA编码序列及终止信号等元件引入U6启动子下游,再将该扩增产物定向克隆至H1启动子的下游.构建的双启动子载体中,U6和H1相对排列,均以其...

【关键词】 RNAi 双启动子载体 EGFP bcl-2；

【中文期刊】 《生物技术通讯》 2009年20卷6期 786-788页 ISTICCA

【摘要】 目的:利用发根农杆菌ACCC10060介导丹参牛儿基牛儿基焦磷酸合酶1基因(SmGGPS1)RNA干扰(RNAi)载体转化丹参叶片,生成SmGGPS1的RNAi转基因毛状根.方法:根据已克隆到的SmGGPS1特异区域设计并合成2段RNAi序...

【关键词】 丹参； 牛儿基牛； 儿基焦磷酸合酶；

【中文期刊】 刘天巍 任丽  等 《东北农业大学学报》 2013年4期 83-87页

【摘要】 在克隆人参鲨烯环氧酶基因保守区约364 bp片段基础上，构建该基因的RNAi植物双元表达载体pMHZ111-SE，并利用农杆菌介导的遗传转化方法转化人参愈伤组织，通过HPLC方法测定转基因和非转基因人参愈伤组织中6种单体皂苷的含量。结果表明...

【关键词】 人参； 鲨烯环氧酶； RNAi；

【中文期刊】 张贵林 李臻  等 《山东农业科学》 2013年45卷1期 19-24页

【摘要】 针对水稻黑条矮缩病毒S6、S10两条RNA双链,参考相关文献,设计了2对引物,通过RT-PCR获得了2条干扰片段,将这些干扰片段分别构建到RNA干扰载体中,进一步将整个RNA干扰片段构建入以玉米泛素Ubi为启动子、以生物安全性的bar基因为...

【关键词】 水稻黑条矮缩病； RNA干扰(RNAi)； Ubi启动子；

【中文期刊】 岳智亮 马惠斌  等 《河北大学学报（自然科学版）》 2012年32卷4期 393-398页

【摘要】 利用RNAi技术,构建了AtPLC4基因的RNAi双元载体,并进行了拟南芥的遗传转化,通过抗性筛选及PCR鉴定,获得20株遗传转化株系.进一步通过RT-PCR检测,得到3株AtPLC4基因表达降低的转基因植株,为运用反向遗传学的方法深入研究...

【关键词】 拟南芥； AtPLC4； RNAi；

【中文期刊】 徐玲娜 汪阳东  等 《林业科学研究》 2011年24卷5期 668-673页

【关键词】 油桐； DGAT2； RNAi；

【中文期刊】 徐品三 白建芳  等 《中国农学通报》 2011年27卷4期 144-147页

【摘要】 为获得适合转化百合的双价RNAi表达载体,以感病百合叶片的总RNA为模板,分别扩增400bp 左右的LSV和LMoVCP基因.通过重叠延伸PCR技术获得长约800 bp的LSV-LMoV融合基因.利用Gateway技术,通过BP反应及LR反...

【关键词】 百合无症病毒； 百合斑驳病毒； RNAi载体；

【中文期刊】 周建英 曹颖  等 《福建林业科技》 2010年37卷2期 28-32页

【摘要】 根据慈竹4-香豆酸辅酶A连接酶(Na4CL)全长cDNA序列,通过RT-PCR从慈竹幼笋cDNA中扩增约600 bp的保守片段.DNAMAN多重比对分析表明,该目标片段与3条烟草4CL基因同源性达84.08%.将目标片段插入到pSK-int...

【关键词】 慈竹； 4CL； RNAi；

【中文期刊】 吴丹 胡兰  《沈阳农业大学学报》 2009年40卷1期 38-42页

【摘要】 为了确定MSTN RNAi双元表达载体pEGFP-N1-M1-M2对成肌细胞增殖和分化的影响,利用脂质体介导法将该双元表达载体转染成肌细胞.MTT法检测MSTN RNAi双元表达载体对成肌细胞增殖的作用,Giemsa染色检测pEGFP-N1...

【关键词】 MSTN基因； 双元表达载体； 成肌细胞；

【中文期刊】 梁倩倩 张金文  等 《甘肃农业大学学报》 2009年44卷6期 52-56,106页

【摘要】 以野生罂粟(Papaver somniferum)试管苗幼叶为材料,用 Trizol 试剂盆提取总RNA,通过RT-PCR法获得BBE基因的 cDNA片段,序列分析表明,所获得的 cDNA序列全长1 608 bp,具有完整的开放阅读框(OR...

【关键词】 罂粟； BBE基因； RNAi载体构建；

【中文期刊】 马立安 张忠明  《长江大学学报B（自然科学版）》 2007年4卷3期 73-76,99页

【摘要】 根据编码拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)基因cDNA全序列设计超表达引物,以1～1 000 bp之间序列设计GFP引物和序列内部第24～240 bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-PhrIP1为模板,用PCR方法分别扩增出1...

【关键词】 拟南芥PhrIP1基因； 超表达载体； RNAi载体；

【中文期刊】 马立安 张忠明  《长江大学学报B（自然科学版）》 2007年4卷2期 41-44页

【摘要】 根据编码拟南芥小GTP结合蛋白的Ran2基因cDNA全序列设计超表达引物和序列内部第397～610 bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-Ran2为模板,用PCR方法分别扩增出666 bp和214 bp的片段,分别连接至双元表达载...

【关键词】 Ran2； 超表达载体； RNAi载体；

【中文期刊】 李凤岚 邱德有  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷5期 55-60页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:利用RNA干扰技术抑制紫杉烷14β-羟基化酶(简称140H)基因的表达.方法:以曼地亚红豆杉(Taxus×media)为材料,通过农杆菌介导的双元载体转化系统将针对140H基因构建的RNA干扰载体导入该植物细胞中.应用PCR-Sout...

【关键词】 曼地亚红豆杉； 紫杉烷14β-羟基化酶； RNA干扰；

【中文期刊】 贾玉红 马天舒  等 《现代生物医学进展》 2009年9卷12期 2243-2245,2309页 ISTICCA

【摘要】 目的:构建抑制p21基因表达的pSUPER RNAi载体(pSUPER-p21)并鉴定其功能.方法:化学合成一对编码短发夹RNA序列的、靶向大鼠p21基因的寡核苷酸链,各60个碱基,退火,克隆到经Bg1 Ⅱ、HindⅢ双酶切的pSUPER质...

【关键词】 p21； pSUPER； RNAi；