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【中文期刊】 张代群 李峰 等 《中国免疫学杂志》 2020年36卷9期 1044-1048,1057页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:比较抗原亲和力不同的scFv片段对CAR-T细胞增殖、分化和抗肿瘤能力的影响.方法:分别构建靶向ErbB2的FRP5(KD=30 nmol/L)和chA21(KD=11 nmol/L)CAR慢病毒表达载体,包装病毒后制备CD8+CAR...
【关键词】 单链可变区(scFv)； ErbB2； 亲和力；
【中文期刊】 马巍娜 刘雪林 等 《检验医学与临床》 2016年13卷12期 1608-1610页 ISTICCA
【摘要】 目的 筛选生物素化三聚氰胺人源单链可变区(scFv)抗体,为研究相关快速检测试剂盒创造条件.方法 本试验利用生物素化三聚氰胺为包被抗原,从半合成噬菌抗体库中筛选其特异性噬菌体抗体片段.即采用菌噬体表面展示技术,以链亲和素-生物素标记的三聚氰...
【中文期刊】 崔鑫铭 董宇曦 等 《现代生物医学进展》 2024年24卷1期 18-24页 ISTICCA
【摘要】 目的:通过对CAR结构的ScFv单链可变区进行改造,构建并筛选具有更强杀伤肿瘤细胞功能的新型靶向人源B细胞成熟抗原(BCMA)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞.方法:构建靶向人源BCMA的CAR分子,用逆转录病毒载体包装成功后转导健康志愿者...
【中文期刊】 赵荣 陈含宇 等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷2期 1-6页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:CD19单链抗体可变区(single-chain fragment variable)scFv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)是调节性B细胞(Breg)的主要特征之...
【中文期刊】 马巍娜 贾雷立 等 《中国公共卫生》 2009年25卷3期 287-288页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 筛选盐酸克伦特罗(CLB)人源单链可变区(ScFv)抗体,为研究快速检测试剂(盒)提供基础依据.方法 采用噬菌体表面展示技术,以CLB作为抗原,从噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选抗CLB的60个克...
【关键词】 噬菌体表面展示技术； 盐酸克伦特罗； 人源单链可变区抗体(ScFv)；
【中文期刊】 刘雅坤 毕振威 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷12期 5762-5773页
【摘要】 为减少和改善鼠源单克隆抗体在犬临床治疗中的异源性和功效,用RT-PCR方法从分泌抗犬瘟热病毒(CDV)中和单克隆抗体的鼠源杂交瘤细胞中扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),通过Linker将VH和VL连接获得单链抗体(scFv)基...
【中文期刊】 陈荫楠 罗婉妹 等 《菏泽医学专科学校学报》 2023年35卷1期 1-5,13页
【摘要】 目的 运用核糖体展示技术筛选抗人p53单链抗体,并进行初步分析.方法 诱导表达p53蛋白,用其免疫小鼠.提取免疫小鼠脾脏组织的总RNA,通过反转录PCR和重叠延伸PCR分别扩增抗体重链可变区基因VH-Linker和轻链可变区基因VL-Lin...
【中文期刊】 董琦 《分子细胞生物学报》 2006年39卷5期 482-488页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 大多数真核生物端粒3'末端由富含鸟苷酸的重复序列组成,并可以在体外形成四链G4-DNA结构.为了解这种结构是否在体内存在,本文中我们以芽殖酵母作为研究对象,将G4-DNA作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗G4-DNA的单克隆抗体,结果显示...
【中文期刊】 刘萌 孙杨 等 《生物学杂志》 2016年33卷6期 1-6页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从人血清白蛋白HSA 免疫小鼠制备的杂交瘤单克隆抗体细胞中提取总RNA，通过反转录得到cDNA，经RT-PCR的方法扩增出单克隆抗体的重链可变区VH和轻链可变区VL的DNA编码序列，通过基因重组的方法将鼠源Fab段VH和VL与人源Fab段重...
【中文期刊】 韩宜均 孙举 等 《黑龙江畜牧兽医》 2021年2期 91-96页
【摘要】 为了构建和筛选抗Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)单链抗体库,试验用Ⅰ型鸭肝炎疫苗免疫樱桃谷鸭,以分离的外周血淋巴细胞总RNA为模板,根据抗体保守区序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增出鸭IgG轻链可变区和重链可变区基因,由Linker序列连接...
【关键词】 Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)； 噬菌体抗体库； 单链抗体(ScFv)；
【中文期刊】 高国辉 王金丹 等 《中国病理生理杂志》 2011年27卷5期 1034-1040页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达获得携带绿色荧光蛋白(GFP)的抗人表皮生长因子受体2(HER2)的单链抗体可变区片段(ScFv),分析其靶向结合乳腺癌细胞表面受体HER2的功能.方法:构建融合基因anti-HER2-ScFv-GF...
【关键词】 抗HER2单链抗体可变区片段； 绿色荧光蛋白； 融合基因表达；
【中文期刊】 闫璐 曾抗 等 《中国皮肤性病学杂志》 2011年25卷10期 815-817页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 天疱疮( pemphigus)是一种机制不明的慢性自身免疫性大疱性疾病.研究和制作其动物模型对疾病的原因、发病机制及治疗措施等具有重要意义,但目前尚无统一的标准方法.本文就国内外天疱疮的小鼠模型(Dsg3-/-鼠,过继免疫的Rag2-/-小...
【中文期刊】 翟伟 郝长付 等 《郑州大学学报（医学版）》 2011年46卷6期 852-855页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建具有良好多样性的人尘肺病噬菌体单链抗体( ScFv)库.方法:收集25例尘肺病患者外周血标本共50 mL,密度梯度离心法分离淋巴细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录后参考文献设计并合成半巢式PCR引物,扩增抗体重链(VH)和轻...
【中文期刊】 年四季 黄黎 等 《中国免疫学杂志》 2010年26卷6期 544-547页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人源性天然噬菌体展示文库并对文库进行鉴定.方法:从未经主动免疫健康志愿者的外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA,用直接PCR及半巢式PCR扩增人抗体重链(VH)及轻链(Vκ和Vλ)可变区基因.采用改进的重叠延伸PCR法...
【中文期刊】 肖静 刘章锁 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷9期 791-794页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 制备人抗肾小球基底膜(GBM)抗体的特异性人源化单链可变区抗体.方法 采用噬菌体表面展示技术,获得一个与人抗GBM抗体结合活性较强的单链可变区抗体片段的阳性克隆,并对该克隆进行DNA序列测定分析.结果 对噬菌体单链可变区抗体库经过3轮...
【中文期刊】 王宏 陶俊 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷7期 674-677页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与bFGF特异性结合的人源性单链抗体(scFv).方法 用rhbFGF对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,并通过phage ELIS...
【中文期刊】 邓亮 舒建昌 《实用医学杂志》 2009年25卷2期 321-322页 ISTICPKUCA
【摘要】 <篇首> 单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)由抗体重链可变区和轻链可变区通过15～20个氨基酸的短肽(linker)连接而成.在目标特定的scFv上连接放射性核素、生物毒素、药物,将极大增强对靶细...
【中文期刊】 王福旭 张颜 等 《中国实验血液学杂志》 2009年17卷6期 1453-1458页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 已有研究证实,B细胞淋巴瘤病人自身免疫球蛋白独特型可视为肿瘤特异性抗原用于独特型疫苗.为探究带有细胞因子的融合型独特型肿瘤疫苗是否会提高免疫效果,制备小鼠B细胞型淋巴瘤细胞的独特型单链可变区片段,与免疫佐剂单核细胞趋化因子MCP3融合,同时...
【中文期刊】 赵振富 苏雪莹 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2009年25卷8期 732-734,737页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 构建人源性的老年痴呆(AD)噬菌体抗体库,筛选1株人源性的β-淀粉样蛋白(Aβ)特异性单链抗体(scFv).方法: 利用噬菌体展示技术,用20个AD患者的外周血B细胞首次构建了AD患者的单链可变区噬菌体抗体库.以Aβ40为靶,挑选出...
【中文期刊】 秦红 金晓航 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2009年30卷6期 689-693页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建、表达及鉴定迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因.方法 采用RT-PCR方法从分泌迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E11)中克隆出V_H和V_L可变区基因, 再通过重叠延伸拼接PCR方法在V_H和V_L可变区基因之间引入...
【中文期刊】 陈小军 王洋 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2007年23卷12期 1147-1149,1156页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建及表达抗人CD33单链抗体(抗CD33-scFv)基因,并检测其生物活性.方法:采用RT-PCR方法从分泌抗人类白细胞表面分化抗原CD33单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中克隆出VL和VH可变区基因,再通过重叠延伸拼接(splic...
【中文期刊】 杨秀清 王慧 等 《微生物学通报》 2007年34卷6期 1037-1041页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 B型肉毒毒素重链C-端片段(BoNTB/Hc)经金属螯和层析法纯化后免疫Balb/c小鼠,从其脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA,用抗体可变区混合引物进行全套抗体重、轻链可变区基因的扩增,体外随机装配成单链抗体(scFv).将其克隆...
【中文期刊】 余敏 尚海 等 《中国免疫学杂志》 2007年23卷8期 727-731页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建一个U251细胞血清饥饿特异抗原ScFv噬菌体抗体库.方法:将U251细胞进行48小时的血清饥饿培养,将其细胞裂解液免疫4周龄的BALB/c小鼠,提取被免疫小鼠脾脏细胞总RNA,反转录成cDNA,利用RT-PCR扩增免疫球蛋白Ig...
【中文期刊】 岳建华 潘秀珍 等 《医学研究生学报》 2006年19卷4期 298-301,305页 ISTICPKU
【摘要】 目的:构建人源抗红细胞Rh(D)抗原单链噬菌体抗体库.方法:应用噬菌体展示技术,从分泌抗Rh(D)抗体的细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA第一条链,多次PCR扩增和克隆抗体可变区基因(VH/VLcDNA),经重叠延伸拼接(SOE)用编码...
【中文期刊】 陈森 饶青 等 《生物工程学报》 2005年21卷5期 686-691页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用RT-PCR方法从分泌抗人类白细胞表面分化抗原CD19单克隆抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL可变区基因,再通过重叠延伸拼接(splice-ovedap extension)PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser...
【关键词】 CD19； 单链抗体(ScFv)； 原核表达；
【中文期刊】 《中国生物工程杂志》 2005年25卷10期 17-24页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从未经主动免疫的健康志愿者的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,得到了6种VH家族基因,11种VL家族基因,这些抗体基因家族覆盖了人抗体基因多样性的95%以上.采用改进的SOE PCR...
【关键词】 单链抗体(scFv)； 噬菌体抗体库； 重叠延伸拼接；
【中文期刊】 曹经瑗 De Jaeger Geert 等 《病毒学报》 2005年21卷5期 343-348页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了探讨人源抗甲型肝炎(甲肝)病毒scFv-Fc融合抗体在酵母中的表达特性,将获得的人源抗甲肝病毒中和性单链可变区抗体(scFv抗体)基因克隆入含信号肽及人IgG1Fc抗体基因的酵母细胞表达载体中,获得了一株中和性人源抗甲肝病毒pPiscF...
【关键词】 甲型肝炎病毒； 人源基因工程抗体； scFv-Fc融合抗体；
【中文期刊】 张国民 陈宇萍 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷6期 719-722页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因, 构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达.方法: 根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物, 用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因, 并重组到scFv的表达载体中, 在大肠杆菌进行...
【中文期刊】 赵岩 王清明 等 《生物工程学报》 2004年20卷5期 667-672页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建抗人乳腺癌细胞MCF-7的噬菌体单链抗体库,从中筛选MCF-7细胞特异性单链抗体.用MCF-7细胞免疫BALB/C小鼠,取脾脏,提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,经重叠PCR(SOE-PC...
【中文期刊】 李容 熊冬生 等 《生物工程学报》 2004年20卷2期 187-191页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用RT-PCR技术从分泌抗人血管内皮生长因子受体Ⅱ(kinase insert domain-containing receptor,KDR)基因Ⅲ区单克隆抗体Ycom1D3的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL可变区基因,通过重叠延伸拼接(sp...
【关键词】 血管内皮生长因子； KDR； 单链抗体(ScFv)；
【中文期刊】 高瀛岱 熊冬生 等 《中国免疫学杂志》 2004年20卷4期 267-271页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建表达抗PgpScFv,进行体外活性的测定.方法:利用RT-PCR方法,克隆抗Pgp杂交瘤细胞PHMAO2的重链可变区基因(VH),轻链可变区基因(VL),拼接为单链抗体(ScFv),再克隆到具有强启动子的PET28a(+)载体上进...
【中文期刊】 张宏伟 徐永俊 等 《中国公共卫生》 2003年19卷5期 567-568页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的利用分子重组技术构建小鼠单链抗体片段(ScFv).方法采用PCR反应从小鼠脾细胞扩增鼠免疫球蛋白的重链和轻链可变区,利用连结引物将重链和轻链DNA组装成单链抗体(ScFv)片段.结果克隆出VH,VL基因,用Linker将VH,VL连接起...
【中文期刊】 郭建巍 蔡美英 《生物医学工程学杂志》 2003年20卷2期 361-365页 MEDLINEISTICPKUCA
【摘要】 新型小分子抗体-单链可变区片段(scFv)是由一弹性接头(linker)将VH和VL连接而成,是抗体具有抗原结合部位的最小功能结构单位.以分子量小、体内半衰期短、免疫原性低、可在原核细胞系统表达、易于基因工程操作等特点而倍受关注.依据接头的...
【中文期刊】 宋林霞 俞炜源 《生物工程学报》 2000年16卷1期 82-85页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过PCR扩增和酶切分别得到抗结肠癌相关抗原抗体的重链可变区序列、轻链可变区序列及连接肽序列,将它们构建成为VH-linker-VL形式的单链抗体基因片段,并在大肠杆菌中进行了表达.SDS-PAGE分析结果表明,以pComb3为载体,在大肠...
【中文期刊】 王舰平 赵树进 等 《广东药科大学学报》 2017年33卷4期 531-535页 ISTICCA
【摘要】 目的 筛选具有较好结合能力的抗木瓜凝乳蛋白酶单链抗体(scFv),并进行可溶性表达和鉴定.方法 前期实验室构建了抗木瓜凝乳蛋白酶全套鼠源scFv噬菌体抗体文库,对抗体文库进行4轮富集后,采用ELISA筛选抗木瓜凝乳蛋白酶阳性scFv;将EL...
【中文期刊】 马巍娜 刘雪林 等 《现代检验医学杂志》 2016年31卷5期 46-49页 ISTICCA
【摘要】 目的：筛选急性淋巴细胞白血病病人单链可变区 scFv抗体，为进一步表达并得到其特异性强的抗体片段创造条件。方法实验利用初诊急性淋巴细胞性白血病病人血清为包被抗原，采用噬菌体表面展示技术，从半合成的人源噬菌体抗体库中筛选其特异性噬菌体抗体，首...
【中文期刊】 丁立 熊丽娟 等 《生物技术通讯》 2015年26卷6期 786-789页 ISTICCA
【摘要】 目的:从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗FKBP52人源单链抗体,并进一步构建其真核表达载体.方法:以FKBP52为抗原,通过吸附、扩增、洗脱等过程,从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体,采用ELISA方法进行特异性测定,采用生物膜干...
【中文期刊】 黄爱玲 冯荣虎 等 《生物技术》 2012年22卷1期 31-34页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建天然兔源噬菌体单链抗体库.方法:采用RT - PCR法从未免疫的兔子脾脏中克隆得到抗体重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)基因,重叠PCR将VH和VL拼接成scFv片段,将scFv连接到噬菌粒pComb3XSS上,电转入XL1 ...
【中文期刊】 张佳锴 程小峰 等 《中国生化药物杂志》 2012年33卷2期 97-100,105页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建、表达、纯化抗人死亡受体5(DR5)单链抗体,并检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性.方法 采用RT-PCR获取鼠源性抗人DR5单克隆抗体重链和轻链可变区基因序列,以一柔性连接肽连接二者,转入表达载体,以大肠杆菌表达融合蛋白,亲和色谱纯化...
【中文期刊】 林晓思 许健 等 《中国生化药物杂志》 2011年32卷4期 261-264页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建高表达的抗CD5单链抗体(scFv anti-CD5)工程菌,为开展以抗CD5单链抗体为构件的肿瘤免疫治疗研究奠定基础.方法:从Genbank中获得抗CD5单克隆抗体H65的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的基因序列,用连接...
【中文期刊】 韩瑜 周炳喜 等 《肿瘤研究与临床》 2011年23卷4期 230-233,246页 ISTICCA
【摘要】 目的 分离、构建和表达抗人CD133单链抗体(scFvCD133),测定其生物学活性.方法 用抗体工程技术从抗人CD133单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞中分离抗体可变区基因(VL和VH),测定DNA序列并确定抗体互补决定区(CDR);将sc...
【中文期刊】 郭喜玲 吴涛 等 《医学分子生物学杂志》 2010年07卷5期 382-387页 ISTICCA
【摘要】 目的 从分泌抗肠出血性大肠埃希菌Ⅱ型志贺毒素中和单克隆抗体杂交瘤细胞株S2C4中克隆抗体可变区基因,构建单链抗体(ScFv),进行原核表达,并对其功能进行鉴定.方法 从杂交瘤细胞株S2C4中提取总RNA,逆转录成cDNA.在cDNA3'-O...
【中文期刊】 马巍娜 刘雪林 等 《现代检验医学杂志》 2010年25卷4期 7-10页 ISTICCA
【摘要】 目的 筛选甲硝唑人源单链可变区(scFv)抗体,为研究快速检测试剂盒奠定基础.方法 采用噬菌体表面展示技术,以甲硝唑作为抗原,固相包被于Nunc板,应用半合成的人源单链可变区抗体文库技术,从噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增...
【中文期刊】 秦琴 王毅民 等 《中国中西医结合消化杂志》 2010年18卷2期 98-101页 ISTICCA
【摘要】 [目的]应用噬菌体展示技术构建人源性抗乙型肝炎(乙肝)表面抗原(HBsAg)单链抗体(ScFv)库.[方法]提取经免疫具有乙肝表面抗体的正常人淋巴细胞总RNA,采用反转录、触减PCR扩增人免疫球蛋白G(IgG)重链可变区基因(VH)和轻链可...
【中文期刊】 李晓莉 姚慧 等 《生物医学工程与临床》 2010年14卷2期 161-166,封2页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建乳腺癌患者抗Her-2/neu全人源性噬菌体单链抗体可变区(ScFv)文库,筛选抗Her-2/neu单链抗体.方法 收集40例乳腺癌患者前哨淋巴结(SLN),提取总RNA,反转录为cDNA作模板,在目前常用的引物基础上重新设计可变...
【中文期刊】 熊颖 李晓进 等 《微生物学免疫学进展》 2009年37卷4期 4-7页 ISTICCA
【摘要】 实验通过DNA重组技术从一株可中和破伤风毒素的人源单克隆抗体细胞(C6)中扩增出了抗体VH、VL的基因,通过重叠PCR使连接片段与VH、VL连接成单链ScFv.经测序证实VH、VL为抗体的可变区序列,命名为ScFv-G6.将ScFv-c6连...
【中文期刊】 刘迎春 宋军 《福建医科大学学报》 2009年43卷2期 145-147页 ISTIC
【摘要】 目的 构建库容量大、多样性好的核糖体展示单链抗体(ScFv)库,为进一步筛选ScFv奠定基础.方法 从健康自愿者的外周血淋巴细胞提取mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)DNA,进而连接形成ScFv DN...
【中文期刊】 赵泽文 史常旭 等 《华南国防医学杂志》 2009年23卷4期 73-76页 ISTIC
【摘要】 <篇首> 单链抗体(signal-chain bi-functional antibody, scFv)是一种新型的基因工程抗体(gene engineering antibody,GEAb),由抗体的重链(heavy chain, VH)可变...
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