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          【中文期刊】 邓艳  柏建山  等 《中国预防兽医学报》 2025年47卷1期 48-53,79页

          【摘要】 为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增...

          【关键词】 蛙病毒双重荧光定量PCRTaqMan探针

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          【中文期刊】 傅宇飞  李传峰  等 《中国动物传染病学报》 2025年33卷3期 75-83页

          【摘要】 根据GenBank中犬冠状病毒(CCoV)和犬细小病毒(CPV)已有基因序列设计其对应引物,通过对反应体系和扩增程序的优化,建立了CCoV和CPV双重荧光定量PCR检测方法,评估了其敏感性、特异性和重复性.结果显示,该方法最佳退火温度为60...

          【关键词】 犬冠状病毒犬细小病毒双重荧光定量PCR

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          【中文期刊】 钱佳豪  刘丹  等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷12期 5873-5879页

          【摘要】 本研究旨在建立一种可同时检测非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)和西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的双重荧光定量RT-PCR检测方法.根据AHSV VP7基因序列和WNV P...

          【关键词】 双重荧光定量RT-PCR非洲马瘟病毒西尼罗病毒

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          【中文期刊】 欧兰欣  叶碧锦  等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷10期 4630-4637页

          【摘要】 旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA(P)和tetB(P)的双重荧光定量PCR检测方法,为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略.本研究针对tetA(P)和tetB(P)的保守序列设计引物和探针,构建...

          【关键词】 产气荚膜梭菌四环素tetA(P)

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          【中文期刊】 于新友  李天芝  等 《中国兽医杂志》 2023年59卷6期 60-64页

          【摘要】 为了建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪肺炎支原体(Mhp)的双重荧光PCR检测方法,本试验根据NCBI数据库中的PRRSV ORF7和MhpP36基因,分别设计引物和TaqMan探针,通过优化扩增反应条件,建立PRRSV和...

          【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)猪肺炎支原体双重荧光PCR

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          【中文期刊】 凌娇  王权  等 《畜牧与兽医》 2018年50卷4期 93-99页

          【摘要】 建立一种基于TaqMan探针法同步定量检测副溶血弧菌和霍乱弧菌的双重荧光定量PCR方法.根据副溶血弧菌toxR基因和霍乱弧菌ompW基因设计特异性引物与TaqMan探针.toxR和ompW探针5'端分别标记FAM、CY5荧光报告基团,3'端...

          【关键词】 副溶血弧菌霍乱弧菌toxR

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          【中文期刊】 何晓杰  王科珂  等 《中国动物传染病学报》 2018年26卷3期 51-56页

          【摘要】 为快速鉴别诊断蜜蜂美洲幼虫腐臭病(American foulbrood,AFB)和欧洲幼虫腐臭病(European foulbrood,EFB),本研究根据GenBank中登录的幼虫芽孢杆菌(Paenibacillus larvae )和蜂...

          【关键词】 美洲幼虫腐臭病幼虫芽孢杆菌欧洲幼虫腐臭病

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          【中文期刊】 武昱孜  熊祺琰  等 《畜牧兽医学报》 2017年48卷8期 1491-1498页

          【摘要】 建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法.根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物,分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针,建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系...

          【关键词】 猪肺炎支原体猪鼻支原体双重荧光定量PCR

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          【中文期刊】 侯月娥  伍建敏  等 《中国动物传染病学报》 2017年25卷1期 19-25页

          【摘要】 本文通过对猪腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritisvirus,TGEV)基因组生物信息学分析,分别在两种病毒基因保...

          【关键词】 猪流行性腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR

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          【中文期刊】 王博  王慧煜  等 《中国畜牧兽医》 2017年45卷10期 3035-3041页

          【摘要】 为建立一种快速、准确地检测H1和H3亚型猪流感病毒(swine influence virus,SIV)的方法,根据H1和H3亚型SIV血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计2对特异性引物和2条TaqMan探针,建...

          【关键词】 H1和H3亚型猪流感病毒(SIV)双重实时荧光定量RT-PCRTaqMan探针

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          【中文期刊】 侯月娥  伍建敏  等 《中国预防兽医学报》 2016年38卷3期 221-225页

          【摘要】 为快速及定量的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),本研究根据GenBank中登录的PRRSV和PCV2基因组确定了其基因保守序列,分别设计其特异性探针和引物,建立了PRRSV-PCV2双重TaqMan荧光定...

          【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒Ⅱ型双重TaqMan荧光定量PCR

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          【中文期刊】 罗思思  谢芝勋  等 《中国畜牧兽医》 2016年43卷2期 326-332页

          【摘要】 根据GenBank中H6、N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因序列,设计2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针.经反应条件优化,本试验建立了检测H6N1亚型AIV的二重荧光RT-PCR方法.该法特异性强,只对H6亚...

          【关键词】 禽流感病毒H6N1亚型二重荧光RT-PCR

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          【中文期刊】 王建华  陈小金  等 《中国动物检疫》 2016年33卷10期 90-94页

          【摘要】 根据H1和H3亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)编码基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和TaqMan-MGB探针,建立了一种检测H1和H3亚型SIV的二重荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法仅对H1和H3亚型SIV呈特异性扩增,对...

          【关键词】 猪流感病毒H1亚型H3亚型

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          【中文期刊】 王建华  董志珍  等 《中国畜牧兽医》 2016年43卷2期 348-355页

          【摘要】 为建立一种快速、敏感和特异地鉴别尼帕病毒(NiV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的检测方法,本试验以NiV M基因和HP-PRRSV nsp2基因为靶序列,通过优化反应条件建立了一种二重荧光RT-PCR检测方法,并对该...

          【关键词】 尼帕病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan-MGB探针

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          【中文期刊】 马凯  白羽  等 《食品研究与开发》 2015年36卷17期 117-122页

          【摘要】 通过结合两种技术-免疫磁分离技术与双重荧光定量PCR技术,建立同时、快速对鲜猪肉进行沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的检测方法.利用偶联有特异性抗体免疫磁球,在37℃的条件下能够有效地从250 mL循环体系中边富集边捕获目标菌.利用特异性的引物与探...

          【关键词】 沙门氏菌金黄色葡萄球菌免疫磁分离

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          【中文期刊】 马凯  高丽娟  等 《食品安全质量检测学报》 2015年9期 3373-3379页

          【摘要】 目的:使用免疫磁分离-双重荧光定量PCR方法实现对鲜猪肉中金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的同时、快速检测。方法在37℃的条件下,利用特异性免疫磁球从250 mL循环体系中快速、有效地捕获目标菌。再通过特异性的引物与探针,对沙门氏菌和志贺氏菌进行双...

          【关键词】 沙门氏菌志贺氏菌免疫磁分离

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          【中文期刊】 赵文华  杨仕标  等 《中国畜牧兽医》 2014年41卷3期 65-71页

          【摘要】 为实现山羊2种疫病病原体——小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于PPRV的N基因及GTPV的ITR基因,分别设计合成2套特异性引物及探针;探针分别用5'FAM-TAMRA3'及5'JOE-Eclipse3’...

          【关键词】 小反刍兽疫病毒山羊痘病毒二联实时荧光定量RT-PCR

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          【中文期刊】 张艳芳  谢芝勋  等 《中国畜牧兽医》 2014年41卷3期 77-82页

          【摘要】 本试验旨在建立同时检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)和鸭瘟病毒(DPV)的二重荧光定量RT-PCR方法.针对GenBank中DTMUV E基因和DPV UL 6基因的保守序列,设计合成了2对引物和2条TaqMan探针.通过优化反应体系、条件及评...

          【关键词】 鸭坦布苏病毒鸭瘟病毒二重荧光定量RT-PCR

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          【中文期刊】 高瑞娟  张凯  等 《动物医学进展》 2014年10期 10-12,13页

          【摘要】 为建立一种空肠弯曲菌和沙门菌的双重实时荧光定量 PCR 检测方法,根据空肠弯曲菌的保守基因 hipO 和沙门菌的保守基因 invA 分别设计合成引物和 TaqMan 探针,分别使用 FAM、JOE 作为探针报告基团,TAMRA 作为探针淬灭...

          【关键词】 空肠弯曲菌沙门菌双重实时荧光定量 PCR

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          【中文期刊】 孔刚锐  吴志明  等 《中国畜牧兽医》 2013年40卷12期 27-33页

          【摘要】 据GenBank登录的高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly and lowly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP/LP-PRRSV...

          【关键词】 高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重实时荧光定量RT-PCRTaqMan MGB荧光探针

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          【中文期刊】 许龙岩  袁慕云  等 《食品科学》 2013年34卷18期 263-266页

          【摘要】 目的:建立同时检测副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法.方法:根据VP的toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应扩增体系,进行特异性、敏感性实验,并用建立的方法检测从广东地区和辽宁地区进...

          【关键词】 副溶血性弧菌toxR基因tdh基因

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          【中文期刊】 张艳芳  谢芝勋  等 《中国动物检疫》 2013年5期 49-53页

          【摘要】 根据GenBank中包拉米虫和派琴虫保守基因序列,用Primer Express 3.0软件设计合成了两对引物和两条TaqMan探针。对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测包拉米虫和派琴虫的二重荧光定量PCR方法。该方法对包拉米虫...

          【关键词】 包拉米虫派琴虫二重实时荧光定量PCR

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          【中文期刊】 高志强  张鹤晓  等 《中国动物检疫》 2013年4期 34-38页

          【摘要】 利用DNAMAN软件对非洲马瘟病毒不同基因型代表株的序列进行分析,选择其高度保守的VP7和NS2基因设计合成引物和探针。人工分别合成包含有扩增区域的VP7和NS2核苷酸片段进行双向(T7和SP6)体外转录制备双链RNA(dsRNA)。使用制...

          【关键词】 非洲马瘟病毒VP7和NS2双重通用荧光RT-PCR

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          【中文期刊】 岳华  李明义  等 《南京农业大学学报》 2009年32卷4期 116-121页

          【摘要】 针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因保守序列设计2对引物,建立了SYBR Green Ⅰ双重荧光RT-PCR(RRT-PCR)方法,实现了同一反应管内同时检测AIV的H5和N1亚型基因.熔解曲线分析显示,H_5和N_1扩增片...

          【关键词】 禽流感病毒H5N1亚型双重荧光RT-PCR

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          【中文期刊】 Junyi Xu  Chao Wan  等 《生物化学与生物物理学报(英文版)》 2021年53卷7期 933-942页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

          【摘要】 The transgenic glyphosate-tolerant soybean MON87712 event was developed by the agrochem-ical and agricultural biotechnol...

          【关键词】 transgenic soybeanMON87712plasmid calibrant

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          【中文期刊】 崔淑娟  毕丽芳  等 《国际病毒学杂志》 2016年23卷2期 89-91,94页ISTICPKU

          【摘要】 目的 建立一种可同时检测禽流感病毒H9N2的HA和NA基因一步法双重荧光RT-PCR方法.方法 针对H9N2禽流感病毒的HA和NA基因保守区,设计相应的特异性引物以及探针,优化检测体系及反应条件,建立一步法双重荧光定量RT-PCR方法.对该...

          【关键词】 禽流感病毒H9N2双重荧光RT-PCR

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          【中文期刊】 赵晓美  赵贵明  等 《卫生研究》 2016年45卷2期 255-259页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的 建立一种快速检测豆类及其制品中肠出血性大肠杆菌O157、O104的双重real-time PCR方法.方法 分别选取大肠杆菌O157的特异性基因rfbE和大肠杆菌O104的特异性基因wzy作为靶基因,设计相应的特异性引物探针,建立双重...

          【关键词】 双重real-time PCR大肠杆菌O157大肠杆菌O104

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          【中文期刊】 毛晓露  卢忠心  等 《中华医院感染学杂志》 2013年23卷19期 4847-4849页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的 建立检测烟曲霉菌和黑曲霉菌的双重荧光定量聚合酶链反应方法,探讨其临床应用价值,为快速准确地鉴定侵袭性曲霉菌寻求新的检测技术.方法 设计可扩增烟曲霉菌和黑曲霉菌18s RNA引物和探针,建立双重荧光定量聚合酶链反应体系并进行方法学评价;...

          【关键词】 双重荧光定量聚合酶链反应烟曲霉菌黑曲霉菌

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          【中文期刊】 徐伟  李素芳  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2008年28卷10期 946-950页ISTICPKUCSCDCABP

          【摘要】 目的 建立一种快速、特异、灵敏、准确定量的单核细胞增生(单增)李斯特菌(Listeriamonocytogenes)与志贺菌(Shigella)同步检测方法.方法 分别根据单增李斯特菌溶血素O基因hly与志贺菌侵袭性质粒抗原H基因ipaH设...

          【关键词】 双重荧光定量PCR单核细胞增生李斯特菌志贺菌

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          【中文期刊】 张濛  邱正勇  等 《中国卫生检验杂志》 2017年27卷6期 802-803,807页ISTIC

          【摘要】 目的 建立同时检测G Ⅰ和G Ⅱ型诺如病毒的双重实时荧光定量PCR方法,并在临床检验中得到应用.方法 本研究采用了双重实时荧光定量PCR法,对诺如病毒G Ⅰ型病毒的特异性Taqman探针的5'端标记了FAM和对诺如病毒G Ⅱ型病毒的特异性T...

          【关键词】 诺如病毒双重实时荧光定量PCR临床

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          【中文期刊】 高世光  李莉  等 《中国卫生检验杂志》 2016年26卷9期 1244-1246页ISTIC

          【摘要】 目的 建立同时检测副溶血性弧菌毒力基因tdh和trh的双重荧光PCR方法.方法 筛选副溶血性弧菌tdh和trh毒力基因的特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR扩增体系,进行特异性、灵敏度实验,并对本实验室保存的54株副溶血...

          【关键词】 副溶血性弧菌tdh基因trh基因

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          【中文期刊】 杨秀娟  张文玲  等 《中国国境卫生检疫杂志》 2015年38卷1期 6-12页ISTICCA

          【摘要】 目的 采用荧光定量PCR技术,建立可以同步检测李斯特菌属与单增李斯特菌的快速检测方法.方法 选取单增李斯特菌hlyM基因和李斯特菌属23SrDNA基因为靶基因,分别设计引物和探针,在构建二者的阳性重组质粒基础上,对李斯特菌属和单增李斯特菌进...

          【关键词】 单增李斯特菌李斯特菌双重荧光PCR

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          【中文期刊】 赵斌  王忠惠  等 《中国地方病防治杂志》 2015年30卷6期 484-486页ISTICCA

          【摘要】 目的 利用二重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确和特异的鉴别鼠疫菌的方法.方法 设计和优化两套引物和相应的Taqman探针.靶基因包括染色体上的YPO2088基因和毒力质粒pMT1上的caf1基因.结果 实验结果表明,该二重定量PCR是...

          【关键词】 鼠疫菌实时荧光定量PCR二重

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          【中文期刊】 袁慕云  许龙岩  等 《现代食品科技》 2017年33卷1期 248-252页

          【摘要】 建立基于TaqMan探针双重重实时荧光PCR检测肠道沙门氏菌(Salmonella enterica,SP)和肠炎沙门氏菌(SalmonellaEnteritidis,SE)的方法.根据SP的aceA基因(GenBank:U43344.1)...

          【关键词】 肠道沙门氏菌肠炎沙门氏菌TaqMan探针

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