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【中文期刊】 卫田田 于颖 等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷4期 1-8页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 LYC5是一种c型人溶菌酶蛋白.根据毕赤酵母密码子的偏爱性,对LYC5的mRNA编码序列进行优化设计,将优化后的基因序列克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,构建重组酵母表达质粒pPIC9 K-LYC5.重组质粒经线性化处理后转化毕赤...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 明飞平 杨军 等 《中国生物工程杂志》 2013年33卷12期 86-91页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:在毕赤酵母SMD1168中高效表达抗菌肽PR39,并检测其抗菌活性.方法:根据毕赤酵母密码子偏爱性,人工合成4条寡核苷酸片段,通过重叠PCR获得PR39核苷酸序列,将其插入酵母表达载体pPIC9K,重组表达质粒pPIC9K-PR39经...
【关键词】 抗菌肽；PR39,pPIC9K；5'UTR；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王巍 张立 等 《四川大学学报（医学版）》 2013年44卷3期 333-336页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建大鼠促衰变因子(DAF)的酵母真核表达载体,诱导其表达并对生物学特性进行鉴定.方法 采用RT-PCR技术从大鼠肝脏组织中扩增出DAF基因并克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K质粒中.经酶切鉴定后,将pPIC9K-DAF转化至毕赤酵母...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张树军 赵臣 等 《生物技术通报》 2013年10期 148-152页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能.PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuriti...
【关键词】 Neuritin pPIC9k；毕赤酵母表达系统；PC12细胞；
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 白凤霞 娄世峰 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷1期 106-108页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建大肠杆菌·毕赤酵母表达载体Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL.方法:用PCR的方法扩增所需要的目的片段IL3及PE38KDEL,再通过酶切和连接的方法定向克隆到载体Ppic9k-Linker中,得到融合基因Ppi...
- 概要：
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【中文期刊】 邵明龙 赵宏鑫 等 《吉林大学学报（医学版）》 2010年36卷4期 644-650,封2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:以毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115和SMD1168为宿主菌表达人源成纤维细胞生长因子21(hFGF21),为开发治疗糖尿病药物提供一定的实验基础.方法:根据毕赤酵母基因偏爱密码子和hFGF21氨基酸序列,设计多条...
【关键词】 人成纤维生长因子21；毕赤酵母；pPIC9K；
- 概要：
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- 结论：
【学位论文】 作者：徐立群 导师：陈光 吉林农业大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2013年
【摘要】 胶原蛋白是结缔组织中极其重要的结构蛋白质,对维护细胞、组织及器官的正常生理功能有着重要作用.胶原蛋白被广泛的应用于医学材料及药物方面、美容化妆品、保健品以及各种实用工业中.目前胶原蛋白家族大约有28个成员.其中,Ⅵ型胶原蛋白是细胞外基质蛋白...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：陈晓丽 导师：潘善培 暨南大学 生物学 发育生物学（硕士） 2001年
【摘要】 为用基因重组技术表达β hCG避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒β hCG-pPIC9K,转化嗜甲醇酵母并进行表达实验研究.根据β hCG的cDNA序列设计两条引物,使上游带EcoR I酶切位点,下游带Not I酶切位点,以质粒β...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 余果宇 张红芸 等 《动物学研究》 2010年31卷6期 565-569页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性.该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOXl启动了和α-因子信号肽序列的表达载体pP...
- 概要：
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【中文期刊】 刘奔 钟民涛 等 《中国微生态学杂志》 2012年24卷2期 126-131页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过构建毕赤酵母表达载体将香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中进行表达,同时对表达产物进行鉴定.方法 从香菇菌C91-3菌丝体中提取总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full ...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 王慧 窦文芳 等 《生物工程学报》 2011年27卷7期 983-989页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为实现人胰高血糖素样肽-1-人血清白蛋白融合蛋白((GLP-1A2G)2-HSA,简称GGH)的规模化制备,通过pPICZαB与pPIC9K双质粒共表达体系提高融合蛋白GGH在毕赤酵母中的表达量.首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH的基因...
- 概要：
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【中文期刊】 张云华 杨秀芬 等 《生物工程学报》 2011年27卷11期 1631-1636页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了实现激发子PebC1编码基因在毕赤酵母中的分泌表达,采用PCR方法从灰葡萄孢菌BC-4-2-2-1菌株中扩增获得激发子PebC1的编码序列,将其亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K中,以此片段构建了pPIC9K-pebC1重组表达质粒...
- 概要：
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【中文期刊】 蒋慧慧 李丰功 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷5期 60-68页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子功能的强弱对于目的基因的表达非常重要.为找到一个启动转录功能较好的启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,在毕赤酵母中研究不同启动子对外源蛋白表达的影响.首先采用PCR扩增的方法克隆了酿酒酵母甘...
【关键词】 3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子；pAOX1；pGAP；
- 概要：
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【中文期刊】 蔡建飘 钱菲 等 《中华预防医学杂志》 2010年44卷8期 721-725页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用毕赤酵母真核系统表达Ⅰ～Ⅳ型登革病毒E蛋白Ⅲ区(DENV-1～4EDⅢ),获得可分泌表达的重组蛋白ED Ⅲ.方法 PCR分别扩增Ⅰ～Ⅳ型DENV EDⅢ区基因,构建至pPIC9K毕赤酵母表达质粒.酶切线性化后电转化毕赤酵母菌GS1...
- 概要：
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【中文期刊】 李俏俏 王清路 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷1期 35-40页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用加长引物5,端的方法克隆了hGM-CSF的编码基因,克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化.然后克隆进毕赤酵母分泌型表达栽体pPIC9K,电击转化毕赤酵母.PCR、SDS-PAGE与Western blotting证实hGM-CSF已整...
【关键词】 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因；子毕赤酵母；引物5'端加长法；
- 概要：
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【中文期刊】 李洋 李晖 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷4期 54-59页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子.经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到...
- 概要：
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【中文期刊】 张正平 杨江科 等 《微生物学报》 2010年50卷2期 228-235页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]克隆扩展青霉脂肪酶基因,实现具强催化活性的脂肪酶的异源高效表达.[方法]利用RT-PCR扩增扩展青霉CICC 40356脂肪酶(PEL)cDNA序列,利用重叠延伸PCR(Over-lap extension PCR)技术对PEL的1...
- 概要：
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【中文期刊】 李小波 王婷婷 等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2010年28卷5期 332-336页MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 构建家蝇抗菌肽(攻击素, attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达.方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPI...
- 概要：
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【中文期刊】 王金芳 刘光英 等 《微生物学报》 2010年50卷4期 493-499页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]为揭示昆虫病原真菌分泌的几丁质酶对宿主感染致病时的作用,对莱氏野村菌Cq菌株几丁质酶基因进行了克隆与表达,并检测了表达产物的活性.[方法]采用CTAB法提取菌体DNA,设计特异性引物,多次PCR扩增克隆莱氏野村菌Cq菌株几丁质酶基因...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李栋 俞慧清 等 《生物工程学报》 2009年25卷11期 1711-1717页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了获得有活性的重组人白细胞介素21(rhIL-21),本研究建立了在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达rhIL-21的技术.首先,通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增IL-21cDNA,克隆到酵母表达载体pPIC9K...
- 概要：
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【中文期刊】 刘玲玲 朱松 等 《微生物学报》 2009年49卷5期 597-602页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]β-葡萄糖苷酶可用于酶法生产龙胆低聚糖.为了给龙胆低聚糖的生产提供大量的酶来源,构建基因工程菌表达黑曲霉(CMI CC 324626)β-葡萄糖苷酶基因(bgl)并研究重组酶生产龙胆低聚糖的工艺条件.[方法]将bgl克隆到表达载体p...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 张佳瑜 吴丹 等 《生物工程学报》 2009年25卷12期 1948-1954页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过PCR扩增软化芽孢杆菌α-CGT酶基因,将基因片段分别克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K和大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pMA5中,分别转化毕赤酵母KM71和枯草杆菌WB600.结果表明,重组毕赤酵母发酵上清液中α-CGT酶活性仅0.2 U...
- 概要：
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【中文期刊】 李巍 李秀锦 等 《生物工程学报》 2009年25卷10期 1470-1476页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为制备重组狐狸生长激素(fGH),采用RT-PCR方法,从银狐垂体中扩增fOH cDNA基因,利用SnaB Ⅰ和Not Ⅰ位点将fGH基因插入到酵母分泌型表达载体pPIC9K中α-因子信号肽的下游,构建成fGH基因的酵母分泌型表达载体pPI...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘延锋 曾洪梅 等 《生物工程学报》 2009年25卷3期 413-417页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 建立了在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达PeaT1蛋白的技术.将来源于极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)的基因peaT1亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K,构建了重组表达载体pPIC9K-pe...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王崧 王军平 等 《第三军医大学学报》 2008年30卷21期 2037-2040页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 实现TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP-GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达.方法 以含有rTMP-GH...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 高金湖 唐存多 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷3期 297-301页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLY)-木聚糖酶(Xylanases,Xyn Ⅱ)融合基因.方法 通过PCR技术将hLY基因与Xyn Ⅱ基因连接,中间插人肠激酶识别位点序列;将其克隆至载体pPIC9K上,构建...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 常冰梅 刘晓军 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷8期 903-906,910页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中分泌表达人肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF),并检测其活性.方法 从真核表达质粒pRC / CMV-HGF中扩增HGF的编码基因,将其克隆人表达载体pPIC9K,构建重组表达质粒pP...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 程旭 徐伟杰 等 《国际生物医学工程杂志》 2011年34卷3期 135-139页ISTICCA
【摘要】 目的 构建高拷贝表达重组人组织因子途径抑制因子的毕赤酵母并对蛋白表达条件进行初步优化,为相关研究奠定基础.方法 将PCR扩增得到的TFPI cDNA片段与表达质粒pPIC9K连接构建重组质粒rhTFPI-pPIC9K,采用PCR方法及DNA...
【关键词】 组织因子途径抑制因子；毕赤酵母；表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李鹏飞 李明 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷4期 369-372页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 克隆猪干扰素α(IFNα)基因,并在毕赤酵母中进行表达.方法 用植物血凝素诱导猪外周血中的淋巴细胞,Trizol试剂提取总RNA,经RT-PCR扩增猪IFNα基因,将其克隆至pPIC9K载体中,构建重组真核表达质粒pPIC9K-IFN...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 谭中标 邬敏辰 等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷11期 1185-1189页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达圆弧青霉碱性脂肪酶(Alkaline lipase,Lip I).方法 采用RT-PCR法从圆弧青霉PG37中扩增lip Ⅰ基因的cDNA片段,克隆入表达质粒pPIC9K中,构建重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周小玲 李子龙 等 《现代生物医学进展》 2009年9卷18期 3427-3428,封3页ISTICCA
【摘要】 目的:实现HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母.方法:分别将乙肝病毒前S1蛋白和绿色荧光蛋白克隆到表达载体pPIC9K,获得重组质粒pPIC9K-EGFP-preS1,Sac1位点酶切线性化,采用醋酸锂(LiAc)和二...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴蒙 刘宇鸽 等 《中国公共卫生》 2011年27卷1期 37-39页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆和表达H5N1型流感病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因,为制备抗体和亚单位疫苗打基础.方法 采用PCR技术扩增H5N1型流感病毒H5A和N1A基因,克隆人含有醇氧化酶-1(AOX1)启动子和分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵...
- 概要：
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【中文期刊】 李壮林 姚雪静 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷1期 24-28页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 人血管抑素包含了4个环饼状结构域(Kringle),是一个有效的血管生成抑制因子.采用PCR方法从人胚肝cDNA文库中扩增了人血管抑素Kringles 1-3的基因,重组于pPIC9K载体中,获得重组载体pPIC9K-K1-3,然后转化毕赤...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李春丽 韩露 等 《生物工程学报》 2011年27卷8期 1158-1163页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照酵母密码子的偏好优化其编码序列,合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接、PCR扩增后得到了179 bp的des-pGlu1-Brazzein编码序列,插入到pP...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 强慧妮 杨欣伟 等 《生物工程学报》 2009年25卷12期 1962-1968页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用RT-PCR技术从黑曲霉(EIM-6)中扩增得到去除信号肽的果胶裂解酶基因A,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,构建重组表达质粒pPIC9K-pelA,电击转化毕赤酵母GS115,得到了表达成功的工程菌株.用终浓度为1.5%的甲...
- 概要：
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【中文期刊】 刘海英 王娟 等 《微生物学通报》 2009年36卷3期 355-359页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 一株纤维素酶高产菌株经ITS序列鉴定并命名为长梗木霉SSL(Trichoderma longi-brachiatum,SSL).利用RT-PCR的方法从该菌株中克隆出内切-1-4-β-D-葡聚糖酶Ⅰ的基因(eg1),该基因全长1386 bp...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王书全 李明 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷2期 173-175,178页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)(ADM),并检测其抗菌活性.方法 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子,合成杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)...
- 概要：
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【会议论文】刘建巨 第九届全国中西医结合眼科学术交流会暨第八次东北亚国际眼科学术会 2010年
【摘要】 <正>目的利用毕赤酵母表达系统表达、纯化人血管抑制因子vasostatin,并观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性.方法采用PCR技术扩增出人血管抑制因子vasostatin的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转
- 概要：
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【会议论文】屈霄霄 重庆市生物化学与分子生物学学术会议 2009年
【摘要】 <正>从番茄叶中扩增到TomloxD全长基因,该片段包含1个2727 bp的开放阅读框,编码一条由909个氨基酸组成的多肽链.将TomloxD基因构建到酵母分泌表达载体pPIC9K上,电转化入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)...
【关键词】 TomloxD基因 ；
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【会议论文】邵金辉 山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会 2006年
【摘要】 目的克隆与表达辣根过氧化物酶同功酶C3基因.方法用PCR方法从辣根的总DNA中,扩增得到一种辣根过氧化物酶同功酶C基因HRPC3,将PCR产物连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,再将目的基因正确插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9...
- 概要：
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【会议论文】栗茂腾 湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会 2006年
【摘要】 γ亚麻酸和花生四烯酸是人体的必需脂肪酸,都具有独特的生物活性.△6脂肪酸脱饱和酶基因使亚油酸转化为γ亚麻酸,而Δ5脱饱和酶则以γ-亚麻酸为底物,催化其第5位碳脱氢形成花生四烯酸.油菜是我国主要油料作物之一,由于油菜中没有Δ6和Δ5脱饱和酶,...
- 概要：
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【会议论文】汪峻 湖北省生物工程学会2004年年会 2004年
【摘要】 本研究以野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因作为改造对象,应用DNA Shuffling技术, 期望获得其酶活性大幅度提高的α-淀粉酶基因.同时,构建α-淀粉酶基因的大肠杆菌分泌表达筛选体系.最后,采用巴氏毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K,实现DN...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【会议论文】伍洛夫 湖北省生物工程学会2004年年会 2004年
【摘要】 从黑曲霉(Aspergillus niger)液体培养物中提取总DNA,根据Hartingsveldt 已发表的Aspergillus niger NRRL3135的植酸酶基因phyA序列设计一对引物,以 A.niger的总DNA为模板通过...
- 概要：
- 方法：
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【会议论文】甘凤琼 广西生物化学与分子生物学会第六次学术研讨会 2003年
【摘要】 用化学合成的方法合成INUA、INU了、INUC三个先导DNA片段,经BamHI和EocR 酶切后,与同样双酶切处理的质粒pPIC3.5K重组构建得到一套具有INU先导序列的新型分泌型毕赤酵母表达系统即pPICINUA,pPICINUB,p...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【会议论文】周倩 第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会 2003年
【摘要】 商陆抗病毒蛋白(PAP)是存在于美洲商陆叶片中的一种单链碱性蛋白,分子量为29 kD~([1,2]),能抑制多种病毒侵染.2001年本实验室通过RT-PCR扩增出缺失了N端信号肽编码序列和对细胞生长有害序列的突变型PAP基因,将其克隆到表达...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【会议论文】周兴 广西微生物学会2003年学术年会 2003年
【摘要】 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸残基的金属结合蛋白.典型的金属硫蛋白由61个氨基酸残基组成,分子量约7000道尔顿;其中含有20个半胱氨酸,6-8个赖氨酸,7-10个丝氨酸和一个乙酰化的甲硫氨酸...
- 概要：
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