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【中文期刊】 谢恒月 唐鹰 等 《遗传学报》 2000年27卷4期 369-376页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 构建了一个含酿酒酵母PRO3基因的分泌型表达载体pCBy310,在pCBy310上插入ρHCG(人绒毛膜促性腺激素ρ亚基)-cDNA以形成一个重组质粒pCBy314.利用酿酒酵母脯氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性,即它们不能在丰富培基中生长,...
【关键词】 用丰富培基作为选择压力;稳定遗传的分泌型载体;Pro+转化子;
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【中文期刊】 郭敏 雷清 等 《中国新药杂志》 2015年24卷3期 271-275,302页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:将胞内表达载体pAO815改建成分泌型表达载体,并体外构建戊型肝炎病毒ORF2128-660多拷贝重组表达质粒,进一步比较不同转化子在毕赤酵母中的表达水平,以得到高表达重组菌株.方法:利用重叠PCR技术将α-factor信号肽基因与目...
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【中文期刊】 韩建军 胡三元 等 《山东大学学报(医学版)》 2010年48卷3期 78-82页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建白介素24(IL-24)与内皮抑素(ES)的真核双基因表达栽体,检测它们在体外的表达.方法 从外周血和人胎肝组织中经RT-PCR分别扩增IL-24与ES cDNA序列,并将其定向克隆至真核双基因表达质粒pIRES中,重组质粒pIR...
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【中文期刊】 韩建军 胡三元 等 《山东大学学报(医学版)》 2010年48卷3期 78-82页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建白介素24(IL-24)与内皮抑素(ES)的真核双基因表达栽体,检测它们在体外的表达.方法 从外周血和人胎肝组织中经RT-PCR分别扩增IL-24与ES cDNA序列,并将其定向克隆至真核双基因表达质粒pIRES中,重组质粒pIR...
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【中文期刊】 王敏 罗琴芳 等 《中国比较医学杂志》 2008年18卷7期 16-19页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target, ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白.方法 设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37...
【关键词】 结核分枝杆菌;早期分泌性抗原靶ESAT-6;载体构建;
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【中文期刊】 宋琳 张志谦 《中国生物工程杂志》 2007年27卷5期 1-5页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了便于收集和纯化, 重组蛋白常需要引导至真核细胞外.蛋白能否分泌主要取决于其是否含有信号肽, 由于不同信号肽诱导蛋白分泌的效率不同,高效信号肽的筛选已成为生物工程领域提高重组蛋白产量的重要策略之一.为了筛选诱导MMP-2 C末端PEX在C...
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【中文期刊】 张超 刘刚 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷1期 52-58页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从毕赤酵母表达载体pPICZαA出发,构建了可直接克隆PCR产物的毕赤酵母分泌型表达载体(毕赤酵母表达型T载体),并通过表达重组纤维二糖水解酶Ⅱ对该载体进行了检验.设计合适的引物扩增一DNA片段,使该片段的上游含XhoⅠ和Eam1105Ⅰ酶...
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【中文期刊】 李瑞芳 张添元 等 《微生物学报》 2006年46卷5期 714-719页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用大肠杆菌质粒pSP72和枯草杆菌质粒pUB18共整合得到双功能克隆载体pSB.在pSB多克隆位点依次引入枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因启动子-信号肽序列sacB p.s.、地衣芽孢杆菌淀粉酶基因终止子序列α-amy T和短小芽孢杆菌增强子基因...
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【中文期刊】 杨湘越 兰小鹏 等 《实用医学杂志》 2006年22卷22期 2575-2577页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建表达人干燥综合征抗原A(SSA)的毕赤酵母分泌型表达载体.方法:以人白血病淋巴细胞HL-60株cDNA为模板,RCR扩增目的基因SSA,纯化,双酶切,DNA浓缩回收,插入酵母分泌型表达载体pPIC9k,热冲击法转化感受态大肠杆菌J...
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【中文期刊】 王强 喻富根 《西北植物学报》 2005年25卷7期 1377-1382页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了探索利用植物分泌特性来表达重组蛋白的可行性,先构建了含钙网蛋白信号肽的植物双元载体pBIcal,再向该载体中插入霍乱毒素B亚单位编码基因,最后得到表达载体pBIcal-ctb.通过根癌农杆菌介导,该表达载体转化烟草,在卡那霉素抗性培养基...
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