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            【中文期刊】 尹舒贤  赵月华  等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷7期 88-96页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:外源RNA导入细胞特异性上调或下调基因表达,目前外源RNA的制备方法主要有化学合成、体外转录、细胞提取.Alu DNA和Alu RNA是人基因组和转录组中最重要的成分,参与基因表达调节.建立工程菌制备基因工程人源Alu RNA (Al...

            【关键词】 基因工程RNAAlu RNAIPTG诱导

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            【中文期刊】 申永铭  郭成瑾  等 《菌物学报》 2017年36卷10期 1383-1391页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 立枯丝核菌Rhizoctonia solani融合群3(anastomosis group 3,AG3)是引发马铃薯黑痣病的主要病原菌,严重威胁着马铃薯产业的发展.菌核是马铃薯黑痣病菌在土壤中的主要存活结构,是马铃薯黑痣病的初侵染源,其密度...

            【关键词】 实时定量PCR水筛法马铃薯黑痣病

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            【中文期刊】 程丽华  刘玉  等 《中华血液学杂志》 2017年38卷5期 427-431页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 应用CRISPR-Cas9基因编辑技术来实现同一染色体片段上的多个基因共缺失.方法 利用分子克隆技术构建能使小鼠染色体11B3上Aloxe3-Alox 12b-Alox8基因簇缺失的CRISPR-Cas9慢病毒质粒;通过转染HEK29...

            【关键词】 CRISPR-Cas9基因编辑染色体大片段缺失

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            【中文期刊】 徐秀章  Sentot Santoso  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2016年36卷6期 458-462页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的:通过TA克隆和细胞转染技术建立稳定表达人CD36的转染细胞,并应用于CD36抗体检测。方法提取人血小板总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增获得人血小板的CD36基因片段;TA克隆后转化TOP10 E. coli,蓝白斑筛选获得阳性...

            【关键词】 CD36HEK293T细胞TA克隆技术

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            【中文期刊】 张雪  陈萍  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷4期 690-693页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:对木糖氧化产碱菌中亚硝酸盐还原酶基因(nir)进行克隆并表达,并测定酶的活力,探讨亚硝酸盐还原酶(NiR)对亚硝酸盐的降解特性.方法:提取木糖氧化产碱菌DNA,根据GenBank公布的nir基因序列设计引物,利用PCR技术扩增nir基...

            【关键词】 亚硝酸盐还原酶克隆基因表达

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            【中文期刊】 宋丽华  齐力  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷4期 759-762,后插4页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达.方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP) gfp基因;利用引物GFP-R和Hath...

            【关键词】 Hath1基因gfp基因真核表达

            OA
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            【中文期刊】 张红艳  王春玉  等 《吉林大学学报(医学版)》 2012年38卷2期 202-206页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建pcDNA3.lmyc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达.方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚...

            【关键词】 Smad蛋白免疫印记融合蛋白

            OA
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            【中文期刊】 李波清  张玉梅  等 《中国公共卫生》 2012年28卷3期 331-332页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法 提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定...

            【关键词】 幽门螺杆菌热休克蛋白60GroEL

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            【中文期刊】 沈涛  梁峰  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷2期 141-143页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中.进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定...

            【关键词】 hCAPWestern blot绿色荧光蛋白

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            【中文期刊】 张文帅  温恬  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷1期 91-93页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建禽流感病毒(H5N1)血凝素蛋白HA真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞).方法:从江苏H5N1流感病毒毒株(A/Jiangsu/07-4(H5N1))提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增HA全长基因,将其克隆至pM...

            【关键词】 禽流感病毒H5N1HA

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