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            【中文期刊】 刘鑫  良雪  等 《实用医学杂志》 2016年32卷16期 2621-2624页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:BCR-ABL SH3结构域双位点突变体构建,探讨其促进CML细胞株凋亡机制,为CML治疗奠定基础。方法:采用重叠延伸PCR 扩增双突变体,构建含ABL SH3双突变基因的重组腺病毒载体,流式细胞术分析突变体对KCL22细胞凋亡的影响...

            【关键词】 BCR-ABL融合蛋白重叠延伸PCRKCL22细胞

            浏览:173 被引:2 下载:20
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            【中文期刊】 郭敏  雷清  等 《中国新药杂志》 2015年24卷3期 271-275,302页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:将胞内表达载体pAO815改建成分泌型表达载体,并体外构建戊型肝炎病毒ORF2128-660多拷贝重组表达质粒,进一步比较不同转化子在毕赤酵母中的表达水平,以得到高表达重组菌株.方法:利用重叠PCR技术将α-factor信号肽基因与目...

            【关键词】 戊型肝炎病毒重叠PCR多拷贝表达盒

            浏览:32 被引:1 下载:0
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            【中文期刊】 曹文萍  苑海刚  等 《眼科新进展》 2015年35卷6期 525-528页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础.方法 应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转...

            【关键词】 TGFBI重叠延伸PCR人角膜上皮细胞

            浏览:156 被引:1 下载:12
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            【中文期刊】 曹文萍  苑海刚  等 《眼科新进展》 2015年35卷6期 525-528页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础.方法 应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转...

            【关键词】 TGFBI重叠延伸PCR人角膜上皮细胞

            浏览:144 被引:0 下载:4
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            【中文期刊】 田平雅  吕苗苗  等 《黑龙江农业科学》 2021年1期 5-10页

            【摘要】 在功能基因组学时代,对基因的功能研究将涉及到大量的载体构建,为建立一种链霉菌外源基因多拷贝表达的载体构建方法,本研究采用重叠延伸PCR与双酶切结合的连接方法,构建链霉菌表达载体,以红霉素工业生产菌红色糖多孢菌(Saccharopolyspo...

            【关键词】 重叠延伸PCRpSET152载体酶切

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            【中文期刊】 鲁战胜  郭丽丽  等 《中国肺癌杂志》 2014年3期 183-188页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 背景与目的已有的研究证明nm23-H1基因是一个重要的肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的生化机理尚不完全清楚。Nm23-H1基因结构和功能异常与肿瘤的侵袭转移有密切关系。我们前期已构建了nm23-H1的短发夹RNA(short hairp...

            【关键词】 Nm23-H1重叠延伸PCR定点突变

            浏览:149 被引:3 下载:28
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            【中文期刊】 郑雨桐  闫美田  等 《临床检验杂志》 2020年38卷12期 881-885页ISTICCA

            【摘要】 目的 采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的 基因片段进行融合,同时对2种方法 进行比较.方法 采用一步法及两步法融合基因技术,对5种立克次体融合基因进行构建,并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量...

            【关键词】 重叠延伸PCR技术融合基因一步法

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            【中文期刊】 陈尚良  刘正婷  等 《检验医学与临床》 2020年17卷12期 1659-1661,1665页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建3种常见的CD36基因突变质粒,为建立高分辨率熔解曲线方法 提供突变标准品.方法 选取广州人群常见的CD36基因突变位点A1237C、C268T及329-330delAC作为研究位点,采用重叠延伸PCR方法 及TA克隆技术构建含有...

            【关键词】 CD36基因基因突变重叠延伸PCR

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            【中文期刊】 赵志英  朱宏谦  等 《中国药理学通报》 2013年29卷5期 733-736页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 构建Kir2.1/ Kir2.3通道嵌合体,为进一步研究Kir2.1和Kir2.3通道的调控机制打下基础.方法 利用重叠延伸PCR方法构建不同的Kir2.1/ Kir2.3嵌合体质粒:N1P3C3,N3P1C1,N3P3C1,N1P1...

            【关键词】 Kir2.3Kir2.1钾通道

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            【中文期刊】 赵秀芹  夏强  等 《中国人兽共患病学报》 2012年28卷12期 1167-1172页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 利用pJV53质粒编码的分枝杆菌重组工程系统将串取亲和纯化(TAP)标签敲入耻垢分枝杆菌基因组.方法 从质粒pBS1479中扩增出tap片段,从质粒pSMT3中扩增hyg片段,从耻垢分枝杆菌基因组中分别扩增出aasf基因及其5'端非编...

            【关键词】 重组工程系统串联亲和纯化标签敲入片段

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