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【中文期刊】 李明明 陈献忠 等 《生物工程学报》 2013年29卷1期 56-67页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用代谢工程手段理性改造野生大肠杆菌的莽草酸(Shikimic acid,SA)合成途径及相关代谢节点,以构建高产莽草酸的工程菌株.根据细胞代谢网络分析,利用Red-Xer重组系统连续删除了野生型大肠杆菌CICIMB0013的莽草酸激酶基因...
【关键词】 大肠杆菌;Red-Xer重组系统;基因删除;
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【中文期刊】 张丹凤 陈国平 等 《生物技术通报》 2013年5期 160-164页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在利用Red重组系统和Xer重组系统获得大肠杆菌NmpC外膜蛋白基因删除菌株.采用PCR扩增nmpC基因片段,构建pMD-nmpC载体,EcoR Ⅰ酶切并经Pfu补平酶切缺口后与difGm片段连接,得到重组质粒T-nmpC::difGm,...
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【中文期刊】 佟新伟 杨泓喆 等 《生物技术通报》 2013年4期 123-128页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌sdaA、sdaB和pgpB基因,阻断大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成途径中的底物L-丝氨酸和磷酸乙醇酸的部分分解代谢,以达到提高磷脂酰丝氨酸在菌体内含量的目的.将出发菌株和重组菌株进行摇瓶发酵,发酵1 000mi...
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【中文期刊】 原志伟 朱晓芳 等 《微生物学通报》 2010年37卷1期 48-54页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基于大肠杆菌(E.coli)染色体上asd基因的已知序列,利用λ噬菌体的Red同源重组系统一步法构建E.coli DH5α的asd基因缺失突变株DH5α △asd::cat,在二次重组中利用携带能够表达FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20...
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【中文期刊】 于慧敏 马玉超 《生物工程学报》 2010年26卷9期 1199-1208页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因敲除技术是一项重要的分子生物学技术,在工业微生物代谢工程中具有广泛应用.以下从基因敲除技术 的遗传重组原理出发,总结了基因敲除策略的类型、特征和应用,重点介绍了采用线性双链DNA 的λ Red 同源重组系 统、使用环状质粒载体介导的单交...
- 概要:
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【中文期刊】 姜娜 王艳春 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷3期 85-89页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基于温敏型质粒而不用线性DNA的方法用于快速敲除沙门氏菌染色体上的目的基因.以伤寒沙门氏茵S.ty2基因组为模板扩增得到的ssaV基因的上下游同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段连接到温敏型质粒pHY304,共同构建同源重组载...
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【中文期刊】 周军智 邹永康 等 《微生物学通报》 2010年37卷8期 1146-1152页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)ptsHIcrr操纵子,考察敲除菌株生长特性并将其与ptsG敲除菌进行比较.利用I-Sce Ⅰ特异性切割和Red同源重组方法成功构建了大肠杆菌DH5αΔXptsHIcrr敲除菌...
【关键词】 Red同源重组;PTS系统;ptsHIcrr操纵子;
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【中文期刊】 张晓楠 黄勇 等 《现代生物医学进展》 2008年8卷10期 1809-1812页ISTICCA
【摘要】 目的:构建在哺乳动物细胞核中同时定位表达Red系统三种蛋白的载体.方法:通过给red基因(gam、bet和exo)的3,端分别加入由7个氨基(pro-lys-lys-lys-Arg-Lys-val)组成的核定位信号序列(nuclear lo...
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【会议论文】董方 2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周 2013年
【摘要】 鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)是一种肠道致病菌,可感染动物和人,并通过多种途径来逃避人体抗感染防御系统,在人体内存活并造成持续感染,可引起食物中毒,胃肠炎等肠道传染病,近些年来应用PCR一步失活技术结合λ-R...
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【会议论文】贾玉艳 全国首届动物生物技术学术研讨会 2004年
【摘要】 对细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)的修饰是研究基因在体内和体外表达和功能的一个有用的方法.以往技术的局限是对BAC的修饰需要多步的克隆把目的序列插入到穿梭载体上.本研究用Red系统将带...
【关键词】 Red重组系统 ;
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