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【中文期刊】 陈其军 安瑞  等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷10期 951-954页 SCIISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 与Gateway技术兼容的农杆菌双元载体系统已开始应用于植物功能基因组的研究,但应用这些载体系统的一个瓶颈问题,是如何简单、经济和高效地将PCR产物或其他来源的目的DNA片段构建到入门载体上获得入门克隆.为此,将传统的TA克隆技术与Gate...

【关键词】 Gateway克隆技术； TA克隆技术； 入门载体；

【中文期刊】 余旭平 朱军莉  等 《遗传学报》 2003年30卷8期 730-736页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

【摘要】 自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),以作为最终构建的载体克隆到带跨膜信号基因片段的报告基因.所设计的上游引物中依次带有分别处于3个不同阅读框架、且形成匹配粘性末端的3个酶切位...

【关键词】 细菌； 跨膜蛋白编码基因； 信号肽；

【中文期刊】 俞露 李强  等 《中国实验血液学杂志》 2018年26卷3期 647-652页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:通过克隆环状RNA hsa_circ 0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础.方法:人工合成hsa_circ_0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到...

【关键词】 急性髓系白血病； 环状RNA； hsa_circ_0000254；

【中文期刊】 刘晓艳 方红  等 《浙江大学学报（医学版）》 2013年42卷1期 67-74页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:模拟miR30的框架结构设计针对HPSE的shRNA,将其克隆至慢病毒载体的CMV启动子调控的表达框内,实现Ⅱ型启动子对RNAi的有效调控.方法:设计3条基于miR30骨架的HPSE-shRNA,通过PCR获得目的片段,回收后与线性化...

【关键词】 慢病毒属； 遗传载体； RNA干扰；

【中文期刊】 王美玲 吴茜茜  等 《生物学杂志》 2013年30卷4期 71-74页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 基因组文库是分子克隆和基因组学的技术基础,它主要经历了噬菌体系列文库、人工染色体系列文库和多元载体系列文库三个阶段.介绍了λ噬菌体文库、cosmid文库、P1噬菌体及PAC文库、fosmid文库、YAC文库、BAC文库、MAC文库、HAC文...

【关键词】 基因组文库； 克隆载体； 人工染色体；

【中文期刊】 汤谷平 范辉  等 《浙江大学学报（医学版）》 2012年41卷6期 593-598页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 随着对生物材料学、基因组学及药物学等研究的深入,阳离子聚合物材料在基因传递、药物释放的研究中发挥着越来越重要的作用,受到研究者广泛的关注和重视.文中就阳离子聚合物作为基因载体的特点、研究进展和趋势等作一概述.

【关键词】 阳离子； 聚合物； 遗传载体；

【中文期刊】 马怡晖 于双妮  等 《中华病理学杂志》 2012年41卷7期 470-474页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 构建miR-23a-27a簇真核表达载体并初步探讨该簇的靶基因及其功能.方法 应用分子克隆的方法构建联合表达pre-miR-23 a-27a簇及单独表达pre-miR-23a、pre-miR-27a的真核载体,应用双荧光素酶报告基因试...

【关键词】 微RNAs； 靶基因修复； 遗传载体；

【中文期刊】 张丽 袁红花  等 《实用医学杂志》 2012年28卷3期 370-373页 ISTICPKUCA

【摘要】 目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N...

【关键词】 遗传载体； 启动子； Nestin；

【中文期刊】 朱靖 周颖  等 《安徽医科大学学报》 2011年46卷5期 493-496页 ISTICPKUCA

【摘要】 目的 构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白.方法 用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,...

【关键词】 遗传载体； 原核细胞； 重组融合蛋白质类；

【中文期刊】 王青元 朱靖  等 《安徽医科大学学报》 2011年46卷2期 112-115页 ISTICPKUCA

【摘要】 目的 构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白.方法 用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段克隆到p3×fl...

【关键词】 人乳头瘤病毒18； 原核细胞； 遗传载体；