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【中文期刊】 钱锋 潘卫庆  等 《生物化学与生物物理进展》 2001年28卷5期 732-735页 SCIISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 来源于P1噬菌体的位点专一性重组系统loxP/Cre,已成为一种新的DNA操作的有用工具,在体内外都获得了成功的应用.为了将四环素诱导表达系统引入减毒伤寒杆菌CVD908株中,tetR-loxP-neo串联基因已通过同源重组被定位插入在CV...

【关键词】 Cre； loxP； 位点专一性重组；

【学位论文】 作者： 辛艳丽 导师：邓继先  中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院  生物学 细胞生物学（硕士） 2005年

【摘要】 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是治疗血栓栓塞性疾病的重要药物。本项目的t-PA突变体，活性提高，半衰期延长，已成功获得表达。目前t-PA主要来自于哺乳动物细胞大规模培养，成本高昂，价格昂贵。利用动物乳腺生物反应器来生产不仅维持生产的成本低...

【关键词】 纤溶酶原激活剂； 突变体；

【中文期刊】 陈明 王立霞  等 《植物学报》 2003年45卷12期 1481-1488页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

【摘要】 采用热激启动子Gmhsp17.5C控制Cre定位重组酶介导的DNA删除系统.在这个系统中,在热激启动子控制下的Cre重组酶的表达导致两侧带有相同方向loxp位点的CaMV35S-GUS片段从转基因烟草(Nicotiana tabacum L...

【关键词】 烟草； Cre/lox； Cre重组酶；

【中文期刊】 蔡莹 刘柳  等 《中国医科大学学报》 2016年45卷11期 968-972,976页 ISTICPKUCABP

【摘要】 目的 设计构建针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体,以用于制备相关转基因小鼠,并在体外验证其有效性.方法 剔除pcDNA3.1载体的CMV启动予以及多克隆位点,然后接入带有LacZ-fLoxP插入失活的小鼠U6启动子并引...

【关键词】 shRNA； Chmp1b； Cre/LoxP；

【中文期刊】 李伟  《中国生物化学与分子生物学报》 2006年22卷12期 979-983页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 为获得重组人MBD4蛋白,将编码MBD4的开放式阅读框(ORF)插入原核表达载体pGEX-6P1 GST基因下游的多克隆位点(MCS).将获得的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株扩大培养并用IPTG诱导融合蛋白的表达.用谷胱甘肽琼...

【关键词】 重组人MBD4蛋白； 融合蛋白； Prescision蛋白酶；

【中文期刊】 辛艳丽 贾玉艳  等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷8期 45-50页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1 BAC进行快速改构.首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组...

【关键词】 细菌人工染色体； λRed重组系统； β-酪蛋白基因；

【中文期刊】 王芃 袁盛凌  等 《微生物学通报》 2004年31卷2期 95-99页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 将表达Red体内重组蛋白的质粒pKD46转化大肠杆菌DHSa,用5′端与组氨酸基因同源,3′端与卡那霉素抗性基因同源的引物获得具有卡那霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化DHSa,在λRed重组系统的帮助下,通过卡那霉素抗性基因两侧的组氨...

【关键词】 大肠杆菌； 营养缺陷型； 体内同源重组；

【中文期刊】 王立霞 张珠强  等 《生物工程学报》 2002年18卷4期 497-500页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 Cre重组酶来自噬菌体P1,可以识别特异的loxP位点的DNA序列,并进行专一性的剪切和拼接.利用PCR技术将cre基因克隆至原核表达载体pET-29a,在大肠杆菌BL21(DE3)得到了高效表达.采用DEAE-52柱层析的方法对表达蛋白进...

【关键词】 Cre重组酶； 基因表达； 剪切活性；

【中文期刊】 蔡海莺 沈灵智  等 《中国食品学报》 2019年19卷4期 85-91页

【摘要】 米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点.本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.7...

【关键词】 米黑根毛霉脂肪酶； 重组表达； 毕赤酵母；

【中文期刊】 刘徐兵 周围  等 《军事医学科学院院刊》 2007年31卷2期 101-106页 ISTICCSCDCA

【摘要】 目的:用Red系统快速敲除肠出血性大肠杆菌O157:H7中的分子伴侣基因,构建EHEC O157:H7的突变体.方法:本研究首先合成一对引物(每一条的5'端与ecs4553或者ecs4563基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源),用pKD...

【关键词】 大肠杆菌O157； H7； ecs4553基因；