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【中文期刊】 邓文生 杨希才  等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷3期 309-311页 SCIISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 在锤头型核酶下游增加一段核酶作用的靶序列,使之成为自切割的核酶.将自切割核酶基因合成,扩增并克隆在质粒pBluescript SK上,经连续4次克隆获得含10个拷贝的自切割核酶基因的载体.5%聚丙烯酰胺变性凝胶电泳结果显示:体外转录过程中多...

【关键词】 锤头型核酶； 自切割； 体外转录；

【中文期刊】 杜建勇 邓然  等 《中国实验动物学报》 2015年3期 267-271,290页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的：建立一种gRNA快速合成及检测的方法。方法设计引物并利用PCR技术迅速扩增gRNA的DNA模板片段，然后通过体外转录纯化得到gRNA；最后通过体外反应迅速对gRNA和Cas9酶切效率及特异性进行检测。结果体外合成的gRNA特异性强，活...

【关键词】 CRISPR/Cas9； PCR扩增； 体外转录；

【中文期刊】 朱贤敏 姜利军  等 《华中科技大学学报（医学版）》 2013年42卷6期 699-702页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 构建jak2a野生型(wilde type,wt)载体并完成其在斑马鱼体内的过表达,运用邻联茴香胺染色观察其对红系造血的影响,为后续探讨斑马鱼骨髓增殖性疾病(myeloproliferative disorders,MPD)模型的Ja...

【关键词】 jak2a基因； 定点突变； 体外转录；

【中文期刊】 杨小淦 江明生  等 《动物学杂志》 2008年43卷1期 31-37页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 利用switching mechanism at 5'end of RNAtranscript(SMART)技术对猪单个体外成熟培养的MⅡ期卵母细胞进行了扩增,在此基础上,利用T7体外转录技术进行体外转录,aRNA浓度达到1.962 μg....

【关键词】 猪卵母细胞； SMART技术； T7体外转录技术；

【中文期刊】 杨玉成 王袆琴  等 《第三军医大学学报》 2006年28卷24期 2426-2429页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1 C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选.方法 用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c,重组入pGEM-11zf载体,并用T7RNA聚合酶对其...

【关键词】 体外转录； EB病毒； 潜伏膜蛋白1(LMP1)；

【中文期刊】 周荣荣 卫军霞  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2006年22卷6期 498-507页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7 RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改进,增...

【关键词】 DNA微阵列； 双轮RNA线性扩增； 双轮体外转录；

【中文期刊】 张克斌 戢福云  等 《第三军医大学学报》 2005年27卷24期 2472-2474页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的通过体外转录获得SARS冠状病毒RNA片段,为建立RT-PCR和荧光定量PCR诊断方法提供阳性对照.方法根据GenBank登录SARS冠状病毒Tor2株基因组序列,选择基因组中18138-18327nt作为目的扩增序列,并将其分解为首尾...

【关键词】 SARS冠状病毒； RNA片段； 体外转录；

【中文期刊】 黄英 郭进军  等 《中华肝脏病杂志》 2005年13卷11期 808-810页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的探索T7 RNA聚合酶体外转录方法制备乙型肝炎病毒(HBV)转录后调节基序(HPRE).方法用聚合酶链反应法从含HBV全基因组的模板中扩增HBV HPRE基因,重组入pGEM-11zf载体,并用T7 RNA聚合酶对其进行体外转录.结果成...

【关键词】 肝炎病毒,乙型； DNA指导的RNA聚合酶； 体外转录；

【中文期刊】 阎钟钰 丛敏  等 《中华肝脏病杂志》 2005年13卷3期 187-189页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的研究腺相关病毒(AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒C基因(HBV-C)的抑制作用及机制.方法以pEOB6(含有HBV全长的质粒)为模板,聚合酶链反应法分别扩增出HBV-C启动子基因及含有HBV-C启动子的HBV-C基因.利用pMAL-...

【关键词】 腺病毒,人； 肝炎病毒,乙型； 凝胶阻滞实验；

【中文期刊】 王毅 吴海祥  等 《病毒学报》 2005年21卷1期 43-47页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 为了建立研究猪瘟病毒的技术平台,利用RT-PCR技术构建了猪瘟病毒中国石门株(Shimen)的全长有感染性cDNA克隆pT7SM.通过体外转录线性化的pT7SM并将转录的RNA转染至PK-15细胞中,获得了猪瘟病毒粒子.再用间接免疫荧光法测...

【关键词】 猪瘟病毒； 全长cDNA克隆； 体外转录；