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【中文期刊】 王广兰 宫璀璀 等 《实用医药杂志》 2009年26卷11期 61-63,66页
【摘要】 目的 采用酵母分泌型载体表达人可溶性补体受体1型(sCR1),研究人sCR1高拷贝重组阳性转化子的快速筛选及鉴定.方法 从人外周血中提取总RNA.应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA.然后将其克隆入毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9...
【关键词】 可溶性Ⅰ型补体受体1;毕赤酵母细胞;G418抗性筛选;
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【中文期刊】 谢恒月 唐鹰 等 《遗传学报》 2000年27卷4期 369-376页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 构建了一个含酿酒酵母PRO3基因的分泌型表达载体pCBy310,在pCBy310上插入ρHCG(人绒毛膜促性腺激素ρ亚基)-cDNA以形成一个重组质粒pCBy314.利用酿酒酵母脯氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性,即它们不能在丰富培基中生长,...
【关键词】 用丰富培基作为选择压力;稳定遗传的分泌型载体;Pro+转化子;
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【中文期刊】 郭敏 雷清 等 《中国新药杂志》 2015年24卷3期 271-275,302页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:将胞内表达载体pAO815改建成分泌型表达载体,并体外构建戊型肝炎病毒ORF2128-660多拷贝重组表达质粒,进一步比较不同转化子在毕赤酵母中的表达水平,以得到高表达重组菌株.方法:利用重叠PCR技术将α-factor信号肽基因与目...
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【中文期刊】 张超 刘刚 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷1期 52-58页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从毕赤酵母表达载体pPICZαA出发,构建了可直接克隆PCR产物的毕赤酵母分泌型表达载体(毕赤酵母表达型T载体),并通过表达重组纤维二糖水解酶Ⅱ对该载体进行了检验.设计合适的引物扩增一DNA片段,使该片段的上游含XhoⅠ和Eam1105Ⅰ酶...
- 概要:
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【中文期刊】 杨湘越 兰小鹏 等 《实用医学杂志》 2006年22卷22期 2575-2577页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建表达人干燥综合征抗原A(SSA)的毕赤酵母分泌型表达载体.方法:以人白血病淋巴细胞HL-60株cDNA为模板,RCR扩增目的基因SSA,纯化,双酶切,DNA浓缩回收,插入酵母分泌型表达载体pPIC9k,热冲击法转化感受态大肠杆菌J...
- 概要:
- 方法:
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【中文期刊】 刘林 赵志安 等 《生物工程学报》 2004年20卷6期 958-962页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了获得结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的高效表达,将人α-2a干扰素基因、结核分枝杆菌esat-6基因经PCR扩增并加上相应的酶切位点,两基因之间的DNA接头编码肠激酶识别的多肽,DNA经酶切连接插入分泌型载体pPIC9K,将重...
- 概要:
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【中文期刊】 王清路 张锐 等 《生物工程学报》 2004年20卷5期 730-735页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为获得高效表达外源蛋白的Pichia pastoris菌株而设计了重组质粒pPIC9K-vgbbxn,其中透明颤菌血红蛋白基因vgb胞内表达以提高菌体的发酵密度,腈水解酶基因bxn分泌表达.转化GS115菌株后,通过PCR、SDS-PAGE...
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【中文期刊】 韦红玉 曾怡 等 《检验医学与临床》 2014年11期 1455-1457,1461页ISTICCA
【摘要】 目的:构建人类免疫缺陷病毒病毒 tat基因的重组分泌型真核表达载体并在真核细胞中表达,检测表达的重组蛋白活性。方法聚合酶链反应(PCR)从重组质粒pcDNA3.1(+)/Tat中扩增tat基因,利用 HindⅢ和Bam HⅠ酶切位点分别将t...
【关键词】 人类免疫缺陷病毒病毒;tat基因;分泌型真核表达载体;
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【中文期刊】 杨志广 刘林林 等 《中国实验诊断学》 2010年14卷3期 378-380页ISTIC
【摘要】 目的 构建带有小鼠分泌型内皮抑素(ssEndostatin)的原核表达载体pFLAG-ssEndostatin.方法 利用分子生物学方法,采用Kpn I内切酶将ssEndostatin从pcDNA3.1-Egr1-ssEndostatin质...
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【中文期刊】 刘林林 郭彩霞 等 《中国实验诊断学》 2009年13卷7期 863-865页ISTIC
【摘要】 目的 构建小鼠分泌型γ干扰素(IFN-γ)原核表达载体pFLAG-IFN-γ.方法 利用分子生物学方法,从pcDNA3.1-Egr1-IFN-γ质粒上将IFN-γ切下,然后连接到原核表达载体pFLAG-shift12TM上,构建成pFLAG...
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