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            【中文期刊】 李刚 王强  等 《菌物学报》 2004年23卷2期 255-261页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本文首次建立了一种通过PEG转化缓冲液将外源基因转入灵芝的方法,转化频率约为5~6个/μg(抗性转化子/质粒+107个原生质体).转化子在不含HmB的培养基上经5代以上的继代培养后仍可以稳定表达HmB抗性.Southern blot检测证明...

            【关键词】 原生质体HmBpAN7-1

            浏览:207 被引:93 下载:4

            【中文期刊】 高英杰 赵红桃  《衡水学院学报》 2014年4期 49-51页

            【摘要】 质粒常被用做基因的载体.纯化质粒DNA的方法可以分为3种:碱裂解法、煮沸裂解法和SDS碱裂解法.这些方法可以纯化共价闭合环结构质粒DNA,而大量获得高纯度的闭环结构质粒DNA最经典方法是氯化铯-溴化乙锭密度梯度离心法.该方法经过我们的实践与...

            【关键词】 质粒DNA氯化铯-溴化乙锭密度梯度离心法

            浏览:2 被引:1 下载:0

            【中文期刊】 刘鑫 魏学宁  等 《植物遗传资源学报》 2017年18卷1期 117-124页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等.当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确.为避免这种情况,小麦原生质体制备及高效...

            【关键词】 小麦原生质体核酸酶活性原生质体转化效率

            浏览:191 被引:15 下载:0

            【中文期刊】 高静 李艳波  等 《微生物学报》 2011年51卷9期 1194-1199页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]建立PEG介导的苹果腐烂病菌原生质体遗传转化体系.[方法]本文利用带有hph基因的质粒,以苹果腐烂病菌(Valsa mali var.mali )03-8为受体菌株,通过PEG融合法对其原生体进行转化.[结果]于YEPD内培养48 ...

            【关键词】 原生质体转化hph基因

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            浏览:193 被引:66 下载:0

            【中文期刊】 梁丽存 刘文龙  等 《生物技术进展》 2024年14卷4期 586-593页

            【摘要】 某些化学试剂可以通过调节细胞周期或胞内DNA修复途径来提高基因编辑效率.以塔宾曲霉作为研究对象,通过CRISPR/Cas9工具,对其孢子色素合成相关基因fwn进行基因编辑,在转化过程中分别加入8种化学试剂,最后通过统计孢子颜色和抗性基因PC...

            【关键词】 化学试剂同源重组效率塔宾曲霉

            浏览:7 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 孙丽 许伟宏  等 《植物学报》 2001年43卷10期 1089-1092页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 表达载体p301-bG1含有香菇(Lentinus edodes(Berk.)Sing)三磷酸甘油醛脱氢酶启动子驱动下的gus基因和除草剂抗性基因.利用PEG法实现了p301-bG1对香菇原生质体的转化.香菇原生质体与经PEG纯化的质粒DN...

            【关键词】 香菇转化三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子

            浏览:185 被引:39 下载:0

            【中文期刊】 陶利珍 许秋生  等 《实验生物学报》 2000年33卷1期 85-88页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 <篇首> 基因枪转化技术在水稻的遗传转化上已被广泛地应用并获得显著的成效[1.2].与原生质体转化法相比较,基因枪法具有不受或少受基因型限制的优点且提高了转化效率,但对籼稻,仍有不少问题需要解决,转化系统尚须进一步完善.因此有必要对影响转化频率...

            【关键词】 籼稻基因枪转化影响转化的因素

            浏览:139 被引:12 下载:0

            【中文期刊】 张钟仁 陈鹏  《西北植物学报》 2016年36卷1期 183-189页 ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 高效分离原生质体是遗传转化、细胞融合和再生培养的基础性工作.该实验以苦养(Fagopyrum tartaricum)品种‘榆6-21’的叶肉细胞为材料,研究了酶类组合、甘露醇浓度、酶解时间以及离心速度对苦荞叶肉细胞原生质体分离纯化的影响.结...

            【关键词】 苦荞原生质体分离和纯化

            浏览:167 被引:14 下载:0

            【中文期刊】 周永力 TANAKA Chihiro  等 《生物工程学报》 2003年19卷3期 364-367页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 玉米大斑病是严重危害玉米生产的一个世界性真菌病害.由于玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)在无性生长过程中迅速产生黑色素,致使原生质体难以分离.测试了包括Fungase、Funcelase、Novozyme、Glucan...

            【关键词】 Exserohilum turcicum原生质体提取转化

            浏览:281 被引:30 下载:0

            【中文期刊】 马伟 茅翔  等 《生物工程学报》 2002年18卷6期 662-666页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 头状链轮丝菌(Streptoverticillum caespitosus) ATCC27422是抗肿瘤药物--丝裂霉素A的产生菌,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复...

            【关键词】 头状链轮丝菌复制起始区(oriC)跨属复制起始活性

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