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【中文期刊】 王媛 程盈盈 等 《生物学杂志》 2021年38卷5期 39-42页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为降低体外扩增DNA而引入随机突变的风险,仅通过PCR在CDK2序列5′端接入连接序列.由于双BamHⅠ位点的干扰,cyclin E与CDK2序列无法依次插入载体,故采用双片段连接法将两者一起连接插入质粒载体以构建融合基因;采用相似策略,用...
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【中文期刊】 梁明星 马梦琪 等 《生物技术进展》 2021年11卷1期 111-117页
【摘要】 体外合成DNA伴随的随机突变是制约基因定点突变效率的重要因素.以克隆周期蛋白E(cyclin E)及其截短基因的激酶活性缺失突变体为例,对传统重叠延伸PCR(overlap extension PCR,OE-PCR)作适当改进,提出一种系列...
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【学位论文】 作者：许小勇 导师：程智慧 西北农林科技大学 西北农林科技大学 园艺学 蔬菜学（硕士） 2006年
【摘要】 以加工番茄育种材料B04的果实为材料，对PG基因片段进行了克隆，并构建了正义植物表达载体和反义植物表达载体。主要实验结果如下： (1)提取了B04加工番茄红熟果实总RNA，经过反转录PCR，扩增出一条697bp的目的片段。通过TA...
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【学位论文】 作者：郝炜 导师：王跃进 西北农林科技大学 西北农林科技大学 园艺学 果树学（硕士） 2005年
【摘要】 芪合成酶(STS)是催化植物体内芪类化合物合成的关键酶，乙醛脱氢酶(ALDH)是广泛存在于动物、植物和微生物体内的一类酶，参与体内多种代谢途径，目前它在植物抗病反应中的作用还有待进一步了解。本实验室研究人员通过mRNA差异显示技术(DD.....
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【中文期刊】 刘金宜 富炜琦 等 《中国药理学通报》 2019年35卷5期 733-739页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建ST8Sia1基因过表达载体,建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,检测ST8Sia1的表达及对细胞增殖的影响.方法 通过PCR反应扩增ST8Sia1基因片段,双酶切目的基因片段和pEGFP-C1载体以及pHBLV-CMV-MCS...
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【中文期刊】 张曦 潘玉卿 等 《吉林大学学报（医学版）》 2019年45卷5期 1015-1019页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人早幼粒细胞HL60的cDNA文库,阐明文库内相关基因在急性早幼粒细胞白血病(APL)发生发展中的相关机制.方法:采用Trizol法提取HL60细胞总RNA,离心柱法分离纯化样本中的mRNA,逆转录PCR法合成cDNA第一链,酶促...
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【中文期刊】 武景阳 李朝翠 等 《动物学研究》 2008年29卷4期 368-372页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 描述了一种新的构建cDNA文库的方法,其中用来合成cDNA第一链的随机引物5'-端被加上碱基d(AC),在cDNA双链合成后所添加的连接头的末端含有碱基d(GTCG).在cDNA舣链3'-端,连接头连接上后会形成一个完整的Sall酶切位点d...
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【中文期刊】 任艳鑫 赵留芳 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2013年34卷2期 263-266页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建pEGFP-Nl-TNFα重组质粒并鉴定,为转导CIK细胞并定位表达奠定基础.方法 以pMD19 Simple T-TNFα为模板,PCR扩增TNFα CDS区片段,将PCR产物进行15 g/L琼脂糖凝胶电泳,并回收TNFα条带,...
【关键词】 肿瘤坏死因子；真核表达载体；质粒pEGFP-N1；
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【中文期刊】 朱淳 郭志勇 等 《上海交通大学学报（医学版）》 2013年33卷4期 425-429页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建大鼠血红素氧合酶-1(HO-1)真核表达载体,并以该重组表达载体体外转染培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs).方法 从SD大鼠脾脏中提取总RNA,并经RT-PCR扩增HO-1基因的CDS区全长片段,将PCR产物克隆至pMD-18T...
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