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            【中文期刊】 卫东  陈平  等 《中国预防兽医学报》 2022年44卷11期 1149-1155页

            【摘要】 为在猪链球菌(S.suis)中引入高效的反向筛选标记,本研究根据S.suis密码子偏好性优化了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)蔗糖果聚糖酶基因sacB的密码子,并由公司合成后作为模板,采用PCR扩增sacB基因片段;采用P...

            【关键词】 猪链球菌无痕突变sacB基因

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            【中文期刊】 牛硕  朱梅君  等 《湖北大学学报(自然科学版)》 2022年44卷1期 24-30页

            【摘要】 利用转座子突变技术构建毕赤酵母菌株突变库,并分离出能够在含雷帕霉素(10 ng/mL)培养基中生长的突变株mut375.通过热不对称交错PCR(TAIL-PCR)获取转座子侧翼序列,对转座子的插入位点进行定位.转座子插入PAS_Chr2-2...

            【关键词】 毕赤酵母反向筛选标记转座子突变技术

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            【中文期刊】 李莉玲  《惠州学院学报》 2014年34卷6期 28-35页

            【摘要】 甲醇营养型巴斯德毕赤酵母已被广泛应用于外源蛋白的表达,但是作为一个外源蛋白表达系统,其还有待进一步完善.进一步提高外源蛋白的表达量以及形成折叠正确的目的蛋白,成为了改造毕赤酵母菌株的一个热点.基因缺失,是一个常用的改造和构建新的毕赤酵母重组...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母基因缺失反向筛选标记

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            【中文期刊】 苏丹  凌小翠  等 《基因组学与应用生物学》 2021年40卷2期 713-719页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 草酸青霉是纤维素酶高产真菌,也是科学研究的重要真菌之一.借助基因工程技术手段对工业真菌进行分子改造,可以有效提高菌株在工业生产中的经济效益,对工业菌株进行基因改造需要大量的筛选标记,目前草酸青霉中可用的筛选标记较少,因此需要构建一个草酸青霉...

            【关键词】 草酸青霉筛选标记系统pyrG

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            【中文期刊】 吴果果  宋淑婷  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷11期 78-86页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为进一步简化放线菌的遗传操作流程,缩短重组菌株的筛选周期,在对杀真菌链霉菌(Streptomyces fungicidicus ATCC 21013)进行遗传操作的过程中引入了一个反向筛选标记基因——尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(upp).并通...

            【关键词】 杀真菌链霉菌反向筛选标记尿嘧啶磷酸核糖转移酶

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            【中文期刊】 石杨  董会娜  等 《生物技术通报》 2014年11期 48-54页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin system,TA系统)存在于大部分细菌中。mazEF是大肠杆菌中一种毒素-抗毒素系统。毒素基因mazF编码的MazF毒素蛋白可以特异性地剪切自由mRNA的ACA序列,从而抑制蛋白合成、引起...

            【关键词】 mazF毒素蛋白基因反向筛选标记

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            【会议论文】宋存江 第十七次全国环境微生物学学术研讨会 2014年

            【摘要】 本研究采用的pKSV7在30℃条件下稳定复制,42℃条件下过夜培养质粒便大部分发生丢失。采用了upp作为反向筛选标记。upp编码尿嘧啶磷酸转移酶(uracilphosphoribosyltransferase),能够将尿嘧啶转化为UMP,从...

            【关键词】 淀粉芽孢杆菌优势小基因组无痕敲除法

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            【会议论文】乔雪锋 2012工业生物过程优化与控制研讨会 2012年

            【摘要】 在本课题中,我们尝试在甲醇酵母一毕赤酵母中进行无标记基因修饰的方法,其中以大肠杆菌的毒蛋白MazF作为反向筛选标记。mazF是在AOXl启动子的严紧控制之下,它在毕赤酵母中的诱导表达会抑制细胞的生长。在构建的质粒中,mazF基因和Zeoci...

            【关键词】 毕赤酵母标记基因操作大肠杆菌

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            【中文期刊】 郭敏亮  诸庆  等 《生物化学与生物物理进展》 2009年36卷5期 556-565页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 农杆菌已经用作许多生物过程研究的模型细菌,为了解析这些生物过程的分子机理,对农杆菌的某些基因进行突变就显得非常重要.以自杀性基因sacB作为反向可选择性标记基因,利用同源重组的原理,建立了一种可对农杆菌基因进行准确插入、删除和位点置换的突变...

            【关键词】 农杆菌反向可选择性标记基因同源重组机理

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            【中文期刊】 崔红玉  王云峰  等 《生物工程学报》 2008年24卷4期 569-575页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为构建全基因组鸡马立克氏病病毒814株感染性细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC),首先通过构建表达Eco-gpt(xanthine-guanine phosphoribosyl trans...

            【关键词】 鸡马立克氏病病毒细菌人工染色体分子克隆化病毒

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