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            【中文期刊】 马铭赛  徐锡荣  等 《基因组学与应用生物学》 2020年39卷10期 4680-4685页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为探索利用CRISPR/Cas9系统在拟南芥中进行大片段基因敲除并产生回复突变的可行性及其工作效率,进一步精准验证靶基因在植物的生长发育中以及响应逆境胁迫中所起的作用.本研究利用同源重组法将sgRNA和编码Cas9的序列快速连接构建表达载体...

            【关键词】 CRISPR/Cas9同源重组载体构建

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            【中文期刊】 杨雯虹  杨丽娟  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2017年33卷10期 1076-1082页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 基因改造的1型单纯疱疹病毒(HSV-1)载体在肿瘤溶瘤病毒治疗及基因转导中具有广泛的应用前景.本研究报道一种基于CRISPR-Cas9系统的高效快速的重组HSV-1载体构建方法.首先,双顺反表达靶点gDNA和Cas9核酸酶的基因编辑质粒与同...

            【关键词】 1型单纯疱疹病毒CRISPR-Cas9基因编辑同源重组修复

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            【中文期刊】 綦世金  华再东  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2016年32卷10期 1161-1167页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 肌抑素是肌肉增生的负调控因子,为改良家畜产肉性状的重要候选基因.本研究设计了Cas9/sgRNA表达载体与供体DNA,通过电转染方法将其导入猪PK15细胞,经G418抗性筛选和荧光蛋白标记甄别,筛选到带阳性标记的细胞克隆.通过跨界PCR、长...

            【关键词】 猪肌抑素基因CRISPR/Cas9表达载体同源重组

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            【学位论文】 作者:彭方楠 导师:Daisuke Miki   中国科学院大学   基础医学 遗传学(硕士) 2020年

            【摘要】 基因打靶技术是实现精确修饰生物基因组的有效手段。然而,在高等植物中使用基因打靶技术非常困难。在之前的研究工作中,我们设计了连续转化法,它能够有效地诱导片段敲入或氨基酸替换(5.3%~9.1%)。简单地说,就是使用一个编码同源重组的供体模板和...

            【关键词】 高等植物基因打靶

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            【中文期刊】 刘士元  任皎  等 《病毒学报》 2025年41卷2期 334-343页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 痘苗病毒(Vaccinia virus,VACV)广泛用于疫苗与重组病毒载体.国内拥有自主知识产权的复制缺陷型痘苗病毒天坛株(Non-replicating Tiantan strain Vaccinia virus,NTV)作为新型猴痘疫...

            【关键词】 痘苗病毒天坛株复制缺陷

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            【学位论文】 作者:周翠红 导师:张岩   中国科学院大学   药学 生物技术与医药(硕士) 2013年

            【摘要】 第一部分关于NK、NKT细胞相关Cre重组酶基因敲入小鼠的构建
              基因打靶技术包括基因敲入(Gene knock-in)与基因敲除(Gene knock-out),是通过同源重组将外源基因定点整合入生物基因组上某一确定的位点,以达到...

            【关键词】 基因打靶载体同源重组

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            【学位论文】 作者:陈露璐 导师:陈蘋   中国科学院上海生命科学院研发中心   中国科学院上海生命科学研究院   药学 生物技术与医药(硕士) 2009年

            【摘要】 目的:一、为了研究ET克隆的应用技术,同时研究人类未知功能基因Trim30的基因功能。我们需要构建小鼠该基因打靶载体。二,人类基因组中,Trim30是一种功能未知的基因,本研究拟通过获得该基因敲除的小鼠来实现对其功能的研究。从而进一步评估该...

            【关键词】 打靶载体同源重组

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            【学位论文】 作者:孙运祥 导师:田长富   哈尔滨医科大学   基础医学 免疫学(硕士) 2006年

            【摘要】 本研究的目的是构建含人白细胞介素2(IL-2)的复制缺陷型重组腺病毒,为研究其体内外的抗肿瘤作用打下基础。 方法:将hIL-2DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合,转化大肠杆菌DH5α。得到重组质粒(pDNR-Dual-h...

            【关键词】 白细胞介素-2腺病毒载体

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            【学位论文】 作者:陶然 导师:马立新   湖北大学   基础医学 遗传学(硕士) 2005年

            【摘要】 本研究对已有的一套腺病毒系统——Adeasy系统(包括骨架载体pAdeasy-1和转运载体pShuttle或pShttle-CMV)进行分析,选择两个合适的酶切位点ClaI和AscI用于高通量克隆。由于pAdeasy-1上含有两个AscI位...

            【关键词】 腺病毒方法学

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            【学位论文】 作者:张正 导师:刘丹平   锦州医学院   辽宁医学院   临床医学 外科学(硕士) 2005年

            【摘要】 目的构建同时表达具有抗原表位FLAG标记的骨形态发生蛋白2(BMP2)目的蛋白和报告分子绿色荧光蛋白(GFP)的新型腺病毒真核细胞表达载体。 方法对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的限制性...

            【关键词】 骨形态发生蛋白2绿色荧光蛋白

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