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【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《生物学杂志》 2005年22卷2期 15-17,20页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在大肠杆菌周质中分泌表达rhGH既有利于消除其在临床应用上的抗原性又有利于提取纯化,在rhGH的发酵生产中越来越受到青睐.就rhGH在大肠杆菌中的分泌表达机制以及启动子、引导序列、宿主菌、培养基和培养条件对分泌表达效率的影响等方面进行了综述...
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【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷10期 47-51页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在5L发酵罐中将工程菌pET-ompA3-hGH/BL21(DE3)进行补料式发酵,诱导表达分泌型重组人生长激素.通过对发酵培养基成分、补料成分、补料体积、补料时机和滴加流速的选择,分泌表达rhGH的量可达到250mg/L,占周质蛋白的44...
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【中文期刊】 蒋玉亮 兰萍 等 《成都医学院学报》 2016年11卷4期 409-412页ISTICCA
【摘要】 目的 构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果.方法 以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激...
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【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《军事医学科学院院刊》 2005年29卷1期 55-59页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建分泌型重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)工程菌,优化工程菌表达条件.方法:应用T7启动子与ompA3引导序列构建分泌型表达rhGH工程菌,采用多因素正交优选法初步筛选培养基...
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【中文期刊】 王寅竹 孙涛 等 《微生物学通报》 2022年49卷2期 794-806页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组蛋白在大肠杆菌中表达时,往往面临着形成包涵体的问题,而重组蛋白若是分泌至周质空间则基本解决了这一问题,周质空间的周质蛋白不仅能帮助重组蛋白正确折叠还有利于二硫键的生成.信号肽是一段由15-30个氨基酸组成,被融合在重组蛋白N端的短肽,按...
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【中文期刊】 范丽君 吕立力 等 《药物生物技术》 2014年21卷3期 204-208页ISTICCA
【摘要】 构建阿达木单抗抗原结合片段(Fragment antigen binding,Fab)表达载体,使其在大肠杆菌内高效共分泌表达,周质空间中获得具有活性的目的蛋白.将带有信号肽的Fab片段重链与轻链克隆于带有双启动子的pETDuet-1载体内...
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【中文期刊】 李振国 徐明波 等 《药物生物技术》 2011年18卷1期 73-76页ISTICCA
【摘要】 大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早和应用最广的表达系统,由于大肠杆菌周质空间具有其独特优势,重组蛋向在周质表达和提取技术得到国内外学者的关注.文章从重组蛋白在大肠杆菌周质表达的特点、提高周质蛋白表达的策略以及周质蛋白提取技术进行了论述...
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【中文期刊】 葛高翔 林其谁 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷6期 597-601页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 大肠杆菌周质和外膜蛋白发挥功能必须首先到达其特定亚细胞分区.大肠杆菌通过一系列与蛋白质分泌有关的蛋白(Sec蛋白)将周质和外膜蛋白转运至内膜.在切除了信号肽后,与周质蛋白的定位不同的是,外膜蛋白的最终定位还需要其他因子的协助.外膜蛋白的定位...
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【中文期刊】 霍世元 朱文华 等 《中国免疫学杂志》 2013年29卷10期 1085-1088,1092页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子(VEGF)的Fab片段(眼明,Vasculizumab),并检测其抗VEGF的活性.方法:首先对轻链(LC)及重链(HC)基因进行密码子优化并做了全基因合成,将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及...
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【中文期刊】 李泽鸿 彭其胜 《中国兽药杂志》 2011年45卷3期 9-12页
【摘要】 构建了免疫毒素DAB389(G1y4Ser)2-aMSH的两种表达质粒,其一为胞内表达质粒pET28a/DAB389(Gly4Ser)2-aMSH,其二为胞周质表达质粒pET20b/DAB389(Gly4Ser)2-aMSH.实验结果显示,...
【关键词】 分泌机制；信号肽；DAB389(Gly4Ser)2-aMSH；
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