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【中文期刊】 李国玲 钟翠丽  等 《遗传》 2017年39卷2期 98-109页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 传统转基因技术,如显微注射、转座子、慢病毒转染等将目的基因插入基因组内的整合方式是随机的,这些随机整合对后期转基因动物品系组建和育种带来诸多不利,因此有研究人员提出了定点整合转基因技术.目前该技术的定点整合效率非常低,主要取决于两个方面:一...

【关键词】 同源重组修复； 定点整合； CRISPR/Cas9；

【中文期刊】 李绍祥 张艳霞  等 《实用医学杂志》 2010年26卷8期 1299-1301页 ISTICPKUCA

【摘要】 目的:探讨解决RNA干扰(RNAi)抗HBV作用时间短暂的问题.方法:构建腺病毒/重组腺相关病毒(Ad/rAAv)杂合体病毒,恢复rAAv的定点整合,并借助定点整合的rAAV持续表达shRNA(shon hepairRNA),实现RNAi抗...

【关键词】 RNA干扰； Ad/rAAV杂合体病毒； 定点整合；

【中文期刊】 刘萍 夏立秋  等 《微生物学报》 2008年48卷5期 661-666页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 [目的]研究构建稳定表达外源基因、无抗性标记基因的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis简称Bt)工程菌的方法.在构建Bt工程菌时,高拷贝外源质粒的转入导致Bt芽孢数量减少,芽孢形成期延滞,影响Bt菌株的杀虫活力.而且,外...

【关键词】 苏云金芽孢杆菌； 定点整合； 同源重组；

【中文期刊】 周宏 刘志刚  等 《生物工程学报》 2007年23卷4期 756-762页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 为了克服随机整合建立高表达细胞株时"位置效应"所带来的不可预知的后果,我们尝试建立基于定点整合的CHO高效表达系统.首先设计一个新的高效筛选载体pMCEscan.该载体含有报告基因(k2 tPA)、扩增基因(dhfr)、重组酶识别序列(FR...

【关键词】 CHO细胞； 定点整合； 高效表达；

【中文期刊】 李建民 陈薇  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2005年21卷3期 312-315,318页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:构建含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体.方法:首先克隆FRT序列与HBsAg的融合基因FRT-HBsAg,然后将FRT-HBsAg亚克隆到pCI-neo的MCS中...

【关键词】 定点整合； FRT； CHO/dhfr-细胞；

【中文期刊】 毛琼国 白云  《中国生物工程杂志》 2004年24卷10期 9-12页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展,转基因沉默现象已引起越来越多人的关注.在介绍转基因沉默的概念、分子机理的基础上,着重对提高转基因表达的方法、策略及其研究进展进行综述.分别阐述内含子、组织特异性启动子、增强子、定点整合、DNA大片段...

【关键词】 转基因沉默； 定点整合； 核基质附着区；

【中文期刊】 王先平 胡勇  等 《植物学通报》 2003年20卷2期 137-143页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 基因定点整合技术是20世纪80年代后兴起的一种分子生物学技术,在精细研究基因功能,消除转基因沉默,基因治疗等有重要意义.基因定点整合技术是功能基因组学研究的重要手段.目前关于基因定点整合技术在酵母和鼠胚胎干细胞中的应用已经很成熟,高等植物由...

【关键词】 基因定点整合； 同源重组； 小立碗藓；

【中文期刊】 徐俊杰 童贻刚  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2003年23卷3期 161-164页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 目的运用DNA家族改组方法提高杀菌蛋白(BPI23)的杀菌活性. 方法首先将人、猴、兔BPI23基因的PCR产物等量混合,用DNAaseⅠ消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物2步PCR反应获得与原基因大小相同的改组分子,将其与载...

【关键词】 杀菌蛋白； DNA改组； 定点整合；

【中文期刊】 李卫 郭光沁  等 《生物技术通报》 2000年1期 33-37页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 Cre/lox系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,它能导致在特定的DNA序列(loxP位点)处发生定点重组.该系统可以将外源基因定点整合到染色体上或将特定DNA片段删除;这种定位重组系统在遗传操作中发挥了重要的作用.

【关键词】 Cre/lox； 定点整合； 特定基因删除；

【中文期刊】 李绍祥 张艳霞  等 《中国现代医学杂志》 2010年20卷21期 3254-3256,3262页 ISTICCA

【摘要】 目的 探讨解决RNS干扰(RNA interference,RNAi)抗HBV作用时间短暂的问题.方法 构建腺病毒/重组腺相关病毒(Adenovirus/recombinant adenovirus associated virus,Ad/...

【关键词】 RNA干扰； Ad/rAAV杂合体病毒； 定点整合；