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【中文期刊】 黄艳燕 左文朴 等 《工业微生物》 2009年39卷5期 18-24页ISTICCA
【摘要】 将绿色木霉葡聚糖内切酶EGIII基因亚克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-egl3,转化到大肠杆菌BL21(DE3).利用金属亲和层析对重组EGIII进行纯化,纯化后酶比活力达到6 U/mg蛋白,最适反应温度为60 ℃,...
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【中文期刊】 林丽华 秦国梅 等 《生物工程学报》 2009年25卷6期 927-931页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 对内切葡聚糖酶的功能改进一直是纤维素酶研究领域的焦点.本研究对台湾家白蚁内切葡聚糖酶(CfEG)的活性位点做了饱和突变.首先,以PDB数据库中高山象白蚁内切葡聚糖酶(NtEG)的三维结构(PDB id=1ks8)为模板,对CfEG进行三维结...
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【中文期刊】 李亚平 种慧敏 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2019年40卷3期 459-464页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase,PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案.方法 以大肠杆菌碱性磷酸酶(...
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【中文期刊】 佘文文 倪静 等 《湖北大学学报（自然科学版）》 2019年41卷1期 1-4,9页
【摘要】 定点饱和诱变技术一直以来被广泛应用于蛋白的定向进化和代谢途径的研究,然而建立偏爱性低的高质量饱和突变库一直面临着严峻挑战.提出一种改进的建立智能突变体文库的方法,选取柠檬烯环氧水解酶(LEH)为突变对象,摒弃传统的NNK/NNN密码子简并引...
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【中文期刊】 吴芹 臧嘉 等 《食品与生物技术学报》 2019年38卷7期 65-70页
【摘要】 为改善米曲霉木聚糖酶AoXyn11A的温度特性,基于其三维结构的同源建模和分子动力学模拟,随机替换最高B-factor值位点处的Gly21.以重组表达质粒pET-28a-A oxyn11A为模板,采用全质粒两步PCR技术对AoXyn11A基...
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【中文期刊】 史京辉 陈文慧 等 《生物技术通报》 2024年40卷1期 322-331页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]11α,17α-双羟基黄体酮是重要的甾体激素类药物中间体,应用价值大.赭曲霉(Aspergillus ochraceus)CICC 41473 的 11α羟化酶CYP68J5 是转化 17α-羟基黄体酮生成 11α,17α-双羟基黄...
【关键词】 11α,17α-双羟基黄体酮；11α羟化酶；定点饱和突变；
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【中文期刊】 徐依聪 李家璜 等 《药物生物技术》 2024年31卷3期 221-227页ISTICCA
【摘要】 采用理性设计策略提高费氏弧菌转录因子LuxR蛋白的转录激活能力.利用蛋白质建模和分子对接方法构建了 LuxR同源二聚体-3-oxo-C6-HSL复合物,进一步采用分子动力学模拟并进行结合自由能分析,寻找影响LuxR活性的潜在突变位点,最终借...
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【中文期刊】 董新林 胡青 等 《生物技术》 2024年34卷2期 158-164页ISTICCA
【摘要】 [目的]建立一种快速、高通量筛选3-甾酮-Δ1-脱氢酶(KstD)突变体库的方法.[方法]基于已发表KstD蛋白晶体结构,设计饱和突变引物,构建突变体文库,优化蛋白表达条件,利用冻融法结合溶菌酶法获得粗酶液;基于分光光度法原理,优化检测反应...
【关键词】 3-甾酮-Δ1-脱氢酶；定点饱和突变；高通量筛选；
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【中文期刊】 柴宝成 姜钰琳 等 《生物工程学报》 2022年38卷2期 749-759页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 染料木素及其单糖苷衍物在食品和医药领域具有重要作用,但难溶于水的特性极大地限制了其应用范围,研究表明糖基化反应可有效提高其水溶性.文中针对来源于软化芽孢杆菌的环糊精葡萄糖基转移酶,研究其对染料木素单糖苷衍生物槐角苷的糖基化反应.通过对D18...
【关键词】 染料木素；槐角苷；环糊精葡萄糖基转移酶；
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【中文期刊】 王越 李江华 等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷3期 56-64页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG)是谷氨酸脱氨基的酮酸产物,作为一种重要的有机酸广泛用于食品、医药、精细化工等领域.为提高L-氨基酸脱氨酶全细胞催化法合成α-KG的效率及产量,首先通过优化全细胞催化剂制备条件及...
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